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遺傳毒性試驗(yàn)是評(píng)估藥物遺傳毒性的常用方法
遺傳毒性試驗(yàn)是一種使用哺乳動(dòng)物或非哺乳動(dòng)物細(xì)胞，細(xì)菌，酵母或真菌的測(cè)試，以確定測(cè)試樣品是否引起基因突變，染色體結(jié)構(gòu)畸變以及其他DNA或基因變化。進(jìn)行測(cè)試時(shí)，應(yīng)在至少兩次測(cè)試中使用哺乳動(dòng)物細(xì)胞來(lái)研究不同的測(cè)試終點(diǎn)，從而確定醫(yī)療器械（包括口腔器械））生物（口腔）材料和/或其提取物引起遺傳的能力損害和遺傳變化。這是遺傳毒理學(xué)研究的重要內(nèi)容。它可以檢測(cè)藥物是否具有誘變，異常和致癌作用，它是檢測(cè)基因突變和評(píng)估藥物遺傳毒性的常用方法之一。
遺傳毒性試驗(yàn)的原理：鼠傷寒沙門氏菌菌株（TA系列）是組氨酸缺陷型突變體，也就是說(shuō)，它們失去了合成組氨酸的能力，因此無(wú)法在無(wú)組氨酸的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。如果測(cè)試物質(zhì)是誘變劑，則可以誘導(dǎo)菌株逆向突變并恢復(fù)合成組氨酸的能力，從而在缺乏組氨酸的堿性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。菌落的數(shù)量反映了被測(cè)物質(zhì)的致突變性。
染色體畸變包括染色體的結(jié)構(gòu)和數(shù)值畸變，由外源因素（例如破壞劑）誘導(dǎo)的染色體或染色體斷裂進(jìn)一步導(dǎo)致染色體缺失和重排。常見(jiàn)的類型包括骨折，碎片，缺失，原位，移位等。在體外，在存在或不存在體外代謝活化的情況下，將哺乳動(dòng)物細(xì)胞暴露于不同濃度的測(cè)試物質(zhì)。一定時(shí)間后，用秋水仙堿處理細(xì)胞，使更多的有絲分裂細(xì)胞終止于中期。收集細(xì)胞進(jìn)行吉姆薩染色，以觀察染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目畸變。應(yīng)建立至少3個(gè)測(cè)試劑量，溶劑對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組。
遺傳毒性試驗(yàn)是檢測(cè)破損劑或有絲分裂毒物的有效方法。在細(xì)胞有絲分裂過(guò)程中，由于紡錘體功能障礙而形成的染色體結(jié)構(gòu)破壞或染色體滯后導(dǎo)致的染色體片段由于紡錘體牽引力的損失而全部保留在細(xì)胞質(zhì)中，形成了與核染色一致的染色體，稱為微核。嚙齒類動(dòng)物的骨髓中多色紅細(xì)胞（PCE）的微核試驗(yàn)是常用的。用測(cè)試物質(zhì)處理嚙齒動(dòng)物，然后殺死。取出骨髓，切片，固定并染色。在顯微鏡下計(jì)數(shù)PCE中的微核。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)可以更模擬體內(nèi)測(cè)試物質(zhì)的轉(zhuǎn)化過(guò)程。因此，體內(nèi)微核試驗(yàn)常被用作國(guó)內(nèi)外藥物，食品和化學(xué)藥品遺傳毒性評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)組合之一。
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