96道基因合成儀的正確操作方式包括準(zhǔn)備工作、輸入序列、選擇合成方法等。要確保操作順利進(jìn)行,并最終獲得高質(zhì)量的產(chǎn)物,每一步都至關(guān)重要。下面是具體的操作步驟和注意事項:
1.準(zhǔn)備工作
檢查試劑瓶:在開始操作前,仔細(xì)檢查所有試劑瓶中的量,特別是乙腈,因為它的用量較大,必要時需更換新的試劑瓶。
安裝收集瓶:準(zhǔn)備一個清潔的收集瓶,標(biāo)記好并安裝在合成儀上,以確保合成后的產(chǎn)物能夠被正確收集。
2.輸入序列
輸入DNA序列:將要合成的DNA序列輸入到儀器中,確保選擇的步驟和序列正確,避免后期出現(xiàn)錯誤。
選擇合成方法
結(jié)束方法選擇:根據(jù)實驗需求選擇合適的結(jié)束方法。如果計劃以5'-DMT連接并純化寡核苷酸,將儀器狀態(tài)調(diào)整為TritylOnAuto;否則保持默認(rèn)狀態(tài)(TritylOffAuto)。
3.管理與標(biāo)記
保存名稱輸入:在柱監(jiān)視器的Username下輸入你希望的保存名稱,便于后續(xù)管理和數(shù)據(jù)整理。
標(biāo)記收集瓶:使用代碼標(biāo)記每個收集瓶,對應(yīng)相應(yīng)的DNA序列,確保在多個樣品同時合成時不會混淆。
4.96道基因合成儀設(shè)備與流程確認(rèn)
打印設(shè)置信息:打印出每個柱的詳細(xì)設(shè)置,再次確認(rèn)無誤,確保所有參數(shù)和步驟按照預(yù)期進(jìn)行。
檢查合成柱位置:運行StartColumn步驟,確認(rèn)合成柱處于正確的位置,確保反應(yīng)能順利進(jìn)行。
5.廢液與排氣管理
檢查廢液瓶:確保連接的溶劑殘留廢液瓶充滿,并正確連接到合成儀上,防止廢液溢出或氣體回流。
處理分部收集器:如果使用分部收集器收集每個DMT脫保護(hù)步驟的流出物,確保試管清潔并打開,使DMT廢液能正確流入收集器。
6.啟動循環(huán)
清洗試劑管路:啟動循環(huán)前先運行開始程序,清洗試劑管路,除去原來的試劑,確保反應(yīng)體系中無雜質(zhì)干擾。
7.監(jiān)控與維護(hù)
實時監(jiān)控:在合成過程中實時監(jiān)控設(shè)備的運行狀態(tài),及時處理任何異常情況,確保合成過程順利進(jìn)行。
定期維護(hù):定期對設(shè)備進(jìn)行必要的維護(hù),如更換磨損部件、清理反應(yīng)體系等,確保設(shè)備的穩(wěn)定性和延長使用壽命。
