濃縮是一項(xiàng)常用的樣品前處理技術(shù),對(duì)樣品溶液進(jìn)行濃縮處理不外乎兩個(gè)目的:
一是為了調(diào)節(jié)待測(cè)物濃度,以適應(yīng)分析儀器的量程。無(wú)論多*的分析儀器都有量程范圍,就像尺子一樣,無(wú)論是格尺、卷尺、游標(biāo)卡尺、千分尺,對(duì)于超出它量程的物體都無(wú)法準(zhǔn)確測(cè)量。目標(biāo)物濃度太大我們就需要對(duì)樣品進(jìn)行稀釋處理,如標(biāo)準(zhǔn)物,基本上都需要對(duì)其進(jìn)行稀釋,才能進(jìn)樣測(cè)試;反過來(lái),對(duì)于目標(biāo)物濃度太小的樣品,我們就需要對(duì)其進(jìn)行濃縮處理,以便達(dá)到分析儀器的定量限。
二是,在樣品提取過程中有時(shí)必須得使用某類溶劑,而這類溶劑恰恰又會(huì)對(duì)分析儀器造成損害,不能直接進(jìn)樣,這時(shí)就需要對(duì)樣品溶液中的溶劑進(jìn)行置換,通俗的說(shuō),就是將樣品中原有的溶劑蒸發(fā)掉,然后再加入適合分析儀器系統(tǒng)的溶劑作為載液。
對(duì)于樣品稀釋所用的工具很簡(jiǎn)單,洗耳球、移液管和容量瓶就搞定了,注意:移液管和容量瓶必須是經(jīng)過校準(zhǔn)的,小瑞剛參加工作時(shí)曾在藥廠的化驗(yàn)室工作兩年,每天的工作就是用液相色譜儀對(duì)藥品進(jìn)行含量、相關(guān)物質(zhì)、溶出度等指標(biāo)的檢驗(yàn),每天都要要做大量的樣品稀釋工作,當(dāng)時(shí)的手法可謂嫻熟,寫到這里小瑞的思緒已經(jīng)穿越到過去了
樣品濃縮相對(duì)于樣品稀釋就復(fù)雜多了,有很多種技術(shù)方法,由于樣品自身性質(zhì)差異較大,每種方法都有其局限性,沒有萬(wàn)能的方法,所以一定要選對(duì)方法,否則就會(huì)造成樣品損失,或者降低工作效率。
按待測(cè)物的性質(zhì),暫且把濃縮歸納成兩大類,一類是待測(cè)物容易揮發(fā)的樣品,另一類是待測(cè)物不易揮發(fā)的樣品。
對(duì)于第一類是待測(cè)物為易揮發(fā)的樣品,一般采用吹掃捕集或冷阱技術(shù),它們都是利用待測(cè)物的易揮發(fā)性,先讓待測(cè)物揮發(fā)出來(lái),然后通過吸附物或者通過低溫的方式,讓目標(biāo)物再富集下來(lái),這兩種方法不但能起到濃縮的作用還能起到純化樣品的作用,一舉兩得,但僅局限于待測(cè)物必須是易揮發(fā)的物質(zhì),并且后端分析測(cè)試一般只適合GC進(jìn)樣。
對(duì)于另一類待測(cè)物是不易揮發(fā)的物質(zhì),而樣品溶劑更容易揮發(fā),這類樣品適用的濃縮方式又可分為離心濃縮,氮吹濃縮、真空濃縮。
離心濃縮,就是將樣品放入離心機(jī)中高速旋轉(zhuǎn),并配以抽真空的方式使得溶劑揮發(fā),這種方式主要針對(duì)熱敏性強(qiáng),不適合加熱,且試樣體積較小樣品,比如生物樣品。缺點(diǎn)是濃縮速度慢。
真空濃縮,是利用抽真空、加熱,還可以同時(shí)輔以樣品震蕩的方式使得溶劑揮發(fā),主要適用于易于氧化的樣品,抽真空方式可以減少樣品與氧氣的接觸,從而保護(hù)易于氧化的待測(cè)物。缺點(diǎn)也是濃縮速度慢。
以上兩種方式都是依據(jù)特殊樣品的性質(zhì),為了減少其在濃縮過程中的損失,而采取的特殊方法,這兩種方式的缺點(diǎn)都是濃縮速度慢,所需時(shí)間長(zhǎng)。
對(duì)于無(wú)上述特性的常規(guī)樣品,建議使用氮吹濃縮,就是通過加熱和氮?dú)獯祾邩悠啡芤罕砻娴姆绞竭M(jìn)行濃縮,這種濃縮方式速度最快。
寫到這里順便科普下關(guān)于氮吹濃縮儀位數(shù)選擇的誤區(qū):中學(xué)時(shí)我們都曾學(xué)過,影響液體蒸發(fā)速度的3個(gè)條件:溫度、溶液表面積、溶液表面氣體的流速。
溶液表面積是影響蒸發(fā)速度的三大因素之一,在儀器投影面積一定的情況下,濃縮儀的工位數(shù)越多,濃縮試管就只能越細(xì),橫截面積就越小,這個(gè)影響最重要的不是樣品體積的適用性,而是樣品的濃縮速度。工位數(shù)越多,樣品溶液表面積就越小,使得濃縮速度大打折扣,甚至?xí)嗖钜粋€(gè)數(shù)量級(jí)。另外,位數(shù)相對(duì)較少的氮吹濃縮儀通常每個(gè)濃縮工位都會(huì)有一個(gè)光學(xué)傳感器用來(lái)檢測(cè)濃縮終點(diǎn),這是一個(gè)很實(shí)用的功能,每當(dāng)有工位濃縮到終點(diǎn)后就能捕捉到反饋信號(hào),并通過聲、光、文字等方式提示用戶;而好幾十個(gè)工位的濃縮儀,就不方便安裝這么多數(shù)量的傳感器了,使用過程中就需多多看守、實(shí)時(shí)留意濃縮的進(jìn)程了,稍不注意就會(huì)出現(xiàn)樣品蒸干的現(xiàn)象造成樣品損失,使用起來(lái)要?jiǎng)谏褓M(fèi)心的多了。
所以選擇氮吹平行濃縮儀時(shí),濃縮工位數(shù)切莫貪多,在滿足日常樣品處理數(shù)量的前提下,工位數(shù)不是越多越好,而是越少越好,否則得不償失。
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