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免疫衛(wèi)士-T細(xì)胞培養(yǎng)攻略2024/07/03
T細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)的衛(wèi)士,肩負(fù)著適應(yīng)性免疫的重?fù)?dān),在細(xì)胞免疫和體液免疫都有著關(guān)鍵性的作用。不僅如此,基于T細(xì)胞的三大免疫療法:CAR-T、TCRT、TILs也在“遍地開花”。截止目前,F(xiàn)DA共批準(zhǔn)了6款CAR-T產(chǎn)品,中國也上市了5款CAR-T產(chǎn)品,全球共有11款CAR-T產(chǎn)品獲批!2024年2月16日,全球shou款TIL療法-lifileucel(LN-144)獲批上市,用于治療晚期黑色素瘤,成為有望攻克實體瘤的又一把利劍。類器官與T細(xì)胞的共培養(yǎng)也是一大研究“爆點”:T細(xì)胞與腫瘤類器官共培養(yǎng)
CUT和Tag: 新型蛋白質(zhì)-DNA互作研究工具2024/06/14
表觀遺傳學(xué)研究中,在分子層面研究蛋白質(zhì)與DNA之間的相互作用有助于我們更深入的理解特定細(xì)胞功能和疾病發(fā)病機(jī)制。CST為了幫助科研人員更快的獲得可靠的實驗結(jié)果,進(jìn)一步擴(kuò)大了蛋白質(zhì)-DNA互作研究產(chǎn)品組合,重磅推出了完整的CUT&Tag(CleavageUnderTargetsandTagmentation)解決方案,包括CUT&Tag試劑盒(#77552)、建庫試劑盒(#47415)、抗體和適用于細(xì)胞以及組織的實驗步驟說明書。CUT&Tag實驗步驟對于CSTCUT&Tag實驗,首先將細(xì)胞與刀豆蛋白
探索電動移液器的工作原理與維護(hù)要點2024/06/03
電動移液器的工作原理與維護(hù)要點概述如下:工作原理電動移液器采用先進(jìn)的微型電機(jī)技術(shù)作為其動力源。通過電流的驅(qū)動,電機(jī)帶動活塞或泵頭進(jìn)行上下活動,從而實現(xiàn)了液體的吸取和排放。這一過程中,電機(jī)的轉(zhuǎn)速和轉(zhuǎn)向被精確控制,確保了液體樣品的精確吸取和排放。此外,電動移液器還配備了可調(diào)節(jié)的容量旋鈕或數(shù)字顯示屏,用戶可以根據(jù)實驗需求設(shè)定所需的液體體積。移液器內(nèi)部的控制系統(tǒng)會根據(jù)設(shè)定的容量值,精確控制電機(jī)的運動,確保液體轉(zhuǎn)移的精確性。維護(hù)要點定期校準(zhǔn):為確保移液精度,電動移液器應(yīng)定期進(jìn)行校準(zhǔn)。這可以在使用前或使用一
【科研明星細(xì)胞】HEK293細(xì)胞系培養(yǎng)攻略2024/05/30
HEK293細(xì)胞系家族歷史概覽1973年,科學(xué)家從一個父母譜系不祥的人類流產(chǎn)胚胎的腎臟中分離出最原始的人胚腎細(xì)胞,即293細(xì)胞(humanembryonickidney(HEK)293cellline),該細(xì)胞被轉(zhuǎn)入修改后的5型腺病毒DNA片段,一開始轉(zhuǎn)化非常困難,一直到幾個月后,科學(xué)家得到一個穩(wěn)定的可以快速生長的293單克隆細(xì)胞株,自此HEK293誕生。HEK293細(xì)胞在細(xì)胞生物學(xué)和生物技術(shù)中的應(yīng)用頻率僅次于第一個人類細(xì)胞系HeLa,并衍生出數(shù)百種克隆細(xì)胞系。SV40largeT抗原穩(wěn)轉(zhuǎn)入HE
ELISA包括哪些實驗步驟和注意事項2024/05/23
ELISA實驗步驟圖3ELISA標(biāo)準(zhǔn)實驗流程實驗前準(zhǔn)備:1.樣本采集:a)血漿:采集血漿時可使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝血劑。采集后30分鐘內(nèi),1000xg離心15分鐘。立即檢測或分裝后于≤-20℃儲存。避免反復(fù)凍融。b)細(xì)胞培養(yǎng)上清液:通過離心去除顆粒,立即檢測或分裝后將樣品于≤-20°C儲存。避免反復(fù)凍融。c)細(xì)胞裂解液:在裂解緩沖液中裂解細(xì)胞并將其放在冰上靜置30分鐘。14,000xg離心5分鐘除去不溶物。將上清液轉(zhuǎn)移至新管中利用總蛋白分析法定量總蛋白濃度。立即檢測或分裝后將樣品于
深入解析電動移液器的核心技術(shù)與應(yīng)用2024/05/08
電動移液器,作為現(xiàn)代實驗室中的工具,以其高效、精準(zhǔn)和便捷的特性贏得了科研人員的青睞。下面,我們將深入解析電動移液器的核心技術(shù)及其在實驗室中的應(yīng)用。電動移液器的核心技術(shù)主要體現(xiàn)在其精準(zhǔn)計量和穩(wěn)定吸液分液的能力上。其內(nèi)部采用電機(jī)驅(qū)動活塞上下運動,通過吸、擠手柄調(diào)節(jié)吸液和排液量,完成液體的容積分配和移液操作。這種設(shè)計不僅提高了操作的精度,還保證了實驗結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性。在應(yīng)用方面,電動移液器廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)療研究、醫(yī)藥工業(yè)、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。在分子生物學(xué)實驗中,電動移液器被用于DNA/RNA樣本的提取
細(xì)胞培養(yǎng)dmso的具體步驟和要求以及注意事項2024/04/25
一、細(xì)胞復(fù)蘇將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。移人15ml離心管中,加入10ml預(yù)熱的DMEM*培養(yǎng)基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10mlDMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入10mlDMEM*培養(yǎng)基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。二、細(xì)胞傳代細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時.去培養(yǎng)基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加人1mlDMEM*培養(yǎng)基終止胰酶消化
明星蛋白——GSPT12024/04/15
GSPT1是一種翻譯終止因子,通過結(jié)合eRF1來識別終止密碼子,迫使蛋白質(zhì)在翻譯后從核糖體中分離。下調(diào)GSPT1可導(dǎo)致多種腫瘤細(xì)胞中關(guān)鍵蛋白的異常表達(dá),抑制細(xì)胞增殖或誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。GSPT1蛋白產(chǎn)品信息介紹如下:GSPT1蛋白種屬Human表達(dá)系統(tǒng)E.coli純度>90%分子標(biāo)記Unconjugated標(biāo)簽GST-Tag儲存條件-20to-70°C12個月;2to8°C1周,避免反復(fù)凍融圖1:GSPT1生物活性分析圖2:GSPT1SDS-PAGE檢測圖3:GSPT1SEC-HPLC檢測產(chǎn)品推薦:
Nature|棕色脂肪組織在低溫下對營養(yǎng)物質(zhì)的競爭力竟比腫瘤組織強(qiáng)2024/04/11
通過冷刺激改變的整體代謝,棕色脂肪介導(dǎo)腫瘤抑制曹教授課題組研究各種疾病中血管生成的基本機(jī)制,這是血管形成的關(guān)鍵過程。目標(biāo)是了解血管生成在最常見和致命的人類疾病(如癌癥、代謝性疾病和心血管疾病)的發(fā)病和進(jìn)展中的分子和功能機(jī)制。背景部分介紹:代謝改變是癌癥和惡性細(xì)胞的標(biāo)志之一,惡性細(xì)胞經(jīng)常重編程代謝以促進(jìn)其生長、增殖、遷移和生存。大多數(shù)癌癥所共有的代謝改變的一個顯著特征是葡萄糖的高攝取,并通過發(fā)酵代謝產(chǎn)生乳酸。在有氧條件下,癌細(xì)胞利用葡萄糖-發(fā)酵-乳酸途徑以ATP的形式利用能量。與健康細(xì)胞線粒體中的
31分文獻(xiàn)揭示棕櫚?;c胰島素分泌的相關(guān)性2024/04/09
棕櫚?;悸?lián)胰島素分泌亢進(jìn)與糖尿病β細(xì)胞衰竭作者簡介:本文亮點:APT1在人胰島中表達(dá)改變APT1缺乏導(dǎo)致胰島素分泌過多APT1底物Scamp1缺乏導(dǎo)致胰島素分泌過多APT1缺乏促進(jìn)高脂喂養(yǎng)小鼠和db/db小鼠的β細(xì)胞衰竭背景部分介紹:II型糖尿病(T2D)是一種致命的多系統(tǒng)疾病,以循環(huán)葡萄糖水平升高為特征。T2D的高血糖是由β細(xì)胞功能障礙引起的,通常在胰島素耐受的情況下發(fā)生。高胰島素血癥常見于T2D,高血糖可能代表β細(xì)胞無法補(bǔ)償外周胰島素抵抗。T2D演變的機(jī)制尚不清楚,該疾病有一系列表現(xiàn),包括
超濾離心濃縮管:高效濃縮與分離的新選擇2024/04/07
在生物樣本處理、藥物研發(fā)以及實驗室研究中,高效濃縮與分離技術(shù)一直是科研人員追求的目標(biāo)。近年來,超濾離心濃縮管作為一種新型濃縮分離工具,以其高效、便捷的特點,逐漸受到廣大科研人員的青睞。超濾離心濃縮管結(jié)合了超濾技術(shù)和離心技術(shù)的優(yōu)勢,實現(xiàn)了對生物樣本的高效濃縮與分離。其工作原理是通過超濾膜的選擇性過濾作用,將樣本中的大分子物質(zhì)截留,而小分子物質(zhì)則通過膜孔排出,從而實現(xiàn)樣本的濃縮。同時,離心力的作用加速了濃縮過程,提高了處理效率。在生物樣本處理中,超濾離心濃縮管的應(yīng)用廣泛。例如,在蛋白質(zhì)純化過程中,科
46.9分|急性髓系白血病AML靶向治療新技術(shù)2024/03/29
急性髓系白血病(AML)是成人中最常見的急性白血病,其特點是骨髓(BM)和外周血中髓系前體的克隆擴(kuò)增。AML的醫(yī)療需求明顯未得到滿足,高達(dá)50%的患者在初始化療后復(fù)發(fā),老年患者的預(yù)后仍然很差。一些靶向免疫療法,如單克隆抗體、雙特異性T(TCE)和殺傷細(xì)胞接合分子,以及嵌合抗原受體(CAR-T)細(xì)胞,目前正在臨床評估中。它們靶向AML原細(xì)胞上表達(dá)的各種抗原,其中CD33和CD123抗原是最常見的靶標(biāo)。CD123是IL-3受體(IL-3Rα)的α鏈,在AML中經(jīng)常高水平表達(dá),主要表達(dá)于白血病干細(xì)胞或
Nature | NINJ1細(xì)胞死亡研究領(lǐng)域新進(jìn)展2024/03/28
使用NINJ1抗體抑制膜撕裂限制組織損傷背景部分介紹:NINJ1是一種16kDa的細(xì)胞表面蛋白,預(yù)計具有兩個跨膜區(qū)域,并且在細(xì)胞外部具有N和C端。雖然對細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)是非必要的,但NINJ1控制著細(xì)胞凋亡或焦亡的一個重要后果,介導(dǎo)PMR(plasmamembranerupture),非選擇性地從死亡細(xì)胞中釋放促炎細(xì)胞質(zhì)內(nèi)容物。NINJ1依賴性PMR是否會加重疾病中的組織損傷尚不清楚,但據(jù)報道,在小鼠模型中,Ninj1缺乏可減輕肺纖維化和多發(fā)性硬化癥。鑒于NINJ1的一個保守的細(xì)胞外區(qū)域?qū)ζ涔丫刍?
調(diào)控多種生物功能的肌動蛋白波2024/03/20
30年前,研究人員在土壤變形蟲盤狀變形蟲中shou次觀察到,細(xì)胞皮層中的肌動蛋白結(jié)構(gòu)可以形成動態(tài)的波浪狀圖案1,2。隨后,越來越多的其他類型的細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)了肌動蛋白波,包括中性粒細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、T細(xì)胞、神經(jīng)元、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和角膜細(xì)胞1,3,4。雖然肌動蛋白波在形態(tài)、傳播速度和生化成分上存在很大差異3(圖1),但它們可以被廣泛地定義為“在肌動蛋白皮層中以波狀方式傳播的絲狀肌動蛋白密度增加的微米級細(xì)胞骨架區(qū)域”1。早期的許多研究工作都在探討肌動蛋白在細(xì)胞遷移和分裂中的作用1,但現(xiàn)在人們發(fā)現(xiàn)
mRNA治療領(lǐng)域的挑戰(zhàn)與前景2024/03/20
2020年,北京理工大學(xué)前沿交叉科學(xué)研究院黃淵余研究員課題組在生物領(lǐng)域*期刊《BiotechnologyAdvances》發(fā)表了題為《ThechallengeandprospectofmRNAtherapeuticslandscape》的綜述論文(IF=12.831),系統(tǒng)總結(jié)了mRNA療法的關(guān)鍵技術(shù)和研究進(jìn)展(圖1)。圖1mRNA療法示意圖(a)體外轉(zhuǎn)錄mRNA的結(jié)構(gòu);(b)mRNA遞送載體示意圖;(c)mRNA入胞表達(dá)目的蛋白示意圖基于信使RNA(mRNA)、小干擾RNA(siRNA)、以及
肌聯(lián)蛋白LTTN1調(diào)控T淋巴細(xì)胞的遷移2024/03/14
在細(xì)胞遷移過程中,循環(huán)T淋巴細(xì)胞會受到環(huán)境因素、作用力和細(xì)胞變形的影響,這些都是通過機(jī)械傳導(dǎo)機(jī)制來引起細(xì)胞反應(yīng)的。Toffali等人1試圖找出控制這些機(jī)械傳導(dǎo)機(jī)制的關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白,從而調(diào)控T淋巴細(xì)胞的遷移。他們利用質(zhì)譜分析和蛋白相互作用研究將肌聯(lián)蛋白確定為潛在靶標(biāo),并通過RNA測序分析進(jìn)行了驗證。有趣的是,他們發(fā)現(xiàn)在T淋巴細(xì)胞中活躍表達(dá)的肌聯(lián)蛋白有3種亞型,這些發(fā)現(xiàn)通過流式細(xì)胞術(shù)得到了驗證。為了進(jìn)一步研究肌聯(lián)蛋白的第一種亞型LTTN1的作用,他們用四種siRNA沉默了該蛋白,使該蛋白的水平降低了4
磁性(氧化鐵)納米顆粒種類及應(yīng)用2024/03/13
FortisLifeSciences在合成與開發(fā)復(fù)雜納米材料和涂層方面擁有豐富的經(jīng)驗,可根據(jù)客戶需求生產(chǎn)出各種特性良好、精確匹配的磁性納米顆粒。公司具有不同成分、尺寸、形態(tài)和表面功能的磁性納米材料產(chǎn)品。1、磁性等離子體金納mi殼金納mi殼通常由一個電介質(zhì)內(nèi)核、薄二氧化硅層和均勻薄金外層(圖1)組成,具有du特且可調(diào)的光學(xué)特性。這種材料可用于醫(yī)學(xué)診斷和光熱療法。FortisLifeSciences利用超順磁性納米顆粒內(nèi)核、二氧化硅間隔層以及金外殼,制造出磁性材料。通過調(diào)整整體顆粒的尺寸或金殼的直徑
電動移液器操作技巧與維護(hù)保養(yǎng)指南2024/03/07
電動移液器作為實驗室中常用的精密儀器,其正確的操作與日常的維護(hù)保養(yǎng)對于確保移液的準(zhǔn)確性和儀器的使用壽命至關(guān)重要。以下是一些關(guān)于電動移液器的操作技巧和維護(hù)保養(yǎng)的建議。在操作方面,首先要確保電動移液器在使用前進(jìn)行校準(zhǔn),以保證其移液精度。使用時,要選擇合適的移液頭,并根據(jù)需要調(diào)節(jié)移液量。在吸取液體時,要保持移液器垂直,避免傾斜或晃動,以防止氣泡的產(chǎn)生。同時,要注意移液器的量程范圍,避免超出其最大量程,以免對儀器造成損壞。此外,使用完畢后,應(yīng)及時清潔移液頭和移液器外殼,避免液體殘留對儀器造成腐蝕。在更換
小G蛋白研究工具2024/03/05
小G蛋白,是具有GTP酶活性的一類蛋白,因其分子量只有20—30KD而得名。第一個被發(fā)現(xiàn)的小G蛋白是Ras,它是Ras基因的產(chǎn)物。根據(jù)序列的同源性,小G蛋白被分成若干亞家族,例如Rho,Ras,Ran,Rab,Arf和Rad/Rem/Gem/Kir。小G蛋白家族成員在細(xì)胞信號通路中具有分子開關(guān)的功能,并參與調(diào)控許多生物學(xué)過程。下面小優(yōu)就帶大家一起來看看小G蛋白具體的功能以及研究方法吧~Part1小G蛋白的功能1、Rho亞家族Rho亞家族由20多個成員組成,目前研究得最多的是Rac1、RhoA和C
多發(fā)性骨髓瘤MM新進(jìn)展(模型建立)2024/02/27
背景部分介紹:多發(fā)性骨髓瘤(MM)是一種骨髓(BM)漿細(xì)胞(PCs)的腫瘤,其分泌單克隆免疫球蛋白,誘導(dǎo)多器官損傷。MM主要發(fā)生在老年人中,前兆階段包括兩種類型,一種稱為意義不明的單克隆γ病(MGUS);另一種是MGUS向MM進(jìn)展的一個過渡階段,稱為陰燃型多發(fā)性骨髓瘤(SMM)。了解從前驅(qū)疾病發(fā)展為臨床活動性MM的機(jī)制可能有助于對特定人群實施早期治療。遺傳異質(zhì)性是MM的一個標(biāo)志。免疫球蛋白編碼基因的染色體易位和高二倍體被認(rèn)為是早期遺傳事件,隨后是NF-κB、MAPK-RAS和凋亡通路的異常,從而
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