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工欲善其事,必先利其器---單細胞懸液質(zhì)量優(yōu)化2024/02/26
隨著流式分析、細胞分選、單細胞組學(xué)、質(zhì)譜流式等研究技術(shù)的蓬勃發(fā)展,單細胞也在腫瘤免疫學(xué)和神經(jīng)生物學(xué)等多個領(lǐng)域成為大眾的焦點,它能夠很好地反映細胞的特異性和異質(zhì)性。目前,組織(以腫瘤組織為例)制備成單細胞懸液的方法主要有機械解離法、酶解法和化學(xué)法(圖1)。圖1腫瘤組織制備成單細胞懸液的方法[1]高質(zhì)量的初始樣本是實驗成功的關(guān)鍵。然而如何在此基礎(chǔ)上,進一步優(yōu)化粗懸液,獲得高質(zhì)量的單細胞懸液呢?基于三者的原理以及適用范圍等(表1),我們發(fā)現(xiàn)這些方法處理樣本時,沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。就機械法來說,每次實驗研磨
調(diào)整可離子化的陽離子脂質(zhì)設(shè)計,提高功效和安全性2024/02/23
脂質(zhì)納米顆粒(LNPs)有望che底改變以核酸為基礎(chǔ)的療法。雖然人們已經(jīng)做出許多努力來提高LNPs中所用陽離子脂質(zhì)的功效,但其安全性不容忽視。雖然陽離子脂質(zhì)在遞送核酸方面很早就取得了成功,但由于存在安全風(fēng)險,它們在治療方面的適用性大打折扣。通過設(shè)計具有生物相容性和生物可降解功能基團的可離子化陽離子脂質(zhì),可在這一領(lǐng)域取得重大進展。具有生物相容性的可電離頭部基團早期用于遞送核酸的脂質(zhì)包括DOTAP和DOTMA1。這些脂質(zhì)含有一個季銨頭基(圖1),賦予脂質(zhì)yong久的陽離子電荷。這些脂質(zhì)含有季銨頭基(
微孔板檢測儀可以用于哪些領(lǐng)域2024/02/20
微孔板檢測儀是一種功能強大的分析儀器,其在多個領(lǐng)域都發(fā)揮著重要作用。以下是對微孔板檢測儀應(yīng)用領(lǐng)域的詳細探討:生物學(xué)研究:在生物學(xué)領(lǐng)域,微孔板檢測儀被廣泛用于細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和免疫學(xué)等研究。例如,在細胞生物學(xué)中,研究人員可以利用微孔板檢測儀來監(jiān)測細胞生長、死亡和分化等過程,從而深入了解細胞的生理和病理機制。在分子生物學(xué)和免疫學(xué)研究中,微孔板檢測儀可用于檢測蛋白質(zhì)、核酸和其他生物分子的相互作用,以及免疫反應(yīng)的定量分析等。藥物研發(fā):微孔板檢測儀在藥物研發(fā)過程中也發(fā)揮著重要作用。研究人員可以利用微
超越mRNA疫苗的LNP-我們該何去何從?2024/02/20
脂質(zhì)納米顆粒(LNPs)有望徹di改變現(xiàn)代醫(yī)學(xué)。這項技術(shù)具有巨大的發(fā)展?jié)摿?,它可以超越傳染病的范疇,到達曾經(jīng)被認為無法用藥的靶點,治療幾乎wu窮無盡的疾病。但這一領(lǐng)域仍處于起步階段,要充分釋放LNPs的潛力,還有許多挑戰(zhàn)需要克服。LNPs的用途多年來,科學(xué)家們已經(jīng)在簡化細胞模型和培養(yǎng)瓶中證明了核酸療法的潛力。然而,這些概念驗證實驗在現(xiàn)實生活中的應(yīng)用更具挑戰(zhàn)性,因為在生物體內(nèi)施用這些療法會增加其復(fù)雜性。LNPs使這些療法的施用方式成為可能,既能防止它們在體內(nèi)降解,又能將它們輸送到靶點。LNPs大大
移液器百寶箱——成為移液大師只差?2024/02/20
移液器,是一種用于定量轉(zhuǎn)移液體的工具,作為實驗室bi備儀器之一,相信各位科研小伙伴們都不陌生,甚至每天使用的時間都高達數(shù)小時之久。細節(jié)決定成敗,移液器的選擇、使用以及維護都決定著最終實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,因此,小優(yōu)在這里為大家整理出了移液器百寶箱,快叫上你的實驗搭子一起來看看吧~Part1如何選擇移液器Q1:挑選移液器我們應(yīng)該考慮哪些因素?A1:(1)量程范圍、可變量:確保移液器可以涵蓋你實驗中所需的量程范圍,既不過大也不過小。如果實驗對體積非常敏感,選擇可變量小的移液器;一般來說,量程較小的移液器
absin恒溫搖床可達到混合和反應(yīng)的目的2024/02/15
absin恒溫搖床的工作原理是通過以上關(guān)鍵部分的配合,實現(xiàn)樣品在恒定溫度下的搖擺運動。當(dāng)樣品放置在搖床的夾具上后,打開電源,電動馬達開始旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生力,通過傳動系統(tǒng)將力傳遞到搖床的搖擺部分,使樣品進行搖擺運動。同時,加熱系統(tǒng)開始提供恒定的溫度,保持搖床上的溫度不變。這樣,樣品在恒定溫度下進行搖擺,達到混合和反應(yīng)的目的??捎糜诩毎囵B(yǎng)、酶反應(yīng)、DNA提取、疫苗制備等實驗。其恒溫和搖擺功能可以提供恒定的溫度和混合條件,使得實驗?zāi)軌蛟诜€(wěn)定的環(huán)境下進行,確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。同時,設(shè)備結(jié)構(gòu)合理、操
absin恒溫搖床的重要組成部分有哪些?2024/02/01
absin恒溫搖床是用于生物化學(xué)、細胞學(xué)、生物制劑等領(lǐng)域的實驗設(shè)備,其原理是運用電動馬達產(chǎn)生旋轉(zhuǎn)力,并通過傳動系統(tǒng)將旋轉(zhuǎn)力傳遞到搖床的搖擺部分,使樣品能夠以一定速度進行搖擺運動。同時,通過加熱系統(tǒng)使搖床上的溫度保持恒定。在absin恒溫搖床中,主要包括以下幾個關(guān)鍵的部分:1.電動馬達:電動馬達是提供旋轉(zhuǎn)力的主要裝置,通過電流的輸入使電動馬達產(chǎn)生旋轉(zhuǎn)力,并將其轉(zhuǎn)化為搖床的搖擺運動。2.傳動系統(tǒng):傳動系統(tǒng)是將電動馬達產(chǎn)生的旋轉(zhuǎn)力傳遞到搖床的搖擺部分的裝置,通常包括傳動帶、傳動軸等。傳動系統(tǒng)的設(shè)計要使
文獻速遞:單核細胞誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細胞可作為小膠質(zhì)細胞的生理模型2024/01/30
精神分裂癥和阿爾茨海默病等神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生,很大程度上與小膠質(zhì)細胞的功能障礙有關(guān)。為了更深入地探索小膠質(zhì)細胞在病理中的角色,我們需要一個可以模擬人體的實驗?zāi)P汀,F(xiàn)在,這些模型大多源于人類誘導(dǎo)多能干細胞(hiPSC)所產(chǎn)生的小膠質(zhì)細胞。然而,將人類誘導(dǎo)多能干細胞(hiPSC)分化為小膠質(zhì)細胞是一個具有挑戰(zhàn)性的任務(wù),并且其分化過程通常較為緩慢,這使得它不太適合用于高通量的臨床試驗。另一個值得注意的問題是,誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細胞(iMGs)的表現(xiàn)并不總是與體內(nèi)的小膠質(zhì)細胞相似。然而,最新的研究已經(jīng)成功地從
功能基因高通量篩選解決方案2024/01/25
在生命系統(tǒng)中,基因的功能可通過系統(tǒng)性敲低、敲除或過表達來確定,此實驗方法被稱為功能基因組學(xué),目前是眾多生物學(xué)研究領(lǐng)域的關(guān)鍵發(fā)現(xiàn)工具,如藥物靶點鑒定、耐藥性、宿主-病原互作和生物通路分析等。因此,功能基因高通量篩選文庫應(yīng)運而生,今天聚焦96/384孔板陣列核酸片段文庫,來看看這類文庫的高通量篩選流程及其多重應(yīng)用方向。陣列核酸片段文庫將siRNA、sgRNA與自動化、生物分析、高內(nèi)涵數(shù)據(jù)捕獲和生物統(tǒng)計分析相結(jié)合,篩選表型讀數(shù)可在標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備上進行,如酶標(biāo)儀;也可選用多種終點分析法,如比色、熒光或發(fā)光測定
活體轉(zhuǎn)染應(yīng)用第七彈之玻璃體注射2024/01/25
哈嘍,最近發(fā)現(xiàn)很多小伙伴詢問活體轉(zhuǎn)染關(guān)于玻璃體注射的應(yīng)用,今天小編就帶著幾篇相關(guān)應(yīng)用文獻來給大家簡單介紹一下。第一篇是來自中山大學(xué)中山眼科中心余克明教授與莊菁研究員團隊發(fā)表在CellDeathandDisease雜志上,題為”LithiumpromotesDNAstabilityandsurvivalofischemicretinalneurocytesbyupregulatingDNAligaseIV”。本文中,作者直接在缺血性大鼠視網(wǎng)膜中直接測試了鋰對DNANHEJ(非同源末端連接)活性的影
人elisa試劑盒該如何存儲?2024/01/18
人Elisa試劑盒具有成本低、操作簡便、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點,但需要注意的是,在使用過程中要遵循試劑盒供應(yīng)商的操作指南,并保持實驗室安全和規(guī)范操作。使用方法:1.準(zhǔn)備樣本:收集所需測定物質(zhì)的樣本,如血液、尿液、細胞培養(yǎng)液等。2.樣本處理:根據(jù)試劑盒的指南,對樣本進行處理,如離心、稀釋等。3.加入試劑:按照試劑盒的指南,將樣本加入試劑盒提供的孔板中。4.攪拌孔板:用孔板上的攪拌器輕輕攪拌樣品,確保試劑和樣本充分混合。5.孔板孵育:將孔板放入恒溫孵育箱中,在需求溫度和時間下孵育反應(yīng)。6.讀取結(jié)果:將孔板放
一篇文章帶你了解趨化因子2024/01/17
趨化因子(CHEMOtacticcytoKINES)是炎癥細胞因子家族的一個重要分支。有50多種趨化因子在哺乳動物細胞中表達,它們的特點是分子量相對較小(約70-90個氨基酸)、N端和半胱氨酸基序保守。根據(jù)半胱氨酸在motif中的位置,這組蛋白質(zhì)被進一步分類為C、CC、CXC和CX3C趨化因子亞家族3,9。所有50種趨化因子都通過20種不同的趨化因子受體產(chǎn)生作用,這些受體屬于G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)超家族,表明不同受體之間存在一定程度的混雜性。所有趨化因子受體都與百日咳敏感的Gi蛋白結(jié)合16。
一篇文章帶你了解連接蛋白和泛連接蛋白間隙連接通道2024/01/11
間隙連接通常成簇存在,通過允許小分子在細胞間通過,實現(xiàn)細胞間的交流2。它們在不同的生物過程中發(fā)揮著重要作用。這些過程包括分化、細胞周期同步、細胞發(fā)育、神經(jīng)元活動和免疫反應(yīng)5,7,9。參與間隙連接形成的蛋白質(zhì)由四個跨膜結(jié)構(gòu)域、兩個胞外環(huán)、一個胞內(nèi)環(huán)以及胞內(nèi)N端和C端組成10,12。細胞外環(huán)中的幾個共同的半胱氨酸殘基對于間隙連接半通道在相對的細胞膜上的細胞間對接是不可少的3,10,12。連接蛋白(Connexins,Cx)包括21個屬于該家族的整體膜蛋白,它們形成同源或異源的六聚體,一般稱為連接子或
ET-PRIME轉(zhuǎn)染試劑有哪些常見問題2024/01/11
ET-PRIME轉(zhuǎn)染試劑在使用過程中可能會遇到一些常見問題,以下是一些需要注意的問題:轉(zhuǎn)染效率低:可能原因包括DNA用量不足、細胞密度過高或過低、轉(zhuǎn)染條件不佳等。建議增加DNA用量、優(yōu)化細胞密度和轉(zhuǎn)染條件。細胞毒性大:ET-PRIME對細胞的毒性較低,但仍可能出現(xiàn)毒性反應(yīng)??赡艿脑虬―NA濃度過高、轉(zhuǎn)染時間過長等。建議降低DNA濃度或縮短轉(zhuǎn)染時間。轉(zhuǎn)染液配制問題:如果轉(zhuǎn)染液配制不當(dāng),會影響轉(zhuǎn)染效果。建議按照說明書要求配制轉(zhuǎn)染液,并避免使用過期或污染的試劑。細胞狀態(tài)不佳:細胞的生長狀態(tài)和健康狀
抑制癌細胞的限速生脂酶研究進展2024/01/10
限速生脂酶,包括乙酰-CoA羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、ATP-檸檬酸裂解酶(ACLY)和硬脂酰CoA去飽和酶(SCD)。脂類,包括脂肪、蠟、固醇和脂溶維生素等。近年來,我們對脂質(zhì)在癌變過程(正常細胞轉(zhuǎn)變?yōu)榘┘毎倪^程)中的作用的理解有了重大進展1。當(dāng)正常細胞逃避控制其生長的過程時,腫瘤就會發(fā)生。長期以來的研究表明,癌細胞的特征是脂質(zhì)合成增加,這主要是因為分裂細胞的細胞膜需要脂質(zhì),因此開發(fā)針對脂質(zhì)生成反應(yīng)限速步驟的癌癥療法是合乎邏輯的。有一篇很好的綜述介紹了脂質(zhì)代謝與癌癥的關(guān)系,其
SENP2對關(guān)鍵靶蛋白的 SUMO化調(diào)控抑制了動脈粥樣硬化2024/01/08
血流模式已被證明對動脈粥樣硬化的進展有深遠的影響,具體來說,紊亂血流與促動脈粥樣硬化的特征相關(guān),而層流則抑制動脈粥樣硬化。Abe小組通過氧化還原敏感的核糖體S6激酶p90RSK,在T368處磷酸化去SUMO化的SENP2,將紊亂的血流與增強內(nèi)皮細胞中關(guān)鍵靶蛋白的SUMO化聯(lián)系起來。在最近的這項研究中,該小組發(fā)現(xiàn)層流也可以調(diào)節(jié)SENP2,但調(diào)節(jié)方式與T368的磷酸化無關(guān),從而產(chǎn)生防止動脈粥樣硬化的作用。根據(jù)現(xiàn)有的質(zhì)譜技術(shù),SENP2S344被鑒定為一個潛在的翻譯后修飾。該實驗室開發(fā)了一種針對SEN
鈉鈣交換體(Na+/Ca2+ Exchangers,NCX)的簡介及研究工具2024/01/03
Ca2+在可興奮和不可興奮的細胞中是通用的信號分子。然而,細胞內(nèi)的Ca2+濃度比細胞外環(huán)境低1000倍,保持這一比例對細胞的正常功能至關(guān)重要。鈉鈣交換體(Na+/Ca2+Exchangers,NCX)是一種Na+/Ca2+交換器,負責(zé)細胞中大部分Ca2+的外流1-3。NCX轉(zhuǎn)運蛋白是溶質(zhì)載體SLC8家族的成員,而SLC8家族又屬于CaCA(Cation-CoupledAntiporter)超家族1,4,5。NCX-1是三種Na+/Ca2+交換器(NCX-1、NCX-2、NCX-3)之一,可實施一
聚焦:5-HT3受體2024/01/03
5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是用途zui廣的神經(jīng)遞質(zhì)之一。它可部分通過5-HT3受體發(fā)出部分信號,5-HT3受體屬于配體門控離子通道超家族。5-羥色胺3型(5-HT3)受體是陽離子選擇性Cys環(huán)受體,在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)中均有表達,可介導(dǎo)快速興奮性神經(jīng)傳遞2。迄今為止,已發(fā)現(xiàn)五種受體亞基(5-HT3A至5-HT3E),其中5-HT3A和5-HT3B受體是不同類型受體中特征zui明顯的。要形成一個功能性受體,五個亞基要圍繞一個可滲透Na+、K+和Ca2+離子的孔聚
人elisa試劑盒是常用于生物醫(yī)學(xué)研究的工具2024/01/03
人elisa試劑盒是常用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷的實驗工具,其原理基于酶聯(lián)免疫吸附實驗,抗體是免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)分子,可以識別并結(jié)合特定的抗原,形成抗原-抗體復(fù)合物。Elisa試劑盒通常包含有特異性與目標(biāo)抗原結(jié)合的抗體。分為直接Elisa、間接Elisa、競爭Elisa和間接競爭Elisa等多種類型。人elisa試劑盒的步驟如下:1.固定抗原:在試驗板表面上固定抗原。通常將抗原溶液加入試驗孔并孵育,使抗原與試驗板表面結(jié)合。2.阻斷:通過加入一種非特異性蛋白(如牛血清蛋白)來封閉試驗孔表面的未被
聚焦:機械敏感離子通道Piezo2023/12/27
機械刺激是痛覺、聽覺和血壓調(diào)節(jié)等多種生理過程的驅(qū)動力2。Piezo1和Piezo2最早是在小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系中發(fā)現(xiàn)的,細胞膜上的剪切力誘導(dǎo)了機械激活電流2。Piezo通道是一種異常大的離子通道,推測有38個跨膜結(jié)構(gòu)域。它們形成的三聚體結(jié)構(gòu)呈螺旋槳狀,三個葉片圍繞著一個中心孔。*的結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)顯示,Piezo1可彎曲局部脂質(zhì)環(huán)境,形成“圓頂”結(jié)構(gòu)。穹頂結(jié)構(gòu)是由處于非活動構(gòu)象的葉片形成的。質(zhì)膜上的機械壓力或張力會導(dǎo)致穹頂形狀變平,從而激活通道1,3,8,10。Piezo的結(jié)構(gòu)研究正處于高峰期,有關(guān)其
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