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產品名稱：GC-1 spg小鼠精原細胞系、GC-1 spg小鼠精原細胞系、GC-1 spg小鼠精原細胞系、GC-1 spg小鼠精原細胞系；細胞介紹 該細胞是B型精原細胞通過轉染pSV3-neo(含有SV40大T抗原和耐藥編碼序列的質粒)而產生的永生化，細胞表達兩種睪丸特異性異蛋白，和乳酸脫氫酶C4。 細胞特性 1）來源：睪丸 2）形態(tài)：神經元 3） 含量：>1x106 個/mL 4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性 5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 運輸和保存 可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式 （1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇； （2）存活細胞，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。 （3）收到細胞后請拍照，3天內如果發(fā)現(xiàn)污染，請及時拍照與我們聯(lián)系。 細胞用途： 僅供科研使用。 細胞接收后的處理 1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。 2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。 3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml新的培養(yǎng)基。 4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。 5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們取得聯(lián)系。 細胞培養(yǎng)步驟 一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備 1） 準備DMEM(GIBCO,貨號12800017，添加NaHCO3 1.5g/L)，培養(yǎng)基；北美胎牛血清，10%；雙抗，1%； 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。 二． 細胞處理： 1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法： 1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。 下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。 3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 培養(yǎng)細胞時請注意 (1)傳代時細胞的接種密度應控制在 1萬-4萬 活細胞/平方厘米。 (2)選用高質量的胎牛血清配制培養(yǎng)液。


南京萬木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內外市場專業(yè)研發(fā)、生產和銷售細胞、 外泌體、ELISA 試劑盒、 抗體、重組蛋白及相關試劑。產品在免疫學、信號轉導、代謝、 神經科學等領域內都有科學文獻發(fā)表，被國內外多所大學、研究機構和藥學平臺使用并發(fā)表文獻多達1000多次。我公司憑借優(yōu)異的產品和完善的服務 體系現(xiàn)已受到廣大國內外用戶的青睞和認可。
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