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多重?zé)晒饷庖呓M化Q&A——第三彈2023/05/31: Q：我該如何得到wan美的多色結(jié)果呢？A：首先，您需要有質(zhì)量不錯(cuò)的樣本和抗體，這就已經(jīng)是成功的一半（樣本、抗體選擇攻略），對(duì)于樣本來(lái)說(shuō)，脫片是我們需要預(yù)防的“頭號(hào)公敵”，多色實(shí)驗(yàn)需要重復(fù)熱修復(fù)洗脫抗體多次，假如片子脫片，輕則成像模糊，重則組織脫落前功盡棄，可以在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)之前先模擬幾輪熱修復(fù)，不加抗體和其他試劑，看看組織是否有脫落的跡象，如果脫落比較嚴(yán)重，則需要重新制備切片，如果有輕微脫片，則可以考慮購(gòu)買抗體洗脫液（abs994），替代熱修復(fù)的過(guò)程；然后，就可以開(kāi)始做實(shí)驗(yàn)了，我們建議您*行抗體和染

干細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染利器--jetOPTIMUS之干細(xì)胞應(yīng)用篇2023/05/24: 干細(xì)胞被認(rèn)為是可用于建模和修復(fù)細(xì)胞功能的強(qiáng)大和最靈活的細(xì)胞類型。目前干細(xì)胞被廣泛用于藥物篩選、細(xì)胞治療、疾病建模、毒理學(xué)和基因組編輯研究，可以說(shuō)幾乎用于任何基礎(chǔ)和轉(zhuǎn)化研究領(lǐng)域。重要的是，其中許多技術(shù)依賴于將基因和/或蛋白質(zhì)成功引入干細(xì)胞，例如CRISPR/Cas9基因編輯。然而，干細(xì)胞，特別是多能干細(xì)胞（即能夠產(chǎn)生任何體細(xì)胞類型的細(xì)胞）特別難以轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染干細(xì)胞時(shí)最大的挑戰(zhàn)是細(xì)胞死亡，這在非病毒和病毒轉(zhuǎn)染遞送方法之后都有報(bào)道。此外，由于對(duì)細(xì)胞死亡的易感性和快速自我更新，干細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率可能低于其他

青少年EVs miRNA的改變與重度抑郁癥、注意力缺陷/多動(dòng)癥和焦慮癥的關(guān)系2023/05/22: 精神健康障礙是全球傷殘調(diào)整生命年（DALYs）的10個(gè)主要原因之一，抑郁癥和焦慮癥成為全球10-24歲人群中主要疾病負(fù)擔(dān)。這些疾病的風(fēng)險(xiǎn)與外周標(biāo)記物的相關(guān)性強(qiáng)，因此，許多體液中的細(xì)胞外囊泡（ev）被越來(lái)越多地認(rèn)為是精神病學(xué)分子研究的重要目標(biāo)，它們足夠小，可以跨越血腦屏障[1]。例如，最近的一項(xiàng)研究表明，ev中較高水平的miRNAmiR-139-5p與MDD（重度抑郁癥）相關(guān)，在小鼠MDD患者中注射含有這種miRNA的ev導(dǎo)致小鼠中隨后的抑郁樣行為[2]。在另一項(xiàng)研究中，MDD患者血漿ev中的mi

雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒——讓您的實(shí)驗(yàn)更Easier！2023/05/18: 報(bào)告基因是一類使表達(dá)產(chǎn)物易于被檢測(cè)的基因,其作用原理是將報(bào)告基因的編碼序列及其表達(dá)調(diào)控序列與目的基因融合形成嵌合基因,在調(diào)控序列的作用下進(jìn)行表達(dá),通過(guò)對(duì)報(bào)告基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)來(lái)評(píng)價(jià)目的基因的表達(dá)狀況。常見(jiàn)的報(bào)告基因包括螢光素酶(Luciferase)、氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶(CAT)、β-半乳糖苷酶(β-gal)、分泌性人胎盤堿性磷酸酶(SEAP)和綠色熒光蛋白(GFP)等。螢光素酶（Luciferase）是一類在生物體內(nèi)能夠催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的酶,從自然界能夠發(fā)光的生物體內(nèi)分離獲得。由于特異

多重?zé)晒饷庖呓M化Q&A——第一彈2023/05/17: Q：我想要進(jìn)行多色實(shí)驗(yàn)，對(duì)于我的樣本有什么要求嗎？A：您按照免疫組化的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)您的樣本進(jìn)行前處理即可。如果是從歷史切片或者蠟塊中挑選用來(lái)做多色，請(qǐng)盡量選取相對(duì)較新的樣本（一個(gè)月內(nèi)），最長(zhǎng)不要選保存超過(guò)半年的樣本，可能會(huì)有靶點(diǎn)缺失或者強(qiáng)非特異性，導(dǎo)致染色效果欠佳。附上石蠟切片樣本處理推薦：取新鮮組織（理想的取材厚度是0.2cm~0.3cm），如取的組織過(guò)大，需要切小后再做固定，以免組織太厚固定液滲透不良，導(dǎo)致后續(xù)染色效果不佳組織離體后（不要超過(guò)30分鐘）迅速轉(zhuǎn)移到固定液中（一般選用10%中性福爾馬林

螢火蟲的妙用2023/05/17: 夏夜，一切都顯得朦朧、幽暗，似乎連空氣都變得清馥馥的。在豆棚架邊、在林下水邊、在籬前的草叢里，流螢飛起來(lái)了，三三兩兩，忽前忽后，時(shí)高時(shí)低，那么輕悄、飄忽，好像一些看不見(jiàn)的小精靈提著綠幽幽的燈籠，飛來(lái)飛去，那美妙的形象和色彩，著實(shí)迷人-------這些描寫螢火蟲的景象是否勾起了大家對(duì)于童年夏夜的美好回憶？螢火蟲發(fā)光的過(guò)程，簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，是螢光素（luciferin）在螢火蟲螢光素酶的催化下發(fā)生的一系列復(fù)雜化學(xué)反應(yīng)，而光即是這個(gè)過(guò)程中所釋放的能量。這一反應(yīng)非常節(jié)省能量，幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光

動(dòng)物造模專題——脂多糖炎癥模型2023/05/11: 一、脂多糖簡(jiǎn)介脂多糖（Lipopolysaccharides，LPS）是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁中的一種te有成分，又稱內(nèi)毒素，感染宿主后可導(dǎo)致膿毒癥、膿毒性休克和多器官功能障礙綜合癥。LPS借助信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路誘發(fā)宿主的應(yīng)答，刺激免疫細(xì)胞產(chǎn)生大量具有致熱效應(yīng)的炎性細(xì)胞因子，引起免疫系統(tǒng)的過(guò)度活化。二、脂多糖信號(hào)通路LPS通過(guò)結(jié)合宿主細(xì)胞表面受體，激活炎性細(xì)胞因子基因表達(dá)并引起炎癥反應(yīng)，啟動(dòng)細(xì)菌感染的致病過(guò)程。圖1是LPS信號(hào)通路的示意圖[1]。進(jìn)入血流后，脂多糖首先被血清中的LPS結(jié)合蛋白(LPS2b

Organotial奶牛乳腺類器官培養(yǎng)基試劑盒——新發(fā)上線2023/05/11: 奶牛的乳腺分支形態(tài)發(fā)育是完成泌乳功能的基本條件。乳腺分支結(jié)構(gòu)可以通過(guò)提高乳腺腺泡組織的數(shù)量和分泌功能來(lái)提高奶牛乳產(chǎn)量。3D培養(yǎng)可以在體外誘導(dǎo)組織器官分支形態(tài)的發(fā)生,已經(jīng)是研究乳腺分支形態(tài)普遍使用的方法。類器官（Organoids）是器官特異性細(xì)胞類型的3D細(xì)胞集合，這些細(xì)胞從干細(xì)胞或器官祖細(xì)胞發(fā)育而來(lái)，并能以與體內(nèi)相似的方式經(jīng)細(xì)胞分序(cellsortingout)和空間限制性的系別分化而實(shí)現(xiàn)自我組建。奶牛乳腺類器官明場(chǎng)圖展示產(chǎn)品信息:?培養(yǎng)簡(jiǎn)單?擴(kuò)增效率高?維持穩(wěn)定傳代?培養(yǎng)成功率80%以上貨

分子克隆技術(shù)——質(zhì)粒介紹篇2023/05/11: 上期我們給大家介紹了分子克隆的概念、原理以及通用實(shí)驗(yàn)流程，大家應(yīng)該對(duì)分子克隆技術(shù)應(yīng)該有了一定的了解吧?本期小愛(ài)將為大家?guī)?lái)分子克隆的載體——質(zhì)粒的介紹。走！瞅瞅去!分子克隆技術(shù)運(yùn)用的載體只要是指將DNA片段（目的基因）轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的一種能自我復(fù)制的DNA分子工具。常見(jiàn)的載體主要有質(zhì)粒、噬菌體、病毒等。今天咱們要聊的主角是質(zhì)粒。什么是質(zhì)粒？天然質(zhì)粒是可獨(dú)立于染色體外可自行復(fù)制的環(huán)狀DNA分子，通常帶有一些基因，特別是一些與抗生素耐藥性有關(guān)的基因，可以在不同的細(xì)菌細(xì)胞之間傳遞。質(zhì)粒主要存在于細(xì)胞、

干貨分享 | 給您一雙鑒別支原體污染的慧眼2023/05/06: 很多小伙伴都疑惑，細(xì)胞被支原體污染后的特征是什么？如何鑒別細(xì)胞被支原體污染了？今天，小愛(ài)帶大家分享兩個(gè)支原體污染的案例，共同探尋一下細(xì)胞被支原體污染后的特征。圖1感染支原體的EBTr（牛胚氣管細(xì)胞）01牛胚氣管細(xì)胞先來(lái)觀察一下被支原體污染的牛胚氣管細(xì)胞（圖1），由成纖維樣逐漸變得類上皮樣；質(zhì)膜鋪展，潰爛；輪廓不清，邊界模糊。再看右圖，細(xì)胞處于邊增殖邊凋亡的狀態(tài)，漂浮凋亡細(xì)胞過(guò)多。圖2感染支原體的HT1080（人纖維肉瘤細(xì)胞）02人纖維肉瘤細(xì)胞再觀察一下被支原體污染的人纖維肉瘤細(xì)胞HT1080（圖

多色文獻(xiàn)解讀：肝膽多同病——膽汁淤積型肝炎2023/05/06: 古語(yǔ)有云“肝膽相照，榮辱與共”，而在生物體中，肝和膽也是一對(duì)“榮辱與共”的器官，兩器官位置相鄰，任何一者出現(xiàn)問(wèn)題，另一者往往不能幸免。在消化系統(tǒng)中，肝主疏泄，分泌膽汁；而膽附于肝，作用則為貯藏、排泄膽汁，當(dāng)膽汁的分泌和排泄出現(xiàn)障礙時(shí)，就會(huì)導(dǎo)致膽汁淤積癥，對(duì)肝細(xì)胞及機(jī)體造成損傷，疾病進(jìn)展后期則可能導(dǎo)致肝纖維化、肝硬變和最終的肝功能衰竭。2021年9月軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院柴進(jìn)教授組在EMBOMolecularMedicine(IF:12.137)期刊上在線發(fā)表了題為“AhomozygousR148Wmu

產(chǎn)品專題——百日咳毒素及其應(yīng)用2023/04/24: 百日咳毒素（PertussisToxin，PTX）是鮑特氏菌屬百日咳桿菌所產(chǎn)生的一種主要毒力因子，具有多種生物學(xué)活性，能引起百日咳眾多的臨床癥狀，同時(shí)也是主要的免疫原。與大多數(shù)哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞結(jié)合并特定靶向G蛋白，抑制G蛋白及其在信號(hào)通路中的生理功能。正是依賴Gi家族的蛋白偶聯(lián)受體來(lái)抑制信號(hào)通路的能力，使得PTX成為細(xì)胞生物學(xué)研究中的一種重要工具。圖1用Gαi抑制劑PTX（50ng/ml）和Gαq抑制劑FR900359（1μM）預(yù)處理對(duì)HEK293T細(xì)胞中QRFP26（1μM）受體介導(dǎo)的Ca2+

細(xì)胞染色專題——熒光染料選擇指南2023/04/24: 細(xì)胞培養(yǎng)后，需要對(duì)其生長(zhǎng)情況、形態(tài)甚至生物學(xué)性狀進(jìn)行觀察。由于細(xì)胞小而復(fù)雜，若不借助適當(dāng)?shù)氖侄危y以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu)，更難發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前，已有多種研究細(xì)胞的技術(shù)，從光學(xué)顯微鏡到電子顯微鏡，從一般細(xì)胞化學(xué)法到免疫化學(xué)法。細(xì)胞染色是研究細(xì)胞生物學(xué)特征的一種常用手段，然而，對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)新手來(lái)說(shuō)，想要獲得一張漂亮的細(xì)胞染色圖并不容易。染色試劑不會(huì)選、細(xì)胞染色不均勻、染色時(shí)切片脫落等都是很常見(jiàn)的問(wèn)題。今天小愛(ài)就為大家整理了幾種常用細(xì)胞染色方法及染色劑選擇指南，快來(lái)學(xué)習(xí)！表1幾種常

mRNA質(zhì)量檢測(cè)之poly A尾檢測(cè)方法2023/04/24: 首先我們需要先回顧下3’端polyA尾的功能：保護(hù)帽結(jié)構(gòu)不被降解，與polyA結(jié)合蛋白、5’Cap（帽結(jié)構(gòu)）和翻譯起始因子蛋白協(xié)同作用，啟動(dòng)蛋白質(zhì)的翻譯。多數(shù)mRNA的polyA長(zhǎng)度為50–200nt，以維持正常的生物學(xué)功能。polyA尾的有無(wú)與長(zhǎng)度是mRNA藥物的關(guān)鍵質(zhì)量屬性之一。當(dāng)前polyA尾的檢測(cè)分為兩種思路：①與加帽率的分析策略類似，酶切后純化回收3’端polyA尾，隨后通過(guò)毛細(xì)管電泳（CE）、變性聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）、高效液相色譜（HPLC）或液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）

“痛到窒息”的子宮內(nèi)膜異位癥2023/04/23: 廣大女生朋友對(duì)于痛經(jīng)一詞應(yīng)該十分熟悉甚至感同身受，痛經(jīng)形成的因素有很多，一般就是受涼或者吃了刺激食物所致，熬過(guò)頭幾天就好了，但假如非常疼痛甚至到了“呼吸都痛”的地步，就要警惕有可能是子宮內(nèi)膜異位癥！子宮內(nèi)膜異位癥（endometriosis，EM）簡(jiǎn)單點(diǎn)來(lái)說(shuō)就是原本應(yīng)該待在子宮里的內(nèi)膜跑到了別的地方去。最常見(jiàn)的比如子宮內(nèi)膜長(zhǎng)到卵巢上，就會(huì)變成卵巢巧克力囊腫，或者長(zhǎng)到子宮肌層，就會(huì)形成子宮腺肌癥。研究表明，EM患者的免疫細(xì)胞數(shù)量和功能會(huì)發(fā)生改變，特別是巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、T細(xì)胞和細(xì)

使用脂質(zhì)封裝的編碼長(zhǎng)效IL-2突變蛋白的mRNA可選擇性激活和擴(kuò)增調(diào)節(jié)性T細(xì)胞2023/04/23: 2022年7月5日，Moderna公司的EricHuang等人在NatureCommunications期刊發(fā)表了題為：SelectiveactivationａndexpansionofregulatoryTcellsusinglipidencapsulatedmRNAencodingalong-actingIL-2mutein（使用脂質(zhì)封裝的編碼長(zhǎng)效IL-2突變蛋白的mRNA可選擇性激活和擴(kuò)增調(diào)節(jié)性T細(xì)胞）的研究論文。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）在各種人類自身免疫疾?。ㄈ缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)

His標(biāo)簽蛋白純化面面觀——His標(biāo)簽蛋白純化流程2023/04/20: 到His標(biāo)簽，大家一定都不陌生。His標(biāo)簽是一個(gè)只有6個(gè)組氨酸的小標(biāo)簽，但神通廣大。首先，His標(biāo)簽比較小，對(duì)蛋白結(jié)構(gòu)和功能影響較小，一般純化后也可以無(wú)需切除；其次，His標(biāo)簽可以和其他標(biāo)簽一起使用，增加純化的純度；此外，His標(biāo)簽也可以在變性條件下進(jìn)行蛋白純化，適用于特殊的操作或者包涵體純化；最后，His標(biāo)簽蛋白的純化方式多樣，純化工藝也非常成熟，可以選擇重力操作和離心操作，也可以選擇AKTA純化系統(tǒng)。His標(biāo)簽如此好用，各位是不是也躍躍欲試了呢？今天小優(yōu)給大家整理了我們使用頻率很高的重力純化

星型膠質(zhì)細(xì)胞在癲癇中的角色：敵人？還是朋友？2023/04/20: 癲癇在全球影響著大約5000萬(wàn)人，盡管它相對(duì)普遍，但目前為止還沒(méi)有確定某一種特定的細(xì)胞類型或通路是產(chǎn)生該疾病的主要原因。星形膠質(zhì)細(xì)胞一直是大量癲癇研究中的主要研究對(duì)象。然而，關(guān)于星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)癲癇是產(chǎn)生正向或反向的作用的仍然沒(méi)有明確的答案。最近的研究則表明星形膠質(zhì)細(xì)胞與中腦星形膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(MesencephalicAstrocyte-derivedNeurotrophicFactor，MANF)可能具有預(yù)防作用。關(guān)于癲癇我們知道些什么？癲癇會(huì)影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)，導(dǎo)致大腦發(fā)生

HCPure多模式配體層析——高效去除抗體藥物生產(chǎn)中HCPs 和其他雜質(zhì)2023/04/19: 自1986年第一個(gè)單克隆抗體（mAb）藥物上市以來(lái)，全球已有超過(guò)100種單抗藥物獲得了FDA批準(zhǔn)。經(jīng)過(guò)30多年的研究和發(fā)展，單抗藥物以其高度特異性和療效確切的特點(diǎn)，已被用于多種疾病，包括腫瘤、風(fēng)濕病、血液和感染性疾病等。隨著全球人口老齡化日益加重、慢性病越來(lái)越普遍，單抗藥物及過(guò)程開(kāi)發(fā)變得越來(lái)越必要。單克隆抗體（mAb）由中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO），E.coli和HEK等多種不同類型的細(xì)胞表達(dá)。然而，除了所需的單抗外，這些宿主細(xì)胞還會(huì)產(chǎn)生其他蛋白質(zhì)，稱為宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)(HCP)，這些蛋白質(zhì)可能會(huì)引

關(guān)于紅細(xì)胞裂解液，三分鐘您就懂2023/03/16: 紅細(xì)胞膜是由磷脂、膽固醇、蛋白質(zhì)等組成的雙層膜結(jié)構(gòu)。在紅細(xì)胞裂解液中，主要包含了陰離子表面活性劑(如十二烷基磺酸鈉)和滲透壓調(diào)節(jié)物(如葡萄糖)，這些物質(zhì)可以分解紅細(xì)胞膜，使紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白。作用機(jī)制主要有以下幾種：滲透裂解，通過(guò)改變細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境的滲透壓差，使細(xì)胞溶解；離子置換，與細(xì)胞內(nèi)離子互相置換，從而使細(xì)胞發(fā)生溶解；肌動(dòng)蛋白降解，針對(duì)肌動(dòng)蛋白進(jìn)行降解，從而實(shí)現(xiàn)紅細(xì)胞的裂解。紅細(xì)胞裂解液的應(yīng)用：(1)蛋白質(zhì)提取可用于體積小，難以直接提取的組織和細(xì)胞類型中的蛋白質(zhì)提取。同時(shí)水解的SDS還能夠增

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