圖 1. 聚山梨酯水解會(huì)產(chǎn)生脂肪酸，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)或游離脂肪酸顆粒的形成

圖 2. 氧化可能發(fā)生在聚山梨酯結(jié)構(gòu)的多個(gè)位置上，導(dǎo)致產(chǎn)生許多種副產(chǎn)物，而且氧化也可能影響生物制劑

現(xiàn)有的一些表面活性劑定量分析雖快速，但僅靠定量分析不足以全面表征表面活性劑，混合模式色譜柱無(wú)法檢測(cè)在溶劑峰中洗脫的降解產(chǎn)物。而采用安捷倫 AdvanceBio 表面活性劑分析 HPLC 柱不僅能進(jìn)行定量分析，還能檢測(cè)表面活性劑降解產(chǎn)物，如聚氧乙烯基團(tuán)或游離脂肪酸，為全面表征表面活性劑提供了更多可能。

圖 3. 雖然混合模式色譜柱足以進(jìn)行表面活性劑定量，但它無(wú)法檢測(cè)聚山梨酯降解產(chǎn)物，例如聚氧乙烯基團(tuán)或游離脂肪酸。Agilent AdvanceBio 表面活性劑分析色譜柱則可以檢測(cè)表面活性劑降解產(chǎn)物，且分析時(shí)間非常短

安捷倫 AdvanceBio 表面活性劑分析 HPLC 柱依托多項(xiàng)獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，在眾多同類產(chǎn)品中脫穎而出。聚焦分離性能方面，該色譜柱獨(dú)特的化學(xué)鍵合相提供了不同的選擇性，能在縮短柱長(zhǎng)的情況下實(shí)現(xiàn)更出色的分離。通常情況下，用于表面活性劑降解表征的方法中，常采用較長(zhǎng)色譜柱和延時(shí)方法來(lái)確保成分有效分離，但安捷倫這款色譜柱可在 10 分鐘內(nèi)將游離脂肪酸從聚山梨酯單酯峰中輕松分離出來(lái)，而一般廠商色譜柱通常需要 60 分鐘，且分離度較低。同時(shí)，不同柱長(zhǎng)各具優(yōu)勢(shì)，50mm 長(zhǎng)的色譜柱對(duì)于監(jiān)測(cè)水解已足夠，若增加柱長(zhǎng)則更有助于篩查氧化產(chǎn)物。

圖 4. Agilent AdvanceBio 表面活性劑分析色譜柱可在 10 分鐘內(nèi)將游離脂肪酸從聚山梨酯單酯峰中輕松分離出來(lái)。通常用于此分析的競(jìng)爭(zhēng)廠商色譜柱則需要 60 分鐘的運(yùn)行時(shí)間，且分離度較低

在節(jié)省成本和時(shí)間上，從傳統(tǒng)反相柱轉(zhuǎn)為 AdvanceBio 表面活性劑分析色譜柱，可節(jié)省大約 60%-83% 的時(shí)間以及 55%-84% 的成本。并且，該色譜柱配備了保護(hù)柱，能保護(hù)分析柱并延長(zhǎng)其使用壽命。

在生物制劑基質(zhì)復(fù)雜的情況下，保護(hù)柱的作用尤為重要。通過(guò)模擬制劑樣品進(jìn)行壽命測(cè)試發(fā)現(xiàn)，在每 150-200 次進(jìn)樣后更換保護(hù)柱，油酸和聚山梨酯 80 單酯之間的分離度始終保持穩(wěn)定，即使經(jīng)過(guò) 2000 次進(jìn)樣后柱壓也未發(fā)生變化，這充分體現(xiàn)了其在節(jié)省成本方面的可觀優(yōu)勢(shì)。

圖 5. 使用通過(guò)重鹽緩沖液配制的樣品來(lái)模擬制劑樣品，進(jìn)行壽命測(cè)試。每 150-200 次進(jìn)樣后更換一次保護(hù)柱。盡管柱壓最終上升超過(guò) 10%，但油酸和聚山梨酯 80 單酯之間的分離度始終保持穩(wěn)定。此外，使用尿嘧啶探針在色譜柱壓力極限下進(jìn)行了壽命測(cè)試，結(jié)果表明，經(jīng)過(guò) 2000 次進(jìn)樣后柱壓未發(fā)生變化，充分證明了色譜柱的機(jī)械穩(wěn)定性。紅線表示壓力增加了 10%

在生物制藥過(guò)程中，對(duì)表面活性劑進(jìn)行分析無(wú)疑至關(guān)重要，而安捷倫 AdvanceBio 表面活性劑分析 HPLC 柱憑借其出色的分離性能、節(jié)省成本和時(shí)間的優(yōu)勢(shì)以及全面的檢測(cè)能力，成為了表面活性劑分析的理想選擇。無(wú)論是研發(fā)階段對(duì)表面活性劑降解的密切監(jiān)控，還是生產(chǎn)過(guò)程中對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的全力保障，這款色譜柱都能提供有力支持，助力生物制藥行業(yè)開拓全新發(fā)展。

圖 6. 一般情況下，增加柱長(zhǎng)可以提高分離度，但對(duì)于脂肪酸/單酯的分離來(lái)說(shuō)，改善作用卻微乎其微。在監(jiān)測(cè)水解時(shí)，50 mm 長(zhǎng)的色譜柱已經(jīng)足夠。但增加柱長(zhǎng)可能有助于篩查氧化產(chǎn)物，因?yàn)檠趸瘯?huì)產(chǎn)生更多的降解副產(chǎn)物