瓊脂糖凝膠電泳:實(shí)用概述
凝膠電泳的原理
可視化和文檔
影響因素:瓊脂糖和緩沖液
瓊脂糖的帶電基團(tuán)(丙酮酸和硫酸鹽基團(tuán))決定了電內(nèi)滲(EEO 值)
負(fù)硫酸根離子與凝膠基質(zhì)結(jié)合,而陽(yáng)離子(K+、Na+)可自由移動(dòng)。在電泳過(guò)程中,兩組相互移動(dòng),導(dǎo)致不需要的制動(dòng)效果。因此,高 EEO 值(例如,瓊脂糖中的高硫酸鹽含量)會(huì)減慢 DNA 遷移并導(dǎo)致條帶拖尾。
TAE 緩沖液:具有低離子強(qiáng)度和低緩沖能力。建議用于分離較大的 DNA 分子(從 1 kb 開(kāi)始),以及之后分離分離的 DNA 時(shí)。
TBE 緩沖液:具有高離子強(qiáng)度和高緩沖能力。它與較小的 DNA 分子形成更清晰的條帶,推薦用于分離小 DNA 分子 (<1kb)。
GENAXXON 提供以下用于 DNA 分子分離的瓊脂糖:

1. 高分辨率瓊脂糖
能夠分離小至 2-3 個(gè)堿基對(duì)的差異。
凝膠濃度最高可達(dá) 4%。
高分辨率瓊脂糖可與其他瓊脂糖混合。
將 Agarose Tiny (M3046) 添加到 Agarose LE (M3044) 中可顯著提高分離性能和分離度。
Agarose Tiny (M3046) 可以替代聚丙烯酰胺凝膠。
M3046 – 微小瓊脂糖
M3047 – 瓊脂糖 Tiny HT
低熔點(diǎn)瓊脂糖
與標(biāo)準(zhǔn)瓊脂糖相比,形成具有更高透明度的凝膠。
由于熔點(diǎn)低,非常適合從凝膠中快速提取 DNA。
適用于使用酶進(jìn)行“凝膠內(nèi)”DNA 處理。
非常適合使用凝膠提取試劑盒從凝膠中重新分離 DNA 和 RNA。
適合用 β-瓊脂酶消化。
可以輕柔地分離大的 DNA 片段。
適用于細(xì)胞和組織培養(yǎng)(M3049 – Agarose LM – 低熔點(diǎn))。
非常適合噬菌體噬菌斑測(cè)定。
M3046 – 微小瓊脂糖
M3049 - 瓊脂糖 LM – 低熔點(diǎn)
GENAXXON 瓊脂糖的應(yīng)用
1. 印跡(Southern Blot)
M3044 – 瓊脂糖 LE(標(biāo)準(zhǔn)瓊脂糖)
M3054 – 瓊脂糖 LE 片劑
M3047 – 瓊脂糖 Tiny HT
M3051 – 瓊脂糖 Mega
2. PFGE(脈沖場(chǎng)凝膠電泳)
M3051 – 瓊脂糖 Mega
3. 噬菌體噬菌斑測(cè)定
M3049 – 瓊脂糖 LM – 低熔點(diǎn)
4. 免疫擴(kuò)散
M3051 – 瓊脂糖 Mega
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