高效液相色譜儀的柱子選擇與使用方法

來源：天津市蘭博實驗儀器設(shè)備有限公司 2025年04月20日 11:21

　　一、色譜柱的選擇要點

　　高效液相色譜儀是分離系統(tǒng)的核心部件，其選擇直接影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。選擇色譜柱時需考慮以下幾個關(guān)鍵因素：

　　??固定相類型??：根據(jù)分析物性質(zhì)選擇C18、C8、苯基柱或氨基柱等。C18柱適用于大多數(shù)非極性至中等極性化合物，而極性化合物可能需要氨基柱或氰基柱。

　　??pH耐受范圍??：硅膠基質(zhì)柱的耐受超出此范圍需選擇雜化或聚合物基質(zhì)柱。

　　二、色譜柱的正確使用方法

　　1、??柱前處理??：

　　新柱使用前應(yīng)按說明書進(jìn)行活化，通常用高比例有機(jī)相沖洗去除保存溶劑。梯度洗脫方法應(yīng)從低有機(jī)相開始逐步提高。

　　??2、流動相匹配??：

　　確保流動相與柱保存溶劑互溶，避免直接從不互溶溶劑轉(zhuǎn)換。水相緩沖液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，防止微生物生長或鹽析出。

　　3、??樣品前處理??：

　　樣品應(yīng)溶解在初始流動相或弱溶劑中，避免使用強(qiáng)溶劑造成峰形畸變。復(fù)雜樣品需經(jīng)過濾或固相萃取處理。

　　4、??柱保護(hù)措施??：

　　在柱前安裝保護(hù)柱可延長分析柱壽命。對于生物樣品或復(fù)雜基質(zhì)，建議使用在線過濾器。

　　三、維護(hù)與保存

　　??1、日常沖洗??：

　　每天使用后應(yīng)用高比例有機(jī)相沖洗30分鐘以上，去除柱內(nèi)殘留物。緩沖液使用后需先用水沖洗再轉(zhuǎn)有機(jī)相。

　　??2、長期保存??：

　　不使用時，柱應(yīng)保存在高比例有機(jī)相中，兩端密封防止干燥。硅膠柱避免保存在純水中。

　　3、??性能監(jiān)測??：

　　定期用標(biāo)準(zhǔn)品測試柱效、不對稱因子和保留時間，建立柱性能檔案。當(dāng)柱效下降或峰形明顯變差時應(yīng)考慮更換。

　　??4、故障處理??：

　　壓力異常升高可能因篩板堵塞，可嘗試反向沖洗或更換篩板。峰形拖尾可能因柱頭塌陷或污染，必要時進(jìn)行柱頭修復(fù)或更換。

　　正確選擇和使用色譜柱不僅能獲得理想分離效果，還能延長柱壽命，降低分析成本。實驗人員應(yīng)根據(jù)具體應(yīng)用需求，建立適合自己實驗室的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。

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