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酶標(biāo)儀波長應(yīng)用分析
閱讀：1793發(fā)布時間：2016-1-12
酶標(biāo)儀波長應(yīng)用分析，酶標(biāo)儀在用單波長測定吸光度時，除受到測定內(nèi)源性干擾( 包括噪音、漂移、電壓等) 因素外，受液體表面張力的影響也很大。在檢測過程中，由于液面表面張力的作用，液體的表面不是一個平面，而是形成一個凹面，從側(cè)面看似凹透鏡，這樣不可避免會影響光路的正常通過。由于凹液面的影響，光線在通過液面時，除正常的被液體吸收一部分外，尚有部分被折射和反射( 如光線通過凹透鏡那樣) ，影響吸光度的檢測。而酶標(biāo)儀使用的又是通過光導(dǎo)纖維傳播的點(diǎn)光源，如果每次能在同一部位檢測，吸光度的重復(fù)性將得到保證，但由于機(jī)械運(yùn)動等造成的誤差，不可能保證每孔都在相同部分被檢測，因此造成了孔與孔之間有一定的差異。
酶標(biāo)儀波長應(yīng)用分析，在雙波長測定中，減少了測定干擾和電路干擾，因此測定結(jié)果明顯好轉(zhuǎn)。由于液體表面張力的不同， 導(dǎo)致單波長測定時誤差較大。 并且用不同的洗滌劑會影響到zui后加入底物和終止液后的液面情況，用加入表面活性劑的洗滌劑清洗后， 形成的液面更凹， 對單波長檢測的影響更大，并且與表面活性劑的濃度成正比。而用中性蒸餾水洗滌后，單、雙波長檢測技術(shù)結(jié)果基本一致。
酶標(biāo)儀波長應(yīng)用分析，在酶聯(lián)免疫法測定抗原、抗體中，常用標(biāo)記酶辣根過氧化物酶所使用的底物一般是鄰苯二胺或四甲基聯(lián)苯胺，顯色終止后，二者在6 3 0nm 和6 5 5nm處的吸光度值都只在吸收峰處 (4 9 2 n m/4 5 0 nm )吸光度值的 1 %以下，因此，利用雙波長檢測，不會影響檢測的靈敏度。建議在進(jìn)行酶聯(lián)免疫檢測時， 酶標(biāo)儀比色應(yīng)該首先雙波長。這樣可以提高臨界值處標(biāo)本的分析準(zhǔn)度， 減少實(shí)驗(yàn)誤差。
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