　　來自于色譜系統(tǒng)的污染主要指，HPLC儀器系統(tǒng)中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒，以及流動相系統(tǒng)過濾不*殘留的固體顆粒。來自于樣品的污染主要指，未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進入色譜系統(tǒng)中，由于樣品溶劑和流動相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異，導(dǎo)致沉淀析出污染系統(tǒng)。

　　是對于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測，因基質(zhì)的復(fù)雜性，色譜柱受污染的情況會較加嚴重。污染會導(dǎo)致色譜系統(tǒng)壓力升、色譜柱塌陷、填料變色等，從而帶來檢測成本，測試結(jié)果不等各種影響。

　　保護柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材，使用保護柱可降低分析柱受污染的程度，延長分析柱使用壽命。

　　保護柱位于進樣器與分析柱之間，作用主要兩方面：

　　1.截留不溶性顆粒

　　2.吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì)

　　一、如何選擇保護柱？

　　1.保護柱的填料，與分析柱保持一致！填料品牌一致，才能確保選擇性一致。

　　2.保護柱的規(guī)格，要與分析柱匹配！填料粒徑一致，保護柱的內(nèi)徑與分析柱的內(nèi)徑相近。

　　3.對于精細分離，保護柱本身的裝填柱效要足夠好！

　　4.對于精細分離或者小內(nèi)徑色譜柱分離，保護柱的連接死體積要盡可能小。

　　5.如果是用于UHPLC柱，還要考慮保護柱的耐壓能力。

　　保護柱不理想，就會導(dǎo)致峰擴散，分離度下降，不利于精細分離。

　　理想的保護柱，即使分析柱短小如4.6×100mm，安裝保護柱后也未引起分離度與峰的降低。

　　二、如何使用保護柱？

　　1.柱。避免保護柱成為不同項目的交叉污染源。

　　2.及時更換保護柱。當(dāng)峰的理論塔板數(shù)下降15%，或是柱壓上升15%，或是關(guān)鍵分離度下降15%時，都應(yīng)該及時更換保護柱。

　　3.不慎發(fā)生污染時，可以將分析柱卸下，單沖洗保護柱，可以使污染物更快的從保護柱中流出。——但是不可以聲保護柱。

　　三、保護柱使用注意事項

　　1.立式保護柱與分析柱連接時，連接管路盡可能短，且接口切面平滑，盡量減少死體積以降低柱外展寬效應(yīng)。

　　2.卡套式保護柱一般未標(biāo)注液流方向，使用時******自行標(biāo)注，并按照標(biāo)注方向來使用，以免正反向使用后，截留的雜質(zhì)污染分析柱。

　　3.直接填裝的短柱型保護柱，出現(xiàn)柱壓升或峰型變差時，可不接分析柱進行反向清洗，清洗溶劑可參考分析柱清洗溶劑。

　　4.卡套式保護柱，柱芯替換時，注意柱芯與柱套是否存在方向上的匹配，同時不易旋擰過緊，以防滑絲。

　　5.保護柱或柱芯一般不建議聲清洗，因可能對填料表面修飾有影響。

　　6.如同一保護柱配不同的分析柱使用，每次使用前，保護柱需清洗并用流動相平衡保護柱一段時間后，再接分析柱使用。

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