bd流式細(xì)胞儀的工作原理是:將待測細(xì)胞經(jīng)特異性熒光染料染色后放入樣品管中,在氣體的壓力下進(jìn)入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細(xì)胞排成單列由流動室的噴嘴噴出,形成細(xì)胞柱。
通常以激光作為發(fā)光源。經(jīng)過聚焦整形后的光束,垂直照射在樣品流上,被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下,產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。這兩種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收。光散射信號在前向小角度進(jìn)行檢測,這種信號基本上反映了細(xì)胞體積的大??;熒光信號的接受方向與激光束垂直,經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,形成多個不同波長的熒光信號。
這些熒光信號的強度代表了所測細(xì)胞膜表面抗原的強度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度,經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號,再通過模/數(shù)轉(zhuǎn)換器,將連續(xù)的電信號轉(zhuǎn)換為可被計算機識別的數(shù)字信號。計算機把所測量到的各種信號進(jìn)行計算機處理,將分析結(jié)果顯示在計算機屏幕上,也可以打印出來,還可以數(shù)據(jù)文件的形式存儲在硬盤上以備日后的查詢或進(jìn)一步分析。檢測數(shù)據(jù)的顯示視測量參數(shù)的不同由多種形式可供選擇。單參數(shù)數(shù)據(jù)以直方圖的形式表達(dá),其X軸為測量強度,Y軸為細(xì)胞數(shù)目。
bd流式細(xì)胞儀集計算機技術(shù)、激光技術(shù)、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞免疫學(xué)于一體,同時具有分析和分選細(xì)胞功能。流式細(xì)胞術(shù)不僅可測量細(xì)胞大小、內(nèi)部顆粒性狀,還可檢測細(xì)胞表面和細(xì)胞漿抗原、細(xì)胞內(nèi)DNA、RNA含量等,目前主要應(yīng)用于生物學(xué)研究、制藥工業(yè)等科研領(lǐng)域,但其應(yīng)用領(lǐng)域已逐漸拓展到臨床。通過對細(xì)胞表面抗原的分析,流式細(xì)胞儀可以用于檢測淋巴細(xì)胞亞型(TBNK)、血液病分型、腫瘤標(biāo)志物測定等。
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