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天津譜祥偉業(yè)科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第14年
HPLC漏液?jiǎn)栴}總結(jié)2025/04/28
對(duì)于分析實(shí)驗(yàn)人員來說，HPLC系統(tǒng)中的漏液?jiǎn)栴}是一件很讓人頭疼的事情，它可能影響分析的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。有些漏液相對(duì)直觀，很容易解決；而有些則更為復(fù)雜，需要深入調(diào)查。以下是對(duì)HPLC漏液?jiǎn)栴}的總結(jié)，包括原因和解決方法：A.接頭處漏液（Peek或不銹鋼接頭）原因：一般是柱前端接頭松動(dòng)、磨損或滑絲。解決方法：①松動(dòng)：擰緊接頭。（過度擰緊，會(huì)導(dǎo)致金屬接頭泄漏或磨損。）②磨損或滑絲：更換接頭。（容易滑絲，擰緊接頭前，逆時(shí)針找找扣。）B.泵漏液原因：?jiǎn)蜗蜷y松動(dòng)、接頭松動(dòng)、混合器密封損壞、泵密封損壞、柱塞桿磨
液相色譜使用的注意點(diǎn)2025/02/11
液相色譜對(duì)于多數(shù)人來說都是很好上手的儀器了，但是就算是用過幾年、經(jīng)驗(yàn)豐富的分析員都會(huì)習(xí)慣于一些錯(cuò)誤的操作，經(jīng)常導(dǎo)致一些儀器故障。方便快捷的分析過程固然重要，但是為了多做樣品而忽略了一些該有的步驟，往往得不償失，哪些操作不能做？哪些懶兒不能偷？那些小概率的故障師傅沒教怎么辦？液相使用過程中有哪四大關(guān)鍵因素要注意？一、流動(dòng)相不過濾因?yàn)閴m?；蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會(huì)磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥，因此應(yīng)預(yù)先除去流動(dòng)相中的任何固體微粒。流動(dòng)相最好在玻璃容器內(nèi)蒸餾，而常用的方法是濾過，可采用Millipore
做好這7步，掌握氣相色譜！2024/12/10
氣相色譜的優(yōu)點(diǎn)是能對(duì)多種組分的混合物進(jìn)行分離分析(這是光譜、質(zhì)譜法所不能的)。但由于能用于色譜分析的物質(zhì)很多，不同組分在同一固定相上色譜峰出現(xiàn)時(shí)間可能相同，僅憑色譜峰對(duì)未知物定性有一定困難。對(duì)于一個(gè)未知樣品，首先要了解它的來源、性質(zhì)、分析目的；在此基礎(chǔ)上，對(duì)樣品可有初步估計(jì)；再結(jié)合已知純物質(zhì)或有關(guān)的色譜定性參考數(shù)據(jù)，用一定的方法進(jìn)行定性鑒定。樣品的來源和預(yù)處理方法GC能直接分析的樣品通常是氣體或液體，固體樣品在分析前應(yīng)當(dāng)溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，而且還要保證樣品中不含GC不能分析的組分(如無機(jī)鹽)，可
C18的由來2024/10/31
“C18，指的是十八烷基硅烷鍵合相，這是色譜中廣泛使用的一種反相色譜柱固定相。C18的由來可以追溯到色譜學(xué)的早期發(fā)展，特別是反相色譜技術(shù)的誕生?！盋18固定相的開發(fā)源于對(duì)色譜分離技術(shù)的需求和改進(jìn)。在色譜學(xué)的早期階段（Tsvet設(shè)計(jì)的試驗(yàn)），疏水性化合物首先從色譜柱中洗脫，然后是極性化合物。這一洗脫順序被稱為正相色譜法（NPC）。然而，隨著科學(xué)家們對(duì)色譜技術(shù)的不斷探索和創(chuàng)新，反相色譜法（RPC）應(yīng)運(yùn)而生，它提供了一種相反的洗脫順序，即離子型和強(qiáng)極性化合物首先被洗脫，而疏水性更強(qiáng)的化合物隨后被洗脫，
高效液相色譜這些問題 中招沒？2024/10/22
高效液相色譜法按分離機(jī)制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法(正相與反相)、離子交換色譜法、離子對(duì)色譜法及分子排阻色譜法，這些方法在使用的過程中往往會(huì)遇到諸如鬼峰、基線漂移、拖尾、分叉峰、保留時(shí)間漂移、柱壓過高等系列問題，如何解決這些問題呢?1.用HPLC進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移，有時(shí)發(fā)生快速變化，原因何在?如何解決?關(guān)于漂移問題：①溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定;②流動(dòng)相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等;③柱子未平衡好，需對(duì)柱子進(jìn)行更長(zhǎng)時(shí)間的平衡;關(guān)
堵和漏——液相色譜的兩大“病癥”，咋解決？2024/09/14
液相色譜儀是屬于易學(xué)難用的儀器，特別講究“正確使用”和經(jīng)驗(yàn)。液相工作者接觸多的是流動(dòng)相，流動(dòng)相也是造成液相色譜各種問題的主要源頭。液相色最常見的故障一是堵，二是漏。下面就這兩分別展開討論（流動(dòng)相以甲醇為例，色譜柱以C18為例）。一·為何會(huì)堵“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高，直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端，主要原因就是流動(dòng)相里有雜質(zhì)，雜質(zhì)的主要來源就是細(xì)菌。首先我們要認(rèn)識(shí)到，一般的國產(chǎn)甲醇其實(shí)不需要額外過濾處理，直接使用沒有問題。即使是有些固態(tài)微粒雜質(zhì)，也能在液相流路系統(tǒng)前
21條黃金圣律：讓你更懂液相流動(dòng)相2024/08/02
流動(dòng)相是影響液相色譜的關(guān)鍵因素。一個(gè)理想的液相色譜流動(dòng)相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測(cè)器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。高效液相色譜法中的流動(dòng)相主要用水性溶劑、有機(jī)溶劑或它們的混合液，但是如何配制。選擇配制的方法不同，分析結(jié)果特別是保留時(shí)間，是會(huì)有顯著差別的。高效液相色譜法中的流動(dòng)相主要用水性溶劑、有機(jī)溶劑或它們的混合液，水性溶劑也常用于緩沖液。常因資料上表示的內(nèi)容和實(shí)際的配制方法不同，而產(chǎn)生流動(dòng)相的差異，影響了色譜圖和分析結(jié)果。一般來說，溶劑的混合按體積比（V/V）或重量比（W/W）進(jìn)行。溶液
液相色譜方法優(yōu)化——色譜柱的優(yōu)化2024/07/25
液相方法優(yōu)化中的色譜柱的優(yōu)化就是色譜柱的選型。選型的原則無非就是根據(jù)分析物的性質(zhì)、流動(dòng)相的條件、初步分離的結(jié)果等來選擇合適的色譜柱。強(qiáng)極性樣品對(duì)于強(qiáng)極性的樣品，C18色譜柱保留弱，可以選擇碳含量更高的C18；或者選用親水的AQC18，用純水相洗脫，會(huì)增強(qiáng)保留；再或者選用HILIC模式色譜柱。弱極性樣品對(duì)于弱極性的樣品，C18色譜柱保留很強(qiáng)或常規(guī)有機(jī)相洗脫不下來，可以嘗試碳含量更低的色譜柱，或者苯己基，C8，C4等。易污染樣品對(duì)于中藥類或生物類樣品，色譜柱容易被污染，可以嘗試大孔徑填料色譜柱更耐污
液相色譜柱填料是如何影響柱能的？2024/07/02
液相液相色譜柱的性能主要取決于填料的性質(zhì)和類型。填料的大小、形狀、鍵合相、含碳量等均能影響液相色譜柱的性能，這對(duì)我們使用及選擇色譜柱都是非常有幫助的。常見的液相色譜柱填料有C1、C3、C4、C8、C18、C30、氨基、氰基、硅膠色譜柱等。常見色譜柱中的填料分類：1，反相（與離子對(duì)）方法C18（十八烷基或ODS）：普適性好；保留性強(qiáng)，用途廣C8（辛基）：與C18相似，但保留值稍小C3，C4：保留值??；大多用于肽類與蛋白質(zhì)C1【三甲基硅烷（TMS）】：保留值最小；最不穩(wěn)定苯基，苯乙基：保留值適中；選
液相色譜常見問題解析之色譜柱壽命短2024/06/20
“在HPLC日常分析工作中，有幾個(gè)常見的問題一直困擾著我：色譜柱壽命太短；峰拖尾；保留時(shí)間重現(xiàn)性差；分不開；保留弱等?！庇龅揭陨蠁栴}該怎么去排查與優(yōu)化呢？我們今天看一下色譜柱壽命短的問題。我們分析原因無非是：樣品臟、沒有色譜柱保護(hù)措施、色譜條件比較嚴(yán)。01—樣品前處理我們要了解樣品的來源，比如天然產(chǎn)物提取物、生物樣品、發(fā)酵產(chǎn)物、合成產(chǎn)物等。如果是天然產(chǎn)物提取物，我們要做的前處理工作是根據(jù)目標(biāo)物的性質(zhì)，富集目標(biāo)物，并除去色素等污染色譜柱的成分；如果是生物樣品，來源可能是生物組織、血液等，需要去除磷
色譜柱安裝、啟用和維護(hù)這樣做2024/05/30
色譜柱是液相色譜儀的最核心部件，價(jià)格相對(duì)昂貴，如避免強(qiáng)烈的碰撞和震動(dòng)，不要讓柱床變干，避免在嚴(yán)寒環(huán)境受凍等。液相色譜柱的基本結(jié)構(gòu)，是由接頭、螺帽、柱管、填料、墊圈及過濾片等組成。01柱頭類型和不銹鋼毛細(xì)管接頭的匹配色譜柱是消耗品，不是儀器原配的情況很多。如果接頭和柱頭深度不匹配將會(huì)產(chǎn)生漏液或者死體積過大的現(xiàn)象。接頭比柱頭深度長(zhǎng)，不易擰緊而漏液；接頭比柱頭深度短，柱頭內(nèi)留有空隙而產(chǎn)生死體積，使譜帶展寬和峰拖尾。02溶劑的匹配轉(zhuǎn)換色譜柱內(nèi)保存溶劑和儀器系統(tǒng)內(nèi)存留溶劑，如果和流動(dòng)相不匹配，使用前需進(jìn)行
C18色譜柱的差異與選擇指南2024/04/16
高效液相色譜（HPLC）法選擇性高、靈敏度高、分析速度快，而且大部分可以溶解的藥物能用該法分析，所以該技術(shù)已經(jīng)成為藥物分析的選擇。色譜柱是高效液相分離系統(tǒng)的中重要的環(huán)節(jié)，業(yè)內(nèi)常把色譜柱比喻為液相色譜的心臟，因?yàn)樯V柱的類型決定了色譜系統(tǒng)的性質(zhì)，色譜柱的粒徑和長(zhǎng)度影響了分析時(shí)間和分析效率。氨基柱、苯基柱、氰基柱等正相色譜柱和C18、C8等反相色譜柱是藥物分析與評(píng)價(jià)工作中常見的兩類色譜柱。以碳十八硅烷化學(xué)鍵合硅膠固定相（C18或ODS）的反相色譜出色地完成了液相色譜分析任務(wù)，而且與其他色譜相比，C1
提高氣相色譜靈敏度這樣做2024/03/22
目前，對(duì)提高檢測(cè)靈敏度的研究主要集中在樣品的柱前處理上,如，冷柱頭進(jìn)樣技術(shù)、吹掃捕集、萃取、熱脫附進(jìn)樣技術(shù)等。如何得到更高靈敏度的氣相色譜呢？主要是使用溶劑濃縮的方法，溶劑濃縮的目的是不使用分流進(jìn)樣仍然可以得到尖銳的峰形，惟有如此，才能獲得更好的靈敏度以及更好的分離度。溶劑濃縮由兩種方法產(chǎn)生：第一種是在不分流進(jìn)樣和直接進(jìn)樣時(shí)使用：這種方法需要調(diào)節(jié)柱溫箱，與前者不同的地方是溶劑和分析化合物必須同時(shí)在進(jìn)樣時(shí)在較冷的色譜柱上冷卻凝結(jié)；這些凝結(jié)的樣品在色譜柱表面形成“樣品泛濫帶”（floodedzone
液相色譜和氣相色譜主要相同點(diǎn)和差異2024/03/21
色譜法是一種常見的分離技術(shù)，其原理是利用欲分離組分在兩相間具備不同的分配系數(shù)，以流動(dòng)相對(duì)固定相中的混合物進(jìn)行洗脫，混合物中的不同物質(zhì)以不同速度沿固定相移動(dòng)，最終達(dá)到分離的效果。按兩相的物理狀態(tài)，可以分為氣相色譜法（GC）和液相色譜法（LC），在現(xiàn)代樣品分析中，氣相色譜和液相色譜都是普遍采用的分析方法，但兩者也存在許多不同之處，具備不同的特性，這些特性也決定了它們不同的應(yīng)用范圍。一、GC與LC的主要差異1.流動(dòng)相區(qū)別GC：流動(dòng)相為惰性氣體，流動(dòng)相與組分無親合作用力，只與固定相有相互作用。LC：流動(dòng)
為什么要進(jìn)行色譜柱平衡2024/03/01
一、為什么需要進(jìn)行柱平衡？·置換色譜柱內(nèi)儲(chǔ)存的溶劑·在流動(dòng)相和固定相之間建立平衡·濕潤固定相以實(shí)現(xiàn)分析物的分配·產(chǎn)生可靠的結(jié)果。二、色譜柱沒有平衡好會(huì)產(chǎn)生何種影響？·基線波動(dòng)·保留時(shí)間變化·峰形變形·分離度變差·響應(yīng)異?！ぎa(chǎn)生鬼峰。三、哪些因素影響色譜柱平衡？-固定相性質(zhì)：具有龐大基團(tuán)或空間位阻的固定相（例如苯基柱）可能需要更長(zhǎng)的柱平衡時(shí)間。-表面積：具有較低表面積的固定相有利于更快的柱平衡。-孔徑大小：具有較寬孔徑（因此表面積較低）的固定相有利于更快的柱平衡。-流動(dòng)相組成：具有較高濃度的緩沖鹽
液相色譜柱堵了怎么辦？2024/01/09
色譜柱堵了怎么辦？液相色譜儀的色譜柱在使用一段時(shí)間后，常會(huì)出現(xiàn)故障。液相色譜柱堵了，是很多分析朋友都遇到過的問題。那么碰到液相色譜柱堵了，怎么辦呢？不要慌，下面小析姐帶您了解一下液相色譜柱堵了的原因，及其解決方法~1、色譜柱“堵”的表現(xiàn)“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高，直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端，主要原因就是流動(dòng)相里有雜質(zhì)，雜質(zhì)的主要來源就是細(xì)菌。2、色譜柱“堵”的原因分析原因1：配制流動(dòng)相時(shí)細(xì)菌污染首先我們要認(rèn)識(shí)到，一般的國產(chǎn)甲醇其實(shí)不需要額外過濾處理，直接使用沒有
液相色譜使用6大要點(diǎn)需謹(jǐn)記！2023/10/25
1由強(qiáng)到弱一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進(jìn)行試驗(yàn)，這樣可以很快地得到分離結(jié)果，然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機(jī)溶劑(乙腈或甲醇)的比例。2三倍規(guī)則每減少10%的有機(jī)溶劑(甲醇或乙腈)的量，保留因子約增加3倍，此為三倍規(guī)則。這是一個(gè)聰明而又省力的辦法。調(diào)整的過程中，注意觀察各個(gè)峰的分離情況。3粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào)當(dāng)分離達(dá)到一定程度，應(yīng)將有機(jī)溶劑10%的改變量調(diào)整為5%，并據(jù)此規(guī)則逐漸降低調(diào)整率，直至各組分的分離情況不再改變。1、流動(dòng)相的性質(zhì)要求一個(gè)理想的液相色譜流動(dòng)相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測(cè)器兼容
如何提高色譜柱柱效？2023/10/10
使用氣相或液相的時(shí)候，小伙伴們有木有遇到這樣的情況，色譜圖的峰高和以往相比明顯降低了，甚至成數(shù)量級(jí)的減小；同時(shí)還伴有許多雜峰、鬼峰。那么是什么原因?qū)е逻@個(gè)現(xiàn)象呢？據(jù)小析姐了解這多半是柱效降低的原因，今天就和小伙伴們聊一聊如何來改善色譜柱柱效的問題？色譜柱的柱效能是評(píng)價(jià)色譜性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)，混合物能否在色譜柱中得到分離，除取決于選擇合適的固定相外，還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因素有關(guān)。在一定的色譜操作條件下，色譜柱的柱效可用理論塔板數(shù)或理論塔板高度來衡量。一般說來塔板數(shù)愈多，或塔板高度愈
液相色譜柱的6大經(jīng)典問題！2023/08/31
使用過液相的小伙伴應(yīng)該都問過這樣的問題吧：不同的實(shí)驗(yàn)應(yīng)該選擇什么規(guī)格的色譜柱？如何提高色譜柱的分離？等等，今天就一起看看下面這些問題你都遇到過幾個(gè)？1.什么是反相柱、正相柱？“反相”和“正相”的概念是液相色譜法早期提出的概念，當(dāng)時(shí)鍵合相色譜柱尚未出現(xiàn)，固定相被涂覆在載體表面，極易流失，為此科學(xué)家對(duì)流動(dòng)相使用給出了合理的建議：流動(dòng)相極性與固定液極性應(yīng)具有較大差別，以減少固定液流失。固定相極性弱于流動(dòng)相時(shí)的液相色譜法被稱為反相色譜法，固定相極性強(qiáng)于流動(dòng)相時(shí)的液相色譜法被稱為正相色譜法。盡管目前鍵合相
色譜配件耗材使用20問！2023/08/25
色譜配件耗材使用20問！·色譜是我們實(shí)驗(yàn)室的重要一員，色譜耗材雖然很不起眼，但是也同樣起著至關(guān)重要的作用，耗材選的對(duì)，維護(hù)的好，才能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定可靠。本文匯總了20個(gè)色譜耗材的常見問題，希望能對(duì)大家有所幫助。·1、氣相色譜中的幾個(gè)概念氣相色譜：以氣體為流動(dòng)相，依據(jù)組分與固定相之間分配吸附等作用力的差異而實(shí)現(xiàn)復(fù)雜樣品分離的一種分離技術(shù)。分離對(duì)象是可揮發(fā)、且熱穩(wěn)定，沸點(diǎn)一般不超過500度的樣品。氣體：載氣——用于傳送樣品通過整個(gè)系統(tǒng)的氣體。檢測(cè)器氣體——某些檢測(cè)器所需的支持氣體，如，F(xiàn)ID。樣
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