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2022
09-16

干貨分享|眼科藥物研究的實驗動物選擇
“小眼睛，大世界”，眼是人類感官中最重要的器官，是采集信息的最重要的窗口。眼睛雖小，細分的疾病卻很多，有些眼科疾病可能會造成失明。我國是眼科疾病的高發(fā)區(qū)，常見眼疾包括屈光不正（如近視、遠視、老花眼及散光）、結膜炎、干眼癥、白內(nèi)障、瞼緣炎、視網(wǎng)膜疾病、斜視、弱視、青光眼及葡萄膜炎等。其中，白內(nèi)障是致盲的首要病因，在60歲以上的人群中發(fā)病率高達80%~90%；非致盲類疾病中屈光不正正逐漸成為社會日益關注的焦點問題，20歲以下人群近視率接近70%，且還在進一步增加。隨著國民健康意識的提升，除了“看得見
2022
09-09

IPHASE 自然殺傷（NK）細胞分選試劑盒—NK細胞治療研究的新起點
1自然殺傷（NK）細胞優(yōu)勢近年來，人類NK細胞因其在生物學基礎研究的重要研究進展和腫瘤治療臨床應用中的的巨大潛力而備受科學界和產(chǎn)業(yè)界的廣泛關注。NK細胞主要來源于骨髓造血干細胞中的CD34+淋巴細胞，約占外周血淋巴細胞總數(shù)的10%~20%。NK細胞雖然來源于淋巴細胞，但是與T/B淋巴細胞不同，NK細胞屬于固有免疫，不依賴MHC分子即可發(fā)揮殺傷腫瘤細胞的功能，能夠殺滅發(fā)生免疫逃逸的腫瘤細胞。NK細胞殺傷靶細胞的三種機制如下：目前對于NK細胞的研究表明，在細胞治療的應用中與T細胞相比，NK細胞具有更
2022
09-07

血漿在新藥研發(fā)中的應用
血漿是血液的重要組成部分，其主要成分是水、血漿蛋白、葡萄糖、激素、礦物離子以及多種水解酶等。在新藥研發(fā)過程中，血漿除了可作為空白基質(zhì)，考察分析方法的準確性和可靠性外，更重要的作用是作為試驗系統(tǒng)，研究化合物在血漿中的穩(wěn)定性和藥物與血漿蛋白的結合情況，為成藥性研究提供數(shù)據(jù)支持。1血漿在ADME研究中的應用1.1血漿在蛋白結合研究中的應用藥物蛋白結合率的測定是新藥開發(fā)過程中的一項重要工作，藥物的血漿蛋白結合程度不但會影響到藥物的處置特征，而且還和藥物的藥理作用息息相關。普遍認為，只有游離藥物才能被組織
2022
09-05

常見的培養(yǎng)緩沖液有哪些
緩沖溶液是由足夠濃度的共軛酸堿對(弱酸與它的共軛堿，或弱堿與它的共軛酸)所組成的混合溶液，具有抵抗外加少量強酸、強堿或稍加稀釋，而保持其pH基本不變的能力，該能力也稱緩沖作用。(1)CO2緩沖液光合作用實驗里，CO2緩沖液有吸收CO2的能力，控制變量。CO2緩沖液是當反應系統(tǒng)內(nèi)二氧化碳增多時，二氧化碳緩沖液吸收二氧化碳，反之，當系統(tǒng)內(nèi)二氧化碳減少時，二氧化碳緩沖液釋放二氧化碳。(2)碳酸氫鹽緩沖液人體血漿里最重要的緩沖體系是碳酸氫鹽緩沖體系是：NaHCO3與H2CO3人體各組織、細胞代謝產(chǎn)生的C
2022
08-22

PBMC細胞凍存液使用方法及注意事項
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。目前，細胞凍存的技術是液氮冷凍保存法，利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)，并保持細胞特性。通過冷凍方式保存細胞，可以在需要時進行復蘇及繼續(xù)培養(yǎng)。最佳的冷凍條件是盡可能地降低細胞內(nèi)的晶體形成，減少細胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對細胞造成的低溫損傷。除了我們知道的緩慢冷凍，液氮低溫保存，快速復蘇外，凍存液的選擇也非常重要。1產(chǎn)品簡介匯智和源無血清細胞凍存液，優(yōu)化了其配方組分，能夠更大程度的減少細胞在凍存、復蘇時的損傷。本品不含
2022
08-15

高效CD3/CD28刺激磁珠上線啦！
目前，體外模擬T細胞活化的雙信號作用，聯(lián)合使用CD3和CD28抗體刺激T細胞，是進行T細胞激活和擴增的方法。針對T細胞激活與擴增，匯智和源研發(fā)團隊研制以免疫學為基礎以及納米磁珠技術為核心，研制出能夠高效刺激T淋巴細胞增值的免疫磁珠產(chǎn)品。圖1：IPHASECD3/CD28beads刺激淋巴細胞原理IPHASECD3/CD28beads分離刺激人淋巴細胞流程圖2：IPHASECD3/CD28beads分選刺激淋巴細胞擴增流程IPHASECD3/CD28beads刺激T淋巴細胞增值培養(yǎng)3天后，開始形成
2022
08-05

細胞的凍融要經(jīng)歷什么流程
冷凍保護劑添加了冷凍保護劑的凍存液，一般都是高滲透壓的。當細胞從生理溶液轉移到低溫保存溶液時，由于胞外溶液中的滲透壓較高，細胞會脫水，同時低溫保存溶液的小分子擴散到細胞內(nèi)時，細胞體積會緩慢減少；如果冷凍保存液中只有非穿透性冷凍保護劑(如葡聚糖和蔗糖)，細胞也會脫水并保持脫水狀態(tài)，只是冷凍保護劑不能進入細胞內(nèi)。在解凍復蘇階段，水從細胞外的低滲溶液迅速移動到細胞內(nèi)的高滲透溶液，而小分子冷凍保護劑則向相反的方向緩慢移動，導致細胞體積膨脹，并達到細胞內(nèi)外的滲透壓恢復平衡。所以，在細胞冷凍處理和解凍復蘇的
2022
07-29

原代肝細胞三維培養(yǎng)模型在藥物代謝和毒性評估中的應用
原代肝細胞二維（2D）培養(yǎng)具有操作簡單、費用低等優(yōu)點，是目前體外藥物代謝和毒性評估廣泛使用的細胞模型。由于2D培養(yǎng)不能模擬體內(nèi)微環(huán)境和細胞生長狀態(tài)，2D細胞模型在組織結構、基因表達以及生物學特性等方面與體內(nèi)細胞相去甚遠。三維（3D）細胞培養(yǎng)可提供與體內(nèi)相似的支架系統(tǒng)，創(chuàng)建與體內(nèi)類似的生長環(huán)境，具有與來源組織十分接近的結構特征和功能特性。肝細胞3D培養(yǎng)模型必將在未來藥物代謝、毒性評估以及疾病細胞模型中逐步取代2D肝細胞模型。13D培養(yǎng)簡介1.13D細胞培養(yǎng)定義3D細胞培養(yǎng)是指將具有三維結構的材料與
2022
07-26

微量波動Ames試驗試劑盒——藥物早期毒性篩選的選擇
1微量波動Ames試驗在藥物發(fā)現(xiàn)與早期篩選階段，微量波動Ames試驗（AmesFluctuationTest）可以在化合物用量較少的情況下，有效篩選排除具有遺傳毒性的化合物。匯智和源針對微量波動Ames試驗，開發(fā)出一套包含整個實驗主要試劑的試劑盒——微量波動Ames試驗試劑盒，試劑盒以微型96孔板形式進行細菌突變測試，適用于早期藥物遺傳毒性評估，可在測試化合物有限的情況下進行預篩選。2IPHAES微量波動Ames試劑盒的優(yōu)勢自己配試劑：菌株穩(wěn)定性差！試劑多！計數(shù)煩！費時間！易污染！等貨期！微量波
2022
07-19

說說一相代謝穩(wěn)定性實驗原理
藥物在一相代謝反應中主要發(fā)生氧化、還原和水解的反應，經(jīng)過Ⅰ相代謝反應，藥物可能帶有一些極性基團，如羥基、羧基等。氧化反應是最多見的第Ⅰ相反應，單加氧酶系是氧化異源物最重要的酶，單加氧酶主要存在于滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的微粒體中，能催化烷烴、烯烴、芳烴和類固醇等多種物質(zhì)進行氧化。由細胞色素P450、NADPH+H+、NADPH-細胞色素P450還原酶（以FAD為輔基的黃酶），催化基本反應為：RH+O2+NADPH+H+→ROH+NADP++H2O單加氧酶能直接激活氧分子，使其中一個氧原子直接加入底物分子中形成
2022
07-15

微量波動Ames試驗在遺傳毒理研究中的應用
1微量波動Ames試驗簡介1.1Ames試驗發(fā)展歷程細菌回復突變試驗（BacterialReverseMutationTest)，亦稱Ames試驗，于1975年由美國加利福尼亞大學伯克利分校生化系B.N.Ames教授實驗室建立并不斷發(fā)展完善，至今已成為基因毒性測試中應用尤為廣泛的一種方法，通常是體外毒理學測試的第一步，廣泛應用于化合物的致突變性和潛在致癌性的初篩檢驗。近幾年，將M.H.L.Green等人創(chuàng)建的大腸桿菌回復突變試驗引入其中，形成現(xiàn)在較為成熟的細菌回復突變試驗（包括鼠傷寒沙門氏菌細菌
2022
07-11

原代肝細胞的分離、培養(yǎng)與應用
肝臟是藥物代謝的重要器官，體外代謝模型多以肝臟為基礎。常用的體外模型有肝微粒體、肝S9、肝胞質(zhì)液、原代肝細胞、肝組織切片、重組人代謝酶等。其中，原代肝細胞因具有較好的體外試驗重現(xiàn)性，基本維持了肝臟的代謝功能，特別是較好的保留了與體內(nèi)一致的酶水平，成為了體外藥物試驗的“金標準”，廣泛應用于藥物代謝與毒理學研究中。1原代肝細胞及其應用原代肝細胞(Primaryhepatocytes)是指從動物肝臟取出后立即培養(yǎng)的肝細胞。原代肝細胞作為一種體外模型，具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點：①與體內(nèi)環(huán)境保持一致
2022
07-11

進行磁珠分選有哪些操作要求
磁珠分選，也被稱為免疫磁珠細胞分選，包括使用針對特定細胞表面抗原的抗體標記細胞進行選擇或去除。被標記的細胞與磁珠交聯(lián)，一旦被置于磁場中，即可被吸附。免疫磁珠分選有兩種方式：有柱式分選和無柱式分選。操作磁珠分選有哪些要求1移液槍吸取液體要準確2移液槍的槍頭在吸取磁珠或者抗體的時候，槍頭要剛好伸進液面以下，不要伸到瓶子底部，以免槍頭沾了過多的試劑，再帶到了細胞懸液中3磁珠使用前要渦旋混勻4磁極插入細胞懸液5min之后，轉移細胞的時候，特別是最后一滴細胞懸液，如果滴不下來，不要晃動磁極，這樣會降低細胞
2022
07-08

Ames試驗原理是怎樣的？
Ames試驗用于檢測待分析物質(zhì)的致突變作用，該驗靈敏、高效、檢測范圍廣。利用鼠傷寒沙門氏組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株，該缺陷型菌株不能合成組氨酸，故在缺乏組氨酸的培養(yǎng)基上，僅少數(shù)自發(fā)回復突變的細菌生長；假如有致突變物存在，則營養(yǎng)缺陷型的細菌誘導回復突變成原養(yǎng)型，因而能生長形成菌落，據(jù)此判斷受試物是否為致突變物。某些致突變物需要代謝活化后才能引起回復突變，故需加入經(jīng)誘導劑誘導的大鼠肝制備的S9混合液。北京匯智泰康醫(yī)藥技術有限公司針對Ames試驗開發(fā)Ames試劑盒，本試劑盒省去了培養(yǎng)基成分準備、誘導S9制備
2022
07-07

細胞分選方法概述
1細胞分選方法概述細胞學研究中一個很重要的課題就是細胞的分離純化，尤其是需要對某種特定的細胞進行功能研究，如對細胞培養(yǎng)上清液通過ELISA分析檢測細胞因子、細胞共培養(yǎng)檢測細胞功能等，都需要得到高純度的目的細胞。因此，高效地分離所需要的目的細胞是進行細胞功能研究的先決條件。細胞分選（cellsorting）是指根據(jù)細胞所具有的特性把某種特定的細胞亞群從混合的細胞樣品中分離出來的一種技術，它是對某一特定細胞進行生化分析和功能分析的前提和基礎。常用的細胞分選方法主要有兩大類：一類是基于細胞物理性質(zhì)的密
2022
07-01

Ⅱ相代謝穩(wěn)定性實驗原理及實驗方法
1概述1.1藥物代謝研究簡介藥物代謝研究是創(chuàng)新藥物研發(fā)的重要內(nèi)容，它不僅決定了創(chuàng)新藥物制劑研發(fā)的成敗，而且與創(chuàng)新藥物研發(fā)的速度和質(zhì)量有密切關系。因而，藥物代謝研究在新藥研發(fā)工程中具有*的重要作用，研究藥物代謝對于了解藥物在體內(nèi)的變化過程至關重要。藥物代謝研究的方法主要分為體內(nèi)和體外兩種。體內(nèi)代謝法因藥物在生物體內(nèi)的分布較廣，加上代謝轉化的器官和酶系的多樣性，使藥物及其代謝產(chǎn)物在體內(nèi)的濃度比較低，代謝產(chǎn)物的檢測具有一定的困難。體外代謝法在短時間內(nèi)可以得到大量的代謝產(chǎn)物，且代謝條件可控，代謝體系比較
2022
06-30

酶抑制IC50試驗研究原理和試驗方法
1酶抑制研究的重要性藥物代謝的主要場所是肝臟，其中細胞色素P450（CYP）酶為主要的代謝酶，其亞型CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4參與了體內(nèi)80%以上的藥物代謝。CYP酶是一個多功能的酶系，在體內(nèi)具有可誘導性和可抑制性。該酶與藥物的相互作用能夠在所有的體內(nèi)過程（包括吸收、分布、代謝和排泄）中發(fā)生，其中以代謝過程尤為突出，約占40%。近年發(fā)現(xiàn)，藥物相互作用是臨床上產(chǎn)生嚴重不良反應甚至死亡的主要原因之一。CYP參與的藥物相互作用主要
2022
06-29

Ficoll密度梯度離心法提取PBMC原理及注意事項
外周血單個核細胞（PeripheralBloodMononuclearCell，PBMC），是指外周血中具有單個核的細胞，包括淋巴細胞（Lymphocyte）、單核細胞（Monocyte）、樹突狀細胞（DC）和其他少量細胞。PBMC可通過健康人或動物供體的外周血，通過Ficoll密度梯度離心法（IPHASE/匯智和源），磁珠分選等步驟獲得。Ficoll是蔗糖的多聚體，中性，平均分子量400,000，當密度為1.2g/mL，未超出正常生理性滲透壓，也不穿過生物膜。紅細胞、粒細胞比重大，離心后沉于管
2022
06-28

Ficoll密度梯度離心法分離PBMC
外周血單個核細胞（PeripheralBloodMononuclearCell，PBMC），是指外周血中具有單個核的細胞，包括淋巴細胞（Lymphocyte）、單核細胞（Monocyte）、樹突狀細胞（DC）和其他少量細胞。1原理單個核細胞的體積、形態(tài)和比重與外周血其它細胞不同，紅細胞和多核白細胞的比重超過1.080，單個核細胞的比重為1.070左右，血小板為1.030左右。因此，可利用各種血細胞和單個核細胞比重之間的差異將各種血細胞與單個核細胞分離開來。Ficoll密度梯度離心法是分離、純化P
2022
06-27

人CD3+T淋巴細胞陽性分選原理及注意事項
一細胞分選方法概述細胞學研究中一個很重要的課題就是細胞的分離純化，尤其是需要對某種特定的細胞進行功能研究，如對細胞培養(yǎng)上清液通過ELISA分析檢測細胞因子、細胞共培養(yǎng)檢測細胞功能等，都需要得到高純度的目的細胞。因此，高效地分離所需要的目的細胞是進行細胞功能研究的先決條件。細胞分選（cellsorting）是指根據(jù)細胞所具有的特性把某種特定的細胞亞群從混合的細胞樣品中分離出來的一種技術，它是對某一特定細胞進行生化分析和功能分析的前提和基礎。常用的細胞分選方法主要有兩大類：一類是基于細胞物理性質(zhì)的密

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