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羅丹明標(biāo)記鬼筆環(huán)肽

MCE 國際站：Rhodamine Phalloidin

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲條件： -20℃ 6 個月避光保存，避免反復(fù)凍融

簡介：羅丹明標(biāo)記鬼筆環(huán)肽是一種高親和的 F-肌動蛋白探針，與橙色染料四甲基羅丹明 (TRITC) 偶聯(lián)。

概述：鬼筆環(huán)肽 (Phalloidin) 是從鬼筆鵝膏中分離到的一種環(huán)狀七肽毒素，以較好的親和力和特異性結(jié)合肌動蛋白絲 F-actins (actin filaments)。通常將鬼筆環(huán)肽與熒光染料偶聯(lián)來研究細(xì)胞中 F-actins 的分布。熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽極少會非特異性染色，染色和未染色區(qū)域之間的對比度非常大，可使 F-actins 高效染色。MCE 提供 3 種熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽 (1000× Stock Solution in DMSO)，AMCA Phalloidin (HY-K0901，藍(lán)色熒光)、Fluorescein Phalloidin (HY-K0902，綠色熒光)和 Rhodamine Phalloidin (HY-K0903，橙色熒光)。這些鬼筆環(huán)肽衍生物可發(fā)出穩(wěn)定、高亮度的熒光，染色反應(yīng)特異性強，對比性高，適用于 F-actins 的定性和定量檢測實驗。

描述：

鬼筆環(huán)肽是一種蘑菇衍生的毒素，可用于特異性標(biāo)記細(xì)胞骨架的 F- 肌動蛋白（肌動蛋白絲）。它與許多不同動物和植物物種的所有肌動蛋白絲變體結(jié)合。通常，鬼筆環(huán)肽與熒光染料結(jié)合使用。鬼筆環(huán)肽以高選擇性結(jié)合 F- 肌動蛋白，而羅丹明提供穩(wěn)定而明亮的橙色熒光。

羅丹明鬼筆環(huán)肽是 DMSO 中的 1000× 儲備溶液，可方便地標(biāo)記、鑒定和定量甲醛固定和透化組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞實驗中的 F- 肌動蛋白。

操作說明：1. 準(zhǔn)備 1× 熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液吸取 1 μL 1000× 熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽儲存液到 1 mL 含有 1% BSA 的 PBS 緩沖液中即可得到 1× 工作液。注 1：不同細(xì)胞染色情況不同，相應(yīng)熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽的使用量需根據(jù)不同情況調(diào)整。注 2：1% BSA 的使用是為了降低非特異性的背景染色。2. 細(xì)胞染色步驟1) 用 PBS 清洗細(xì)胞 2-3 次。2) 用含有 3.7％ 甲醛的 PBS 溶液固定細(xì)胞，冰上固定 15 分鐘。注：甲醇可以在固定過程中破壞肌動蛋白。因此最好避免含有任何甲醇的固定劑。優(yōu)選的固定劑是不含甲醇的甲醛。3) 用 PBS 清洗細(xì)胞 2-3 次。4) 可選步驟：室溫下，用含 0.1％ Triton X-100 的 PBS 溶液透化細(xì)胞 3-5 分鐘，增加其通透性。用 PBS 清洗細(xì)胞 2-3 次。5) 按 100 μL/孔 (96 孔板)的加入量加入 1× 熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液，室溫避光染色 20-90 分鐘。6) 用 PBS 清洗細(xì)胞 2-3 次，去除多余的熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽。7) 按每種熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽的最佳推薦激發(fā)/發(fā)射波長，于熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進(jìn)行熒光觀察 (AMCA Phalloidin, Ex/Em=344/432 nm；Fluorescein Phalloidin, Ex/Em= 497/516nm； Rhodamine Phalloidin, Ex/Em= 552/578 nm)

注意事項：1. 熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽的一個單位 (T) 的定義：按照推薦濃度，每次用量為 100 μL 染色工作液時，可以檢測的次數(shù)。2. 鬼筆環(huán)肽具有一定毒性 (LD50 of phalloidin = 2 mg/kg)，為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。3. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品

銷售產(chǎn)品：Nourseothricin (sulfate)  | NE 52-QQ57  | DIM-C-pPhCO2Me  | Bazedoxifene  | BQ-788 (sodium salt)  | Chelerythrine (chloride)  | L-Palmitoylcarnitine (chloride)  | Bax inhibitor peptide V5  | Mavacamten  | Prednisone

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