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原代細(xì)胞的培養(yǎng)及應(yīng)用了解下呢

時間:2022-5-11 閱讀:642
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原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進行培養(yǎng)。因此,較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì),如果是正常細(xì)胞,仍然保留二倍體數(shù)。但實際上,通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。
常用的原代細(xì)胞的培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細(xì)胞培養(yǎng)。
組織塊培養(yǎng)是將剪碎的組織塊直接移植在培養(yǎng)瓶壁上,加入培養(yǎng)基后進行培養(yǎng)。
分散細(xì)胞培養(yǎng)大致步驟為:
將動物組織從機體中取出離散成單個細(xì)胞(常用胰蛋白酶),置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖(注意整個過程無菌)。
原代細(xì)胞的基因表達分析能使研究者更好的理解生物學(xué)通路和疾病進程,如細(xì)胞周期規(guī)律,干細(xì)胞生物學(xué),癌癥發(fā)展和神經(jīng)紊亂等。原代細(xì)胞成為追求突破和更好療法的有力工具。
雖然原代細(xì)胞有諸多優(yōu)點,但獲得高純度的原代細(xì)胞是一個艱巨的過程。比起細(xì)胞系,原代細(xì)胞可謂是極其敏感,需要額外添加經(jīng)典培養(yǎng)基所沒有的營養(yǎng)。原代細(xì)胞要在專為每種細(xì)胞定制的特殊培養(yǎng)液中存活和生長。例如內(nèi)皮細(xì)胞與上皮細(xì)胞或神經(jīng)元的營養(yǎng)需求就大為不同,因此需要不同的特殊培養(yǎng)基。
優(yōu)點
(1) 細(xì)胞剛離開機體,生物學(xué)性狀與原體內(nèi)細(xì)胞比較接近,相比之下,細(xì)胞系的一個缺點是它們往往與原始的組織有不一樣的遺傳和表型,而原代細(xì)胞保持了細(xì)胞在體內(nèi)的許多重要標(biāo)志和功能。
(2) 細(xì)胞的初代培養(yǎng)也是建立各種細(xì)胞株(系)的必經(jīng)階段。
應(yīng)用:
1、為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段;
2、為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件;
3、服務(wù)于臨床實踐,用于藥物篩選等。 

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