Bio-Rad 1658033 小型垂直電泳轉(zhuǎn)印系統(tǒng)用戶指南
Bio-Rad 1658033 小型垂直電泳轉(zhuǎn)印系統(tǒng)用戶指南
——精準(zhǔn)蛋白與核酸分析的一體化解決方案
一、系統(tǒng)概述
Bio-Rad 1658033 是專為實(shí)驗(yàn)室小型化研究設(shè)計(jì)的垂直電泳轉(zhuǎn)印系統(tǒng),集成 Mini-PROTEAN® Tetra 電泳槽(1658001)、PowerPac Basic 基礎(chǔ)電源(1645050) 和 Mini Trans-Blot® 轉(zhuǎn)印模塊(1703935),可實(shí)現(xiàn) 蛋白質(zhì)分離(SDS-PAGE/Native PAGE)、核酸電泳 及 Western Blot 轉(zhuǎn)印 全流程操作。系統(tǒng)采用緊湊設(shè)計(jì),兼容預(yù)制膠與手工灌膠,適用于蛋白純度鑒定、分子量測(cè)定及下游分析。
二、核心組件與技術(shù)參數(shù)
組件 | 型號(hào) | 技術(shù)參數(shù) |
---|---|---|
電泳槽 | 1658001 | - 凝膠容量:1–4 塊(預(yù)制膠或手灌膠) - 凝膠尺寸:8.3 × 7.3 cm(手灌膠) - 緩沖液容量:700–1000 mL |
基礎(chǔ)電源 | 1645050 | - 輸出范圍:電壓 10–300 V,電流 4–400 mA,功率 75 W - 定時(shí):1 分鐘–99 小時(shí) 59 分鐘 - 安全標(biāo)準(zhǔn):EN61010, CE |
轉(zhuǎn)印模塊 | 1703935 | - 轉(zhuǎn)印面積:7.5 × 10 cm - 轉(zhuǎn)印時(shí)間:1 小時(shí)(2 塊凝膠) - 冷卻方式:Bio-Ice 內(nèi)置冷卻裝置 |
凝膠規(guī)格 | - | - 預(yù)制膠厚度:0.75 mm、1.0 mm、1.5 mm - 樣品上樣量:10–680 μL(孔徑 5–15 孔) |
三、系統(tǒng)優(yōu)勢(shì)
高效分離與轉(zhuǎn)印
1 小時(shí)內(nèi)完成 4 塊凝膠電泳,支持 SDS-PAGE 和 Native PAGE 多種模式。
Mini Trans-Blot® 模塊 配備 Bio-Ice 冷卻裝置,確保轉(zhuǎn)印過(guò)程中溫度穩(wěn)定,減少蛋白降解。
靈活兼容性
支持 Bio-Rad 預(yù)制膠(如 Mini-PROTEAN® TGX)與手工灌膠,適配實(shí)驗(yàn)室不同需求。
平行排列的灌膠架可同時(shí)制備兩塊凝膠,彈簧杠桿設(shè)計(jì)保證密封性。
用戶友好設(shè)計(jì)
透明電泳槽便于實(shí)時(shí)觀察實(shí)驗(yàn)進(jìn)程,防漏設(shè)計(jì)避免緩沖液泄漏。
模塊化組件易于拆卸清洗,降低維護(hù)成本。
四、操作流程
(一)電泳操作
凝膠制備
選擇合適厚度的玻璃板(10.1 × 7.3 cm 或 10.1 × 8.2 cm),使用制膠夾固定。
注入分離膠與濃縮膠,插入梳子(孔寬 3.35–12.70 mm),室溫聚合 30 分鐘。
樣品上樣
拔除梳子,用移液器加入 10–20 μL 樣品(如蛋白 Marker、蛋白樣品)。
加入電泳緩沖液至刻度線,蓋上電泳槽蓋。
電泳運(yùn)行
設(shè)置電源參數(shù)(如 120 V 恒壓,30–60 分鐘),啟動(dòng)電泳。
溴酚藍(lán)遷移至凝膠底部時(shí)停止電泳。
(二)轉(zhuǎn)印操作
凝膠處理
電泳結(jié)束后,取出凝膠,切除濃縮膠,保留分離膠。
將凝膠浸泡于轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡 10 分鐘。
轉(zhuǎn)印夾組裝
按順序放置海綿墊、濾紙、凝膠、PVDF 膜(預(yù)濕)、濾紙、海綿墊,形成“三明治”結(jié)構(gòu)。
插入轉(zhuǎn)印夾,紅色電極對(duì)應(yīng)正極,黑色電極對(duì)應(yīng)負(fù)極。
轉(zhuǎn)印運(yùn)行
設(shè)置轉(zhuǎn)印參數(shù)(如 300 mA 恒流,60 分鐘),啟動(dòng)轉(zhuǎn)印。
轉(zhuǎn)印結(jié)束后,取出 PVDF 膜,進(jìn)行封閉與抗體孵育。
五、應(yīng)用場(chǎng)景
蛋白質(zhì)組學(xué)研究
分離復(fù)雜蛋白混合物,分析蛋白表達(dá)差異(如 Western Blot 驗(yàn)證)。
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
檢測(cè) DNA 片段大小(瓊脂糖凝膠電泳)、PCR 產(chǎn)物純化。
藥物研發(fā)
評(píng)估蛋白純度與活性,支持抗體藥物開發(fā)。
教學(xué)實(shí)驗(yàn)
適用于高校生物化學(xué)與分子生物學(xué)課程,幫助學(xué)生掌握電泳與轉(zhuǎn)印技術(shù)。
六、維護(hù)與注意事項(xiàng)
日常維護(hù)
電泳槽與緩沖液槽可單獨(dú)拆卸,使用超純水清洗,避免殘留鹽結(jié)晶。
定期檢查電源線與電極絲,確保導(dǎo)電性良好。
安全規(guī)范
操作時(shí)佩戴手套,避免緩沖液接觸皮膚與眼睛。
禁止空載運(yùn)行電源,防止過(guò)熱損壞。
故障排查
電泳速度異常:檢查緩沖液濃度與電壓設(shè)置。
轉(zhuǎn)印效率低:確認(rèn)轉(zhuǎn)印膜與凝膠接觸緊密,調(diào)整轉(zhuǎn)印時(shí)間與電流。
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