百歐博偉生物：培養(yǎng)基一個醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)極為重要和廣泛的生產(chǎn)物資，是一些生物藥品的生產(chǎn)、實驗室運行的基礎性物資，細胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)都要用到培養(yǎng)基。

一、微生物培養(yǎng)基的定義

培養(yǎng)基是指使用手動方法生產(chǎn)的混合營養(yǎng)產(chǎn)品，用于微生物培養(yǎng)、分離、鑒定、研究和保存。微生物的生長繁殖需要一定的營養(yǎng)物質(zhì)和適宜的環(huán)境條件。在人類開發(fā)、生產(chǎn)和疾病防治過程中，為了控制和利用微生物，對天然或純化的營養(yǎng)物質(zhì)和適宜的滲透壓、pH值等進行加工，生產(chǎn)出不同營養(yǎng)需求的營養(yǎng)基質(zhì)，在人工條件下培養(yǎng)和使用微生物。這類人工培養(yǎng)的微生物（細菌、真菌、病毒等）具有多種用于各種目的的營養(yǎng)制劑，如微生物生長、繁殖或分離鑒定等，俗稱微生物培養(yǎng)基。研究培養(yǎng)基成分、制備方法、儲存條件、培養(yǎng)原理、質(zhì)量控制和影響評估、原材料生產(chǎn)和應用等一系列主題的科學被稱為培養(yǎng)基科學。

二、微生物培養(yǎng)基分類

微生物培養(yǎng)基按培養(yǎng)基成分可分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基三類；按物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基；按微生物的種類分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基和霉菌培養(yǎng)基；按特殊用途分為基礎培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基滅菌大多數(shù)用濕熱滅菌。

講解一下微生物培養(yǎng)基的滅菌方法：

1、干熱滅菌法（即熱空氣滅菌法）

干熱滅菌一般是利用電熱烘箱作為干熱滅菌器。前面所包裝好的玻璃器皿，如帶棉塞的三角瓶、試管、包裝好的吸管、培養(yǎng)皿等，放入電熱烘箱中。打開烘箱頂部的通氣孔，接上電源加熱，使箱內(nèi)空氣的溫度達到160℃-170℃，關閉通氣孔使箱內(nèi)的溫度保持在160℃左右并維持1.5-2h。時間一到，切斷電源；待溫度下降60℃-70℃以下，方可打開箱門取滅菌物品，否則驟冷后易使箱內(nèi)玻璃儀器破損。

2、加壓蒸汽滅菌法

利用高壓滅菌器，使水的沸點在密閉的滅菌器內(nèi)隨壓力升高而增高，來提高蒸汽的溫度和滅菌的效率。在同一溫度下濕熱的殺菌效率比干熱大，因為微生物細胞蛋白質(zhì)在濕熱情況下，易干凝固，同時濕熱的穿透力強，當水蒸氣與被滅菌的物品相接觸后，便放出汽化潛熱，逐步提高被滅菌物品的溫度，直至與水蒸汽的溫度相等，達到平衡為止，從而提高滅菌效率。

3、濕熱滅菌

滅菌原理是直接用蒸汽滅菌，蒸汽在冷凝時能釋放出大量潛熱，蒸汽具有強大的穿透力，破壞菌體蛋白和核酸的化學鍵，使酶失活，微生物因代謝障礙而死亡。水煮常壓滅菌：100℃?；蝻柡驼羝麥缇阂话?21℃，30分鐘。適合培養(yǎng)基和發(fā)酵設備滅菌。尤其是對芽孢、霉菌等高抗性微生物的控制——濕熱滅菌也不能保障的滅菌成功，滅菌后有可能還會存在芽孢等高抗性微生物的存留，容易導致內(nèi)毒素污染。

4、紫外線滅菌

波長260-280nm之間的紫外線有很強的殺菌能力，一般紫外燈管能產(chǎn)生253.7nm的紫外光，殺死力強而穩(wěn)定，但穿透力弱一般只適宜物體表面、空氣滅菌。例如接種室、培養(yǎng)室、手術室、藥廠包裝室等空氣滅菌。一般30w燈管、9m3空間，距地面2m每次打開紫外線照射0.5h，就使室內(nèi)空氣滅菌。若照射紫外線時，先噴灑石碳酸等化學消毒劑，可增強滅菌效果。

在進行微生物接種和分離等操作時，常須用紫外線來殺滅接種室（箱）空氣、臺面等處的微生物。

紫外線雖有較強的殺菌力，但穿透力較弱，即使一薄層玻璃或水層就能將大部分紫外線濾除，因此只適用于空氣及表面殺菌。紫外線對眼粘膜及視神經(jīng)有強烈的損傷作用，對皮膚有刺激作用，所以不能直接在紫外線燈開啟下工作和用眼睛直視開啟的紫外燈。

5、化學藥劑消毒滅菌

微生物實驗室中常用的化學殺菌劑有溶液，它們有的是殺菌劑，有的是抑菌劑，

以上是微生物培養(yǎng)基的滅菌方法說明，如果你的培養(yǎng)基中所有的成分都可以耐高溫，那就用壓力蒸汽高溫滅菌的方式；如果你的培養(yǎng)基中有些成分不耐高溫，就可以用除菌過濾的方式除菌，用除菌濾器過濾培養(yǎng)基至已滅菌的培養(yǎng)器中。如果要求不高，部分試驗用培養(yǎng)基，可以用煮沸的方式滅菌。

特別是在發(fā)酵過程中，培養(yǎng)基滅菌主要有以下幾個原因：如不滅菌，會使生物反應的基質(zhì)或產(chǎn)物，因雜菌的消耗而損失，造成生產(chǎn)能力的下降;雜菌也會產(chǎn)生代謝產(chǎn)物，這就使產(chǎn)物的提取更加困難，造成得率降低，產(chǎn)品質(zhì)量下降;雜菌大量繁殖后，會改變反應液的pH值，使反應異常;有些雜菌會分解產(chǎn)物，使生產(chǎn)失敗;如果發(fā)生噬菌體污染，生產(chǎn)菌細胞將被裂解，使生產(chǎn)失敗。

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