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人胃癌類器官培養(yǎng)試劑盒 | Human Gastric Cancer Organoid Kit | MCE

閱讀:63      發(fā)布時間:2024-9-13
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人胃癌類器官培養(yǎng)試劑盒

MCE 國際站:Human Gastric Cancer Organoid Kit

品牌:MedChemExpress (MCE)

存儲條件:Basal Medium A : 4℃, 1 year. Shipping with blue ice.Supplement B (50x) & Supplement C (250x) : -20°C, 1 year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

簡介:MCE 人胃癌類器官培養(yǎng)試劑盒包含子胃癌類器官基礎培養(yǎng)基 A 以及培養(yǎng)添加物 B (50x) 和培養(yǎng)添加物 C (250x)。該產(chǎn)品可有效構建人胃癌類器官。

概述:MCE 人胃癌類器官培養(yǎng)試劑盒包含胃癌類器官基礎培養(yǎng)基 A 以及胃癌類器官培養(yǎng)添加物 B (50x) 和胃癌類器官培養(yǎng)添加物 C (250x),可用于有效構建人胃癌類器官。胃癌類器官能夠高度模擬胃癌的腫瘤微環(huán)境,便于觀察胃癌細胞的生長和增殖情況,可用于追蹤腫瘤細胞在藥物作用下的變化,篩選藥物的效力與毒性。

描述:

•   MCE人胃癌類器官試劑盒含有胃癌類器官基礎培養(yǎng)基A、胃癌類器官添加物B(50x)、胃癌類器官添加物C(250x),本產(chǎn)品可用于高效構建人胃癌類器官。

•   胃癌類器官可高度模擬胃癌腫瘤微環(huán)境,便于觀察胃癌細胞的生長增殖情況,可用于追蹤腫瘤細胞在藥物作用下的變化,篩選藥物的療效和毒性。


操作說明:1. 配制胃癌類器官培養(yǎng)基按下列組分配制胃癌類器官培養(yǎng)基,充分混勻后置于冰上備用2. 提取腫瘤細胞a. 使用預冷的原代組織儲存液浸泡新鮮提取的腫瘤組織,并置于 4°C 冰箱中暫時保存。b. 在保證無菌條件下,推薦使用含有 500 μg/mL BSA 的胃癌類器官基礎培養(yǎng)基 A 或者 PBS 沖洗以去除脂肪或肌肉等非上皮組織成分。然后在細胞培養(yǎng)皿中用無菌剪刀將沖洗后的腫瘤組織分成盡可能小的碎片(直徑約為 1-2 mm),隨后使用 1 mL 移液槍槍頭將其轉移至 15 mL 錐形管中。c. 向 15 mL 錐形管中加入適量腫瘤組織消化液和組織碎片,消化液體積不超過錐形管體積的三分之二。將錐形管置于水平搖床上以 37°C 孵育大約 0.5 小時,直至大部分碎片可以被 1 mL 移液槍槍頭吸起。d. 往腫瘤組織消化混合液中加入適量 FBS,F(xiàn)BS 終濃度為 2%,然后使用 100 μm 的細胞過濾器在冰上進行過濾。e. 使用低溫離心機在 4°C 溫度下以 250 g 離心 3 分鐘后收集細胞沉淀。如細胞沉淀呈紅色,可吸出上清液后加入 1-2 mL 的紅細胞裂解液重懸,盡量避免移液槍槍頭接觸到試管底。室溫下裂解 1 分鐘后重新置于 4°C 低溫離心機內(nèi)以 250 g 離心 3 分鐘收集細胞沉淀。f. 往收集的細胞沉淀中加入適量的胃癌類器官基礎培養(yǎng)基 A 進行重懸,然后置于 4°C 低溫離心機內(nèi)以 250 g 離心 3 分鐘收集細胞沉淀,重復該步驟 1-2 次。3. 構建類器官a. 在冰上將收集的腫瘤細胞重懸于 MCE 基質膠中,推薦細胞密度為 4x104/100 μL 基質膠,建議使用基質膠原液重懸腫瘤細胞,如需稀釋,請確?;|膠體積與稀釋所用的類器官培養(yǎng)基體積的比例高于 2:1。b. 使用預先濕潤的 200 μL 移液槍槍頭,然后將基質膠與細胞混懸液迅速注入 24 孔細胞培養(yǎng)板的底部,盡量避免產(chǎn)生氣泡,每孔注入 25-35 μL 混懸液。隨后將細胞培養(yǎng)板放入 37°C,5% CO2 的培養(yǎng)箱中孵育 15-25 分鐘直至凝固。c. 待基質膠凝固后,在每個孔邊緣緩慢注入 500 μL 胃癌類器官培養(yǎng)基,避免破壞已有的凝膠結構。然后將細胞培養(yǎng)板放回 37°C,5% CO2 的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。d. 密切關注類器官生長狀態(tài),每隔 3-4 天更換 500 μL 在 37°C 預熱后的胃癌類器官培養(yǎng)基體積。7-10 天即可觀察到胃癌類器官的生成。 

注意事項:1. 提取原代組織細胞時需保持全程無菌,避免造成后續(xù)實驗污染。2. 類器官傳代消化時需時刻觀察碎片狀態(tài),出現(xiàn)小細胞團(10-50 個細胞)時應終止消化,避免時間過長影響類器官后續(xù)生長活力。3. 基質膠操作需全程保持低溫避免凝膠,與細胞重懸后應將其迅速注入細胞培養(yǎng)孔內(nèi),盡量避免產(chǎn)生氣泡。4. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

銷售產(chǎn)品:Benzetimide (hydrochloride)  | Ranirestat  | CGP77675  | 9-Phenanthrol  | DBCO-PEG4-triethoxysilane  | Roxithromycin-d7  | Physostigmine (hemisulfate)  | Sutimlimab  | Tusamitamab  | Cobimetinib (R-enantiomer)

Trending products:Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Dye Reagents  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds


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