超聲波細(xì)胞破碎機(jī)的工作原理基于超聲波在液體中的空化作用,換能器將電能量通過變幅桿在工具頭頂部液體中產(chǎn)生高強(qiáng)度剪切力,形成高頻的交變水壓強(qiáng),使空腔膨脹、爆炸將細(xì)胞擊碎。此外,由于超聲波在液體中傳播時(shí)產(chǎn)生劇烈地?cái)_動作用,使顆粒產(chǎn)生很大的加速度,互相或與器壁碰撞而擊碎或重組。
細(xì)胞膜將胞內(nèi)包含物與環(huán)境分開,從而保證了細(xì)胞的完整性。細(xì)胞膜的彈性使細(xì)胞能夠適應(yīng)外界環(huán)境滲透壓的急劇變化。在生命科學(xué)的研究中,通常要研究細(xì)胞內(nèi)的大分子,如蛋白質(zhì)、核算、酶等,所以要設(shè)法將胞內(nèi)的物質(zhì)釋放出來,這個(gè)過程叫細(xì)胞破碎或裂解(ce11 disruption or 1ysis)。破碎方法的好壞會影響到產(chǎn)率和產(chǎn)物的正確功能狀態(tài)。破碎方法選擇不正確還可能使目的蛋白降解,無法獲得想要的蛋白。因此,破碎方法是開展工作的重要一步。目前常用的主要的細(xì)胞破碎技術(shù)如下。
超聲波細(xì)胞破碎機(jī)注意事項(xiàng):
1.一定要將超聲波細(xì)胞破碎儀的變幅桿插入樣品后才能開機(jī),絕空載。
2.超聲波細(xì)胞破碎儀的探頭入水要居中,不要貼壁。超聲波是縱波,插入太深不容易形成對流,影響破碎效率。
3.超聲波細(xì)胞破碎儀參數(shù)的設(shè)置
1)時(shí)間:時(shí)間設(shè)定應(yīng)以超聲時(shí)間短,超聲次數(shù)多為原則,可延長超聲機(jī)子以及探頭的壽命。
2)超聲功率:不宜太大,以免樣品飛濺或起泡沫。
3)容器選擇:樣品量的多少決定容器的大小,這樣有利于樣品在超聲中對流,提高破碎效率。
4.日常保養(yǎng):用完后用酒精擦洗探頭或用清水進(jìn)行超聲!
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