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選擇actin內(nèi)參抗體的一些建議2023/03/07
Actin是一種高度保守的細(xì)胞骨架蛋白,廣泛存在于真核細(xì)胞中。在細(xì)胞內(nèi),Actin主要負(fù)責(zé)維持細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞間通訊、細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸以及細(xì)胞運(yùn)動(dòng)等生理過(guò)程。Actin分為肌動(dòng)蛋白和非肌動(dòng)蛋白兩類。其中,肌動(dòng)蛋白主要存在于肌肉細(xì)胞中,非肌動(dòng)蛋白則存在于各種類型的細(xì)胞中。有多種類型,如β-Actin、γ-Actin、α-Actin等。其中,β-Actin是應(yīng)用廣泛的Actin內(nèi)參抗體之一。與其他類型的Actin蛋白相比,β-Actin在各種類型的細(xì)胞中表達(dá)水平相對(duì)穩(wěn)定,因此其常被用于標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果??贵w效
bd流式細(xì)胞儀是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng)分析和分選的裝置2023/02/16
bd流式細(xì)胞儀是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng)分析和分選的裝置。它可以快速測(cè)量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把細(xì)胞亞群從中分選出來(lái)。多數(shù)流式細(xì)胞計(jì)是一種零分辨率的儀器,它只能測(cè)量一個(gè)細(xì)胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標(biāo),而不能鑒別和測(cè)出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說(shuō),它的細(xì)節(jié)分辨率為零。由液流系統(tǒng)、光學(xué)與信號(hào)轉(zhuǎn)換測(cè)試系統(tǒng)和數(shù)字信號(hào)處理及放大的計(jì)算機(jī)系統(tǒng)三大基本結(jié)構(gòu)組成。在對(duì)細(xì)胞懸液中的單個(gè)細(xì)胞或其超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行多參數(shù)快速自動(dòng)分析過(guò)
多色文獻(xiàn)解讀:神經(jīng)bing理性疼痛調(diào)控新機(jī)制2023/02/14
神經(jīng)bing理性疼痛(neuropathicpain)是由軀體感覺(jué)系統(tǒng)的損害或疾病導(dǎo)致的疼痛,患者的臨床癥狀表現(xiàn)為各種各樣的疼痛。它的成因和發(fā)病機(jī)制都十分復(fù)雜,外傷、感染、中毒、腫瘤、神經(jīng)壓迫、免疫與遺傳等多種病因均可導(dǎo)致神經(jīng)損傷,發(fā)病機(jī)制包括外周敏化、中樞敏化、下行抑制系統(tǒng)的失能、脊髓膠質(zhì)細(xì)胞的活化、離子通道的改變等。近日,浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院腦科學(xué)與腦醫(yī)學(xué)學(xué)院高志華團(tuán)隊(duì)聯(lián)合浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院骨科王躍團(tuán)隊(duì)在JCIINSIGHT在線發(fā)表題為“mTOR-neuropeptideYsignalin
類器官實(shí)操大本營(yíng)之——HE 染色2023/02/10
1.實(shí)驗(yàn)材料蘇木精染液、伊紅染液、乙醇、二甲苯、中性樹膠、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、眼科鑷、蓋玻片、載玻片、顯微鏡。2.實(shí)驗(yàn)步驟(1)石蠟切片脫蠟至水依次將切片放入二甲苯Ⅰ10min;二甲苯Ⅱ10min;無(wú)水乙醇Ⅰ5min;無(wú)水乙醇Ⅱ5min;95%酒精5min;90%酒精5min;80%酒精5min;70%酒精5min;蒸餾水洗。(2)蘇木素染細(xì)胞核切片入Harris蘇木素染3-8min,自來(lái)水洗。(3)伊紅染細(xì)胞質(zhì)切片入伊紅染液中染色1-3min,自來(lái)水洗。(4)脫水封片將切片依次放入95%酒精I(xiàn)5m
腫瘤免疫微環(huán)境相關(guān)研究介紹2023/02/09
在過(guò)去的幾個(gè)世紀(jì)里,腫瘤的概念已經(jīng)從一個(gè)異常增殖細(xì)胞的簡(jiǎn)單聚集演變成一個(gè)高度組織的“器官”。構(gòu)成腫瘤的各種成分被稱為腫瘤微環(huán)境,在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中,包括但不限于巨噬細(xì)胞、DC(dendriticcell)、中性粒細(xì)胞、B細(xì)胞、T細(xì)胞、CAF(tumorassociatedfibroblast)等多種細(xì)胞被招募到腫瘤細(xì)胞周圍的微環(huán)境中,與ECM(extracellularmatrix)等元素共同構(gòu)成TIME(tumorimmunemicroenvironment)(圖1)。圖1TIME的組成在B
HUVEC細(xì)胞培養(yǎng)攻略2023/02/09
臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HumanUmbilicalVeinEndothelialCells,HUVEC)是臍靜脈的重要構(gòu)成細(xì)胞之一。當(dāng)進(jìn)行血管內(nèi)皮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí),通常使用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,而非靜脈內(nèi)皮細(xì)胞或動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞。永生化的HUVEC會(huì)通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶RFP基因或GFP基因。HUVEC細(xì)胞基本信息HUVEC細(xì)胞基本信息名稱HUVEC(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)形態(tài)上皮樣生長(zhǎng)特性貼壁接種密度8.0x103-3.0x104viablecells/cm2傳代比率1:2-1:3圖1HUVEC(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
兩篇文章帶你解析腫瘤免疫微環(huán)境相關(guān)研究思路2023/02/09
在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中,包括但不限于巨噬細(xì)胞、DC(dendriticcell)、中性粒細(xì)胞、B細(xì)胞、T細(xì)胞、CAF(tumorassociatedfibroblast)等多種細(xì)胞被招募到腫瘤細(xì)胞周圍的微環(huán)境中,與ECM(extracellularmatrix)等元素共同構(gòu)成腫瘤免疫微環(huán)境TIME(tumorimmunemicroenvironment)。在TIME中的多種成分,包括T細(xì)胞、B細(xì)胞以及分泌的相關(guān)因子等雖然對(duì)腫瘤起著免疫作用,但還有許多其它成分,如細(xì)胞方面包括M2型巨噬細(xì)胞、Treg
ATP酶活性檢測(cè)試劑盒的作用2023/02/02
ATP酶,又稱為三磷酸腺苷酶,是一類能將三磷酸腺苷(ATP)催化水解為二磷酸腺苷(ADP)和磷酸根離子的酶,這是一個(gè)釋放能量的反應(yīng)。在大多數(shù)情況下,能量可以通過(guò)傳遞而被用于驅(qū)動(dòng)另一個(gè)需要能量的化學(xué)反應(yīng)。這一過(guò)程被所有已知的生命形式廣泛利用。鳥苷-5'-三磷酸,(GTP),是一類嘌呤類核苷三磷酸,GTP在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中起的作用,特別是和G蛋白作用時(shí)以及在第二信使機(jī)制中,在GTP酶的催化作用下,GTP會(huì)轉(zhuǎn)化為GDP(二磷酸鳥苷)。ELIPA驅(qū)動(dòng)蛋白ATP酶檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)無(wú)機(jī)磷酸鹽測(cè)定),貨號(hào):(C
流式細(xì)胞法科普知識(shí)大全,你真不一定都懂2023/02/02
流式細(xì)胞法是一種對(duì)液流中排成單列的細(xì)胞或其它生物微粒(如微球,細(xì)菌,小型模式生物等)逐個(gè)進(jìn)行快速定量分析和分選的技術(shù)?,F(xiàn)代流式細(xì)胞儀產(chǎn)生于上世紀(jì)六七十年代。經(jīng)過(guò)近四十年的發(fā)展和完善,今天的流式細(xì)胞儀已經(jīng)十分成熟,并被廣泛的運(yùn)用于從基礎(chǔ)研究到臨床實(shí)踐的各個(gè)方面,涵蓋了細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)及臨床檢驗(yàn)等領(lǐng)域,在各學(xué)科中發(fā)揮著重要的作用。一種在液流系統(tǒng)中,快速測(cè)定單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞器的生物學(xué)性質(zhì),并把特定的細(xì)胞或細(xì)胞器從群體中加以分類收集的技術(shù)。其特點(diǎn)是通過(guò)快速測(cè)定庫(kù)爾特電阻、
如何快速啟動(dòng)siRNA文庫(kù)篩選2023/01/31
客戶:小刀,我之前有聽過(guò)你的siRNA文庫(kù)講座,還挺感興趣的客戶:但是我們實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有高通量?jī)x器,也可以做siRNA文庫(kù)篩選嗎?會(huì)不會(huì)太麻煩?DAO:不會(huì)很麻煩,小幾十個(gè)基因的篩選排槍就能搞定,高通量?jī)x器一般適用于幾百、幾千或幾萬(wàn)個(gè)基因的篩選客戶:之前沒(méi)做過(guò)siRNA篩選,我有點(diǎn)怕我操作不好DAO:這個(gè)不用太擔(dān)心,基本的轉(zhuǎn)染操作和單基因一致,只不過(guò)通常是用96孔細(xì)胞板進(jìn)行,所以需要多些細(xì)心和耐心客戶:好的,那我可以試試看客戶:對(duì)了,你講座中提到的成品文庫(kù),我看了下,這些基因家族分類和我想要研究的方
PART3 片段化分析儀助力食道癌的綜合性RNA數(shù)據(jù)集分析2023/01/31
食道癌(EAC)是全球top6高致死率的癌癥。NDB是已知的EAC前體病變,表現(xiàn)為食管的正常鱗狀粘膜被柱狀上皮覆蓋。其可經(jīng)歷低度異性增生(LGD)到高度異型增生(HGD),最終發(fā)展到食道癌。在過(guò)去的幾十年里,食道癌的發(fā)病率急劇增加。因此迫切的需要更好地了解疾病的病因,并識(shí)別新的預(yù)后和預(yù)測(cè)性生物標(biāo)志物,以提高患病的生存概率。在本文中,科學(xué)家們選取了17位不同的食道癌患者的樣本,進(jìn)行了綜合的數(shù)據(jù)分析。基于這些數(shù)據(jù),共形成了3種生物型,共有119個(gè)表達(dá)譜,包括miRNA(51)、mRNA(51)和ci
酶聯(lián)/熒光免疫斑點(diǎn)分析技術(shù)常見問(wèn)題解答2023/01/28
一ELISPOT(酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù))/FluoroSpot(熒光免疫斑點(diǎn)技術(shù))的區(qū)別ELISPOT(酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù))FluoroSpot(熒光免疫斑點(diǎn)技術(shù))FluoroSpot是在ELISpot基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的,使用熒光檢測(cè)代替比色法。熒光免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)結(jié)合了ELISpot的靈敏性和同時(shí)分析幾種分析物分泌的能力,適用于單次檢測(cè)和大規(guī)模篩選不同功能特征的細(xì)胞群檢測(cè)。熒光免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)是將夾心法與熒光標(biāo)記檢測(cè)法相結(jié)合,對(duì)同一孔內(nèi)的兩種或多種分析物進(jìn)行檢測(cè)。案例說(shuō)明:通過(guò)ELISpot和FluoroSp
植物提取物抗xin冠病毒研究進(jìn)展2023/01/18
植物提取物是以植物為原料,通過(guò)物理化學(xué)等方式獲取植物中的某一種或多種有效成分所形成的天然產(chǎn)品。其應(yīng)用領(lǐng)域非常廣泛,包括食品、醫(yī)藥、飼料、化妝品等,植物提取物的分類見表1。由于天然植物提取物具有較強(qiáng)的生物活性,如免疫調(diào)節(jié)、抗感染、增強(qiáng)抗氧化能力、抗炎等作用[1],對(duì)其藥用價(jià)值的探究也一直受到廣大研究者的關(guān)注。自2019年xin冠病毒感染爆發(fā)以來(lái),目前有效且被人熟知的治療方案仍然很少。國(guó)內(nèi)外在植物提取物預(yù)防和治療新冠感染的研究中取得了顯著成果,以下是Absin收集的幾種植物提取物在抑制xin冠病毒效
免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)·基礎(chǔ)篇2023/01/18
WhatisCo-IP?Co-IP全稱Co-Immunoprecipitation,中文學(xué)名免疫共沉淀,是一種以抗體和抗原識(shí)別專一性為基礎(chǔ),用于研究蛋白質(zhì)之間相互作用的經(jīng)典方法。通俗點(diǎn)來(lái)說(shuō),假設(shè)我們需要研究樣品中A蛋白和B蛋白之間是否存在一些相互作用,首先我們通過(guò)合適的方法處理樣本,將蛋白提取出來(lái)(同時(shí)不能破壞蛋白之間的相互作用),然后用預(yù)先結(jié)合了瓊脂糖珠或者磁珠的A蛋白抗體捕獲樣本中的A蛋白,那么與A蛋白結(jié)合的B蛋白也能一起沉淀下來(lái)。再將蛋白從珠子上裂解下來(lái),對(duì)B蛋白進(jìn)行檢測(cè),能檢測(cè)到,說(shuō)明B
類器官實(shí)操大本營(yíng)之——固定包埋2023/01/17
1.類器官收集收集生長(zhǎng)至較大尺寸類器官:96孔板,生長(zhǎng)密度較大時(shí),使用移液槍取半孔以上,清洗1至3遍,洗去大部分基質(zhì)膠,離心沉淀,棄除大部分上清。2.瓊脂糖固定槽制備(可一次制備一批,溫密閉保存)1)稱量0.2至0.4g瓊脂糖,加入至燒杯或者小試劑瓶?jī)?nèi);2)加入10mL左右PBS;3)微波爐高火融化,每隔5s暫停打開,觀察,重復(fù)數(shù)次至瓊脂糖融化完;4)取約200uL融化瓊脂糖,加入至600uLEP管內(nèi);5)在盛有瓊脂糖的小EP管內(nèi)插入一小PCR管,使瓊脂糖形成一圓尖底凹槽,室溫或者4℃冰箱靜置數(shù)
BioXcell常見問(wèn)題2023/01/17
1.如何正確保存BioXcell抗體產(chǎn)品采用4℃避光無(wú)菌條件保存,現(xiàn)配現(xiàn)用。2.BioXcell抗體的保質(zhì)期有多久采用正確的保存條件,保證1年。3.收到的BioXcell抗體有絮狀物/沉淀,是否正常存在聚集物或沉淀物屬于正?,F(xiàn)象,不會(huì)影響抗體的活性??梢栽谑覝叵螺p輕搖晃使其溶解。4.BioXcell抗體的體內(nèi)使用濃度是多少?每周注射幾次由于不同客戶使用的小鼠品系、動(dòng)物模型、干預(yù)條件、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)等因素均不相同,故廠家和公司不提供適合特定客戶的使用濃度以及注射頻率的方案。常見的使用濃度為10mg/kg
抗體結(jié)構(gòu)分析太復(fù)雜?FabRICATOR幫你實(shí)現(xiàn)定點(diǎn)酶切!2023/01/17
對(duì)于抗體結(jié)構(gòu)的質(zhì)量定量,完整的結(jié)構(gòu)解析包括整體結(jié)構(gòu)分析、亞基水平分析和肽圖。其中亞基水平分析在抗體藥物結(jié)構(gòu)分析中對(duì)設(shè)備要求低,分析時(shí)間短,且做為QC認(rèn)證的試驗(yàn)方法,有助于在研發(fā)前期理解抗體結(jié)構(gòu)。Genovis抗體酶切產(chǎn)品可以在亞基水平幫助我們分析抗體片段的結(jié)構(gòu),獲得均勻的Fab和Fc片段。而目前應(yīng)用較為廣泛的胰蛋白酶(Trypsin)、木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)切割位點(diǎn)并不專一,特異性差,酶切結(jié)果隨時(shí)間的變化容易造成抗體未被切開或過(guò)度消化的結(jié)果。因此,Genovis可以
鐵死亡也能治療肝臟疾???——一文帶你了解其通路機(jī)制2023/01/16
肝臟疾病是世界范圍內(nèi)導(dǎo)致人類死亡的主要原因之一,并且呈逐年上升趨勢(shì)。幾種形式的程序性細(xì)胞死亡,包括凋亡,壞死和鐵死亡,都與各種肝病的發(fā)病機(jī)制有關(guān),因此,阻斷肝細(xì)胞死亡可以為保護(hù)肝臟免受損傷和相關(guān)疾病提供一種有效的策略。鐵死亡是一種鐵依賴性的細(xì)胞死亡形式,小優(yōu)之前也整理過(guò)幾篇鐵死亡相關(guān)文章,從研究歷程到正式命名,再到通路研究,不清楚的同學(xué)可以戳鏈接再了解。越來(lái)越多的研究表明,鐵死亡在血色素沉著病、酒精相關(guān)性肝病(ALD)、丙型肝炎病毒(HCV)感染、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)和肝細(xì)胞癌(HCC
三氟甲基分子砌塊助力新藥研發(fā)2023/01/12
關(guān)鍵詞:分子砌塊;三氟甲基;1,1,1-三氟丙酮;3-溴-1,1,1-三氟丙酮;新藥研發(fā)分子砌塊是指一類用于合成具有特定活性的復(fù)雜化合物的基本單元。在化學(xué)領(lǐng)域,砌塊或分子砌塊是具有活性官能團(tuán)的虛擬分子片段或真實(shí)分子。砌塊可用于特性分子結(jié)構(gòu)“自下而上”的組裝。在新藥研發(fā)最開始的階段,研究人員使用并組合不同的分子砌塊對(duì)化合物進(jìn)行篩選和評(píng)估,從而找到一個(gè)各個(gè)方面都符合要求的化合物作為臨床候選物。分子砌塊是整個(gè)小分子藥物的最上游,是化學(xué)藥物研發(fā)的起點(diǎn),同時(shí)也伴隨藥物研發(fā)的全流程。新藥研發(fā)前期藥企或研究機(jī)
如何將自然界中的生物發(fā)光現(xiàn)象運(yùn)用到報(bào)告基因中?2023/01/10
對(duì)于自然界中的生物發(fā)光現(xiàn)象,大家應(yīng)該都是比較熟悉的,其廣泛存在于海洋生物、微生物和陸生生物中。生物發(fā)光現(xiàn)象其實(shí)是在生物體內(nèi)由于生命過(guò)程中由化學(xué)反應(yīng)介導(dǎo)的將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能所產(chǎn)生的,這其中起到主要作用的是一種叫熒光素酶的物質(zhì)。熒光素酶是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,具代表性的是螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶,被廣泛應(yīng)用到生物學(xué)的報(bào)告基因中—一類可以編碼熒光蛋白或酶,從而將看不見的底物轉(zhuǎn)化為發(fā)光或彩色產(chǎn)物的一類基因報(bào)告系統(tǒng),光信號(hào)可通過(guò)發(fā)光檢測(cè)儀或CCD相機(jī)進(jìn)行檢測(cè),是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域基礎(chǔ)研究的一個(gè)
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