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O-Glycosidase

MCE 國際站：O-Glycosidase

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲(chǔ)條件： -20°C，1 年

簡介：O-Glycosidase具有高度特異性，可從絲氨酸、蘇氨酸殘基或者作為糖肽或糖蛋白的一部分釋放 Galβ1-3GalNAc。應(yīng)用于糖蛋白的生物合成分析，O-聚糖的生物活性蛋白質(zhì)O-糖基化檢測(cè)和結(jié)合位點(diǎn)分析。

概述：O-Glycosidase，大腸桿菌中重組表達(dá)，來源于 Streptococcus pneumoniae，具有高度特異性，可催化絲氨酸、蘇氨酸殘基或糖蛋白去除連接二糖，釋放 Galβ 1-3GalNAc。該酶可應(yīng)用于糖蛋白的生物合成分析，O-聚糖的生物活性蛋白質(zhì) O-糖基化檢測(cè)和結(jié)合位點(diǎn)分析。

描述：

O-糖苷酶具有高度特異性，可以從絲氨酸、蘇氨酸殘基或作為糖肽或糖蛋白的一部分釋放出Galβ1-3GalNAc。應(yīng)用于糖蛋白生物合成分析、O-聚糖生物活性蛋白O-糖基化檢測(cè)和結(jié)合位點(diǎn)分析。

操作說明：1、使用前準(zhǔn)備將 O-Glycosidase 試劑取出，加入 30-50 µL ddH2O 溶解，10000 rpm 離心 10 s，確保所有試劑都在管底。其他緩沖液從 -20°C 冰箱中取出待用。2、變性條件下糖蛋白去糖基化1) 用 ddH2O 溶解 1-20 µg 的糖蛋白，加入 1 µL 的 10× Glycoprotein Denaturing Buffer，用 ddH2O 定容至 10 µL，75°C 孵育 10 min。2) 加入 2 µL 的 10× GlycoBuffer 2 和 2 µL 的 10% NP-40，輕輕混勻。3) 加入 1-4 µL 的 O-Glycosidase，加 ddH2O 至 20 µL，輕輕混勻，37°C 孵育 1-4 h。4) 用于 SDS-PAGE 分析或 HPLC 分析。3、非變性條件下糖蛋白去糖基化1) 取 10-100 µg 糖蛋白溶液，加入 2 µL 10× Glyco 緩沖液和 2-5 µL O-Glycosidase，補(bǔ)加 ddH2O 使得反應(yīng)體系總體積為 20 µL，輕輕混勻。2) 37°C 條件下反應(yīng) 4-24 h。注：當(dāng)對(duì)天然糖蛋白去糖基化時(shí)，建議將等量糖蛋白樣品進(jìn)行變性后再同步進(jìn)行酶切實(shí)驗(yàn)作為陽性對(duì)照，以確定非變性條件下去糖基化反應(yīng)的程度。

注意事項(xiàng)：1. 體系放大時(shí)，孵育時(shí)間和酶量需要根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整，低速震蕩混勻可以提高轉(zhuǎn)化率。2. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

銷售產(chǎn)品：Maltose  | AZD-8055  | PIM-447 (dihydrochloride)  | Pristane  | Ceftaroline fosamil  | RMC-6291  | Protoescigenin  | Nutlin-3  | WF-47-JS03  | Bosentan

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