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紫外可見分光光度計的工作原理和主要類型
工作原理
紫外可見分光光度計基于比爾-朗伯定律(Beer-Lambert Law),即吸光度(A)與溶液濃度(c)、光程長度(b)和摩爾吸光系數(shù)(ε)成正比:
- 光源:提供紫外(190-400 nm)和可見光(400-800 nm)區(qū)域的連續(xù)光譜。
- 單色器:將復(fù)合光分解為單色光,通常采用光柵或棱鏡。
- 吸收池:盛放待測樣品,常用石英材質(zhì)(適用于紫外區(qū))或玻璃材質(zhì)(適用于可見光區(qū))。
- 檢測器:將光信號轉(zhuǎn)換為電信號,常用光電倍增管(PMT)或硅光電池。
- 信號處理與顯示:將電信號放大并顯示為吸光度或透光率。
主要類型
- 單光束分光光度計:
- 結(jié)構(gòu)簡單,價格較低。
- 適用于定量分析,但需用空白溶液校正。
- 雙光束分光光度計:
- 自動記錄吸收光譜,靈敏度和準(zhǔn)確度較高。
- 能自動消除光源強(qiáng)度變化的影響。
- 雙波長分光光度計:
- 通過兩個波長的吸光度差值進(jìn)行測量,減少背景干擾。
- 適用于渾濁樣品或多組分混合物的分析。