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一、Dr.Oligo氨解儀產品特點
反應器容量:5.6升容量;
樣品數量:1至5個,每個樣品有96位;
溫度范圍:120°C;
保修:12個月;
電源:220 V至240 V/50/60 Hz;
功耗:700瓦;
重量:30公斤;
二、產品可定制
Biolytic中國公司提供多種用于寡核苷酸/DNA合成和寡核苷酸純化的儀器和配件。Dr. Oligo系列DNA合成儀、Oligo處理器和Dr.Oligo氨解儀是在美國設計和制造的,滿足任何實驗室、科研院所或企業(yè)嚴謹的要求。我們所有的儀器和配件均采用最新的材料和技術,以提高操作效率和降低成本。每臺儀器出廠前都經過嚴格的質量控制程序。我們以提供優(yōu)質的客戶服務和支持為榮,并致力于提供行業(yè)內安裝和培訓。所有儀器和配件都可以根據您的需求來定制。
三、產品優(yōu)勢
DNA合成氨氣氨解儀是為有效制備生物樣品而設計的,用于PCR引物、探針和組分生產,DNA測序、DNA和RNA合成、隨機啟動、載體設計、DNA指紋和人工基因合成。是DNA/RNA/寡核苷酸脫保護基快捷高效穩(wěn)定的解決方案。
四、和傳統的氨解對比如下
采用Oligo高壓氨解儀,一次性可以氨解480個樣品并直接得到干燥的樣品,氨解時間也大大縮短。
傳統的氨解步驟如下,費時費力.
1)氨解前的準備
1. 檢查純化所需材料及試劑是否充足。、
2. 活化C18板(柱) 向C18板加滿0.5M NaCl,抽干,重復平衡3次,再加滿分析純,抽干5次以上,后以洗脫速度離心。洗脫后再向C18板內加滿0.5M NaCl,抽干,重復3次,完畢再向C18板內加滿0.5M NaCl以待用。C18柱活化,首先用20ml分析純活化C18一次,吹干甲醇,然后用10ml NaCl平衡1次以待用。
3.制板灌膠 計算好預用分析板及電泳板數量以灌膠。膠液制作,每塊板需50ml左右的16%的膠(短鏈,16%;長鏈,12%),每塊板平均加入過硫酸銨100ul,TEMED 30ul(依情況而定,可適量增減),搖晃,混勻,倒入板中,水平放置,使膠凝固。注意板中不能有氣泡,并注意補膠。
注意事項:
①所用C18板需定期進行維護與檢測。
②每一瓶新制膠使用之前需對膠跑Marker以保能正常使用。
2) 氨解
原理:切割—將合成好的寡核苷酸鏈從支持物上化學切割下來。用冰氨水來裂解CPG
連接化合物與初始核苷間的酯鍵。斷裂下來的寡核苷酸帶有自由的3‘羥基。
脫保護基—用冰氨水處理較長時間以脫掉堿基環(huán)上的氰乙基、苯甲酰基、異丙基等保護基團。
1. 單管氨解
① 將合成好的柱子用注射器針頭將CPG或樹脂粉末全部倒入氨解瓶中,并將對應的標簽貼在氨解瓶上。
② 加入冰三乙胺100ul,冰氨水1.5ml,蓋緊瓶蓋,放入80度烘箱氨解2小時。對用快速氨解單體合成的序列直接加氨水后55度2小時即可。在生產操作表上準確記錄開始氨解的時間。
注意事項:①在將引物放入氨解瓶時,要核對清楚標簽,要一一對應。
②三乙胺與氨水順序要防止加反。(加反后會出現分層現象)。
③氨解中使用的氨水必須是冰凍狀態(tài)中的氨水。
2. 96孔板氨解
90度氨解40min后取出,放入通風櫥趕氨1min,高速離心。拿去合成板用20ul小槍取小樣20ul;在向氨解板每孔內加入冰氨水200ul,封好膠帶,用夾板夾好,登記好時間,放入80度烘箱氨解2h。
注意事項:
①務必在氨解板正面貼上該輪次標簽,然后再位置一一對應墊再合成板下面,一起氨解,離心。
②三乙胺與氨水順序要防止加反。(加反后會出現分層現象)。
③氨解中使用的氨水必須是冰凍狀態(tài)中的氨水。
④夾板密封時要注意擰緊,防止出現漏氨。
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