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反轉(zhuǎn)錄試劑盒(三代酶,獨立引物)
  • 反轉(zhuǎn)錄試劑盒(三代酶,獨立引物)

貨物所在地:北京北京市

更新時間:2025-04-17 21:00:08

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RTase III Primer Flexible All-in-One Mix是一款高效、便減少污染的高質(zhì)量一鏈cDNA合成預(yù)混液, 包含M-MLV GIII Reverse Transcriptase及其反應(yīng) Buffer、RNA 酶抑制劑、dNTPs等一鏈 cDNA 合成所需的多種組分,還需加入RNA 模板、引物和水即可開始反應(yīng),操作非常方便。針對不同實驗設(shè)計可靈活使用不同類型的逆轉(zhuǎn)錄引物。

反轉(zhuǎn)錄試劑盒(Primer Flexible)



產(chǎn)品貨號:F0202O

存儲條件:-20°C

產(chǎn)品組分

組分

規(guī)格

RTase III Primer Flexible All-in-One Mix

400 μl

Oligo(dT)20VN (50 μM)

100 μl

Random hexamers (50 μM)

100 μl

Nuclease-Free Water

2×1 ml

產(chǎn)品簡介

RTase III Primer Flexible All-in-One Mix是一款高效、便減少污染的高質(zhì)量一鏈cDNA合成預(yù)混液, 包含M-MLV GIII Reverse Transcriptase及其反應(yīng) Buffer、RNA 酶抑制劑、dNTPs等一鏈 cDNA 合成所需的多種組分,還需加入RNA 模板、引物和水即可開始反應(yīng),操作非常方便。針對不同實驗設(shè)計可靈活使用不同類型的逆轉(zhuǎn)錄引物,滿足多樣化的實驗需求,可根據(jù)不同實驗場景選擇Oligo(dT)20VN 或Random hexamers 或 Gene Specific Primers。使用該逆轉(zhuǎn)錄預(yù)混液 15 分鐘內(nèi)最長可獲得12 kb大小的cDNA。

使用方法

1.于冰上配制如下反應(yīng)體系:

試劑

使用量

模板 RNAa

50 ng~1 μg

RTase III Primer Flexible All-in-One Mix

4 μl

Oligo(dT)20VN (50 μM)

1 μl

或 Random hexamers (50 μM)

1 μl

或 Gene Speci?c Primers (50 μM)

0.1 μl

Nuclease-Free Water

To 20 μl

a.推薦使用試劑盒提取的已去除基因組 DNA 污染的高質(zhì)量 RNA 作為模板。


2.輕柔吸打混勻,瞬離;

3.55℃溫育 15 min;

注:若目標(biāo) RNA 不含 Poly(A) 結(jié)構(gòu),可預(yù)先 25℃溫育 10 min。

4.反應(yīng)結(jié)束后,85℃溫育 5 min 以終止反應(yīng);

5.將獲得的cDNA 溶液置于冰上,用于后續(xù)實驗;或立即保存于 -20℃。

注:

1.后續(xù)實驗為克隆實驗,若RNA 來源于真核生物,只需使用 Oligo (dT) VN 即可, 加入 Random hexamers 會降低全長 cDNA 的產(chǎn)量;若 RNA 來源于原核生物,只需使用 Random hexamers 或 Gene Speci?c Primers。

2.后續(xù)實驗為qPCR,請同時加入Oligo(dT) VN和Random hexamers以獲得mRNA不同位置逆轉(zhuǎn)錄效率均一的cDNA。

注意事項

為了防止 RNase 污染,請保持實驗區(qū)域潔凈;操作時需穿戴干凈的手套、口罩;實驗所用的離心管、槍頭等耗材均需保證 RNasefree。


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