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G418 選擇性抗生素?zé)o菌溶液 | G418 Selective Antibiotic, Sterile | MCE

閱讀:200      發(fā)布時(shí)間:2024-9-10
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G418 選擇性抗生素?zé)o菌溶液

MCE 國(guó)際站:G418 Selective Antibiotic, Sterile

品牌:MedChemExpress (MCE)

存儲(chǔ)條件: -20°C 保存 2 年

簡(jiǎn)介:MCE G418 Selective Antibiotic, Sterile 是一種氨基糖苷類抗生素,主要通過(guò)影響 80S 核糖體的功能來(lái)干擾蛋白質(zhì)的合成,對(duì)細(xì)菌、酵母、高等植物、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等均有毒性。

概述:MCE G418 選擇性抗生素,滅菌(G418 Selective Antibiotic, sterile)是已過(guò)濾除菌,可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)的溶液。G418 選擇性抗生素是一種氨基糖苷類抗生素,主要通過(guò)影響 80S 核糖體的功能來(lái)干擾蛋白質(zhì)的合成,對(duì)細(xì)菌、酵母、高等植物、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等均有毒性。G418 抗性基因(neo gene)位于轉(zhuǎn)座子 Tn5 或 Tn601 (903)。在 Tn5 上成為氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶 3 (II) 或 APH (3) II,而在 Tn601 上則成為氨基糖苷激酶 3 (I) 或APH (3) I。這些基因來(lái)源于細(xì)菌,但也可以在真核細(xì)胞中表達(dá)。將任一抗性基因?qū)爰?xì)胞可使細(xì)胞獲得 G-418 抗性,從而用來(lái)篩選和維持培養(yǎng)攜帶抗性基因的原核或者真核細(xì)胞。

描述:

G418 選擇性抗生素是由紅花小單孢菌產(chǎn)生的氨基糖苷類抗生素。它通過(guò)與細(xì)菌核糖體的 80S 亞基結(jié)合而起作用,從而抑制原核和真核細(xì)胞中的蛋白質(zhì)合成。

對(duì) G418 選擇性抗生素的抗性是由大腸桿菌 APH (3) I 和 APH (3) II 抗性基因賦予的。該基因在 Tn5 上變?yōu)?APH (3) II,在 Tn601 上變?yōu)?APH (3) I。因此,G-418 選擇性抗生素可用于選擇和維持?jǐn)y帶 G418 抗性基因的原核或真核細(xì)胞。


操作說(shuō)明:1. G418 選擇性抗生素溶液的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型、培養(yǎng)基、生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而適當(dāng)調(diào)整。2. 對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve)來(lái)確定最佳篩選濃度:1)以 20-25% 的細(xì)胞密度鋪板,鋪?zhàn)銐蛄康目滓赃M(jìn)行后續(xù)的梯度實(shí)驗(yàn),37℃ 培養(yǎng)過(guò)夜。2)準(zhǔn)備含梯度濃度 G418 選擇性抗生素的新鮮培養(yǎng)基為篩選培養(yǎng)基,至少 5 個(gè)梯度。以哺乳動(dòng)物為例,常用濃度為 50-1000 μg/mL,可設(shè)定 0、50、100、200、400、800、1000 μg/mL。3)細(xì)胞過(guò)夜培養(yǎng)后,使用上述配制的篩選培養(yǎng)基替換舊培養(yǎng)基,孵育細(xì)胞。每個(gè)濃度做 3 個(gè)平行對(duì)照。4)約 2-3 天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基。5)每日監(jiān)測(cè)細(xì)胞,觀察活細(xì)胞比例。通常 7-10 天內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的低濃度為篩選用的工作濃度

注意事項(xiàng):1. 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),以免效價(jià)降低。2. 注意無(wú)菌操作,避免污染。3. 本產(chǎn)品的工作濃度是針對(duì)含血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基而設(shè)定的,在無(wú)血清培養(yǎng)基中使用時(shí)應(yīng)適當(dāng)減少用量,以免造成細(xì)胞毒性。4. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療。5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

銷售產(chǎn)品:CD1530  | GW 441756  | Nelarabine  | Nitro blue tetrazolium chloride  | Oseltamivir  | Dracorhodin perchlorate  | Fluvastatin (sodium)  | Istaroxime (hydrochloride)  | Methylprednisolone succinate  | Canagliflozin (hemihydrate)

Trending products:Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Dye Reagents  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds


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