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   基于微生物培養(yǎng)的檢測(cè)方法多年來(lái)一直主導(dǎo)著油田微生物的監(jiān)測(cè)，現(xiàn)行的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和各油田企業(yè)內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)大多以絕跡稀釋法為基礎(chǔ)來(lái)評(píng)價(jià)油田采出水殺菌劑的殺菌效果 （比如：勝利油田主要參照SY/T 5757-2010 油田采出水處理用殺菌劑技術(shù)要求）。但其他工具比如第二代ATP發(fā)光法（三磷酸腺苷）和 qPCR （定量聚合酶鏈反應(yīng)）也在現(xiàn)場(chǎng)和實(shí)驗(yàn)室評(píng)估中變得越來(lái)越普遍，這些工具可以很好的彌補(bǔ)培養(yǎng)法的檢測(cè)周期長(zhǎng)（7天）和對(duì)實(shí)際微生物種群的估計(jì)不足（忽視了除特定微生物以外的99.9%的其他微生物）的缺點(diǎn)。

第二代ATP發(fā)光法和平板法的相關(guān)性

下圖所示的實(shí)驗(yàn)分別選取了不同微生物濃度的含油樣品（紅色）和非含油樣品（藍(lán)色）進(jìn)行了平板法和ATP法的測(cè)試，然后將2種方式分析的結(jié)果進(jìn)行作圖，驗(yàn)證其線性相關(guān)性并計(jì)算了R2值。從圖上我們可以看出ATP和LB培養(yǎng)平板法之間的R2均大于0.9，表明兩種分析方法的相關(guān)性很強(qiáng)。

值得強(qiáng)調(diào)的是，第二代ATP發(fā)光法和第一代ATP方法對(duì)比，具有3個(gè)明顯的提升：

· 增加樣品的分析體積至20mL，提高分析的穩(wěn)定性和檢測(cè)限（LLD）

· 增加了預(yù)處理步驟，用于洗除樣品中的有機(jī)物和TDS來(lái)避免干擾

· 每次分析前都進(jìn)行了酶活校準(zhǔn)，防止酶活損失對(duì)結(jié)果的影響

第二代ATP發(fā)光法，絕跡稀釋法和qPCR的結(jié)果對(duì)比

下圖展示了三種不同方法對(duì)油田實(shí)際采出水樣品中微生物的分析的結(jié)果，6次分析的樣品均來(lái)自于同一個(gè)取樣點(diǎn)，取樣間隔為每1-2月，共耗時(shí)1年。qPCR法的結(jié)果是細(xì)菌總數(shù)和古細(xì)菌數(shù)的總和; 絕跡稀釋法是SRB，APB和GHB讀數(shù)的總和; ATP發(fā)光法是總微生物個(gè)數(shù)。結(jié)果表明，絕跡稀釋法可能會(huì)對(duì)微生物的檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生很大的誤導(dǎo)（如樣品5），而ATP發(fā)光法和qPCR兩種方法獲得的結(jié)果卻有很強(qiáng)的一致性。

下表是美國(guó)巴內(nèi)特頁(yè)巖Barnett Shale開(kāi)采的實(shí)際生產(chǎn)數(shù)據(jù)，對(duì)從8個(gè)不同生產(chǎn)井的井口的樣品進(jìn)行了微生物分析。其中ATP發(fā)光法和絕技稀釋法都在現(xiàn)場(chǎng)完成，qPCR法在實(shí)驗(yàn)室中分析了截留在濾膜上的微生物樣品，結(jié)果以每毫升水樣中的微生物個(gè)數(shù)來(lái)表示，其中白色為正常，黃色為較高，紅色為很高。我們可以看出ATP和qPCR法的結(jié)果基本一致，而絕跡稀釋法存在可能會(huì)過(guò)高（采油井1）或者過(guò)低（采油井3）的估計(jì)微生物數(shù)量的情況。

總結(jié)

在油田采出水中，第二代ATP發(fā)光法和qPCR法的微生物分析結(jié)果不僅和絕跡稀釋法的結(jié)果具有很好的一致性，同時(shí)可以彌補(bǔ)絕跡稀釋法的檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)和對(duì)實(shí)際微生物種群的估計(jì)不足，很好的彌補(bǔ)了絕跡稀釋法的不足。三種方法都具備自己的特點(diǎn)，多種方法的結(jié)合使用可以幫助油田更完善的管理微生物的威脅。