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PCR擴(kuò)增儀如何驗(yàn)證

1971年，Dr. Kjell Kleppe在Journal of molecular biology期刊發(fā)表的文章中準(zhǔn)確、客觀地闡述了PCR方法。

1985年，美國PE-Cetus公司的Kary Mullis等人發(fā)明PCR技術(shù)。它推動(dòng)了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)由細(xì)胞水平向分子水平、基因水平發(fā)展，是DNA測序的基礎(chǔ)，它成為現(xiàn)代分子生物學(xué)發(fā)展過程中的一座里程碑。Mullis等也因此獲得了1993年的諾貝爾獎(jiǎng)。

1：什么是PCR擴(kuò)增儀呢？

PCR擴(kuò)增儀又稱為PCR基因擴(kuò)增儀、PCR核酸擴(kuò)增儀、聚合酶鏈反應(yīng)核酸擴(kuò)增儀，是利用PCR(Polymerase chain reaction，聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)對特定DNA擴(kuò)增的一種儀器設(shè)備，被廣泛運(yùn)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中，例如用于判斷檢體中是否會(huì)表現(xiàn)某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復(fù)制以及親子鑒定等。

2：PCR擴(kuò)增儀的工作原理是什么呢？

PCR技術(shù)的原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物，由變性-退火-延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。

3：PCR擴(kuò)增儀為什么要做驗(yàn)證呢？

一般來講升降溫速度越快，實(shí)驗(yàn)需要的時(shí)間越少，時(shí)間越少意味著在中間溫度可能產(chǎn)生的非特異擴(kuò)增越少，并且通常升降溫速也反應(yīng)了設(shè)備控溫能力的好壞，一個(gè)穩(wěn)定的溫度循環(huán)是成功實(shí)現(xiàn)PCR所必需的。其中溫度控制的動(dòng)、穩(wěn)態(tài)特性是影響PCR擴(kuò)增結(jié)果正確與否的重要因素之一, 這包括溫度準(zhǔn)確性、升降溫速度、溫場均勻性、max超調(diào)溫度，需要驗(yàn)證后方能繼續(xù)使用。

4：PCR擴(kuò)增儀驗(yàn)證項(xiàng)目如下

4.1 安裝確認(rèn)

4.2 運(yùn)行功能確認(rèn)

4.3 溫度示值誤差測試

4.4 溫度均勻度測試

4.5 溫度最大過沖測試

4.6 平均升降溫速率測試

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