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產(chǎn)品簡介
變異鏈球菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Streptococcus mutans |
貨號 | CP934750 |
產(chǎn)品特征:
變異鏈球菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制，抑制非特異性擴增 。
重復(fù)性好：擴增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是變異鏈球菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
PLGF/PIGF (mouse, rat, pig) 胎盤生長因子抗體（小鼠、大鼠、豬）大鼠B因子(BF)ELISA試盒
PLGF/PIGF (human) 胎盤生長相關(guān)抗體（人）大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試盒
PLGF 胎盤生長因子抗體大鼠B細(xì)胞κ輕肽基因增強子抑制因子,激酶β (IKBKB)ELISA試盒
Plexin B2 神經(jīng)叢蛋白B2抗體大鼠B細(xì)胞κ輕肽基因增強子核因子抑制因子α(NFKBIA)ELISA試盒
Plexin B1 神經(jīng)叢蛋白B1抗體大鼠B細(xì)胞κ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(NFKBIE)ELISA試盒
Plexin A2 神經(jīng)叢蛋白A2抗體大鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試盒
Plexin A1 神經(jīng)叢蛋白A1抗體大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試盒
變異鏈球菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒PLEKHM3 血小板白細(xì)胞C激酶底物同源結(jié)構(gòu)域M3抗體大鼠Bcl-2樣蛋白1(Bcl2-L-1/Bcl-X)ELISA試盒
PLEKHM2/SKIP 血小板白細(xì)胞C激酶底物同源結(jié)構(gòu)域M2抗體大鼠ATP1B4蛋白(ATP1B4)ELISA試盒
PLEKHM1 石骨癥相關(guān)蛋白PLEKHM1抗體大鼠Apelin(APLN)ELISA試盒
Plectin 網(wǎng)蛋白抗體大鼠apelin 13(AP13)ELISA試盒
Pleckstrin/p47 血小板47蛋白抗體大鼠apelin 12(AP12)ELISA試盒
PLDL1/PLCE 脂酶C1樣蛋白抗體大鼠Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試盒
PLCZ1 酸肌醇脂酶PLCZ1抗體大鼠ADM2(ADM2)ELISA試盒
PLCG 2/PLC gamma 2 酯酶Cγ2抗體大鼠8異前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)ELISA試盒生物素Biotin-20℃保存1g
腎綜合癥漢坦病Ⅰ、Ⅱ型通用PCR檢測試盒低溫運輸，-20℃保存50T
腎系膜細(xì)胞生長因子Growth Factor For Cell Culture-20℃保存5mL
神經(jīng)元生長因子Growth Factor For Cell Culture-20℃保存5mL
神經(jīng)氨酸酶抑制篩選試盒Oxidative Stress Detection Kit常溫保存100次
神經(jīng)氨酸酶檢測試盒Oxidative Stress Detection Kit常溫保存100次
神經(jīng)氨酸酶 ( 梭菌 )Neuraminidase4℃保存4mg
少突膠質(zhì)細(xì)胞生長因子Growth Factor For Cell Culture-20℃保存5mL
少突膠質(zhì)前體細(xì)胞生長因子Growth Factor For Cell Culture-20℃保存5mL
少突膠質(zhì)前體細(xì)胞生長因子Growth Factor For Cell Culture-20℃保存5mL
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研