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維生素E測試盒
  • 維生素E測試盒
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更新時間:2024-05-08 17:24:14瀏覽次數(shù):446評價

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維生素E測試盒 維生素E(Vitamin E,VE)試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品.為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。

維生素E測試盒

微量法100T/48S

測定意義

維生素E(Vitamin E)是一種脂溶性維生素,其水解產(chǎn)物為生育酚,是生物體中最主要的抗氧化劑之一,能阻止不飽和脂肪酸收到過氧化作用的損傷,維持不飽和脂肪酸細胞膜的完整性和正常功能,具有延緩衰老、預(yù)防溶血性貧血作用,在醫(yī)藥、化妝品、保健品、食品行業(yè)具有較高的應(yīng)用價值。

測定原理

VE還原Fe3+為Fe2+,F(xiàn)e2+與1,10-菲羅啉產(chǎn)生有色絡(luò)合物,在530nm有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、漩渦震蕩儀。

試劑組成和配制

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體2mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體2mL×1支,4℃保存。

試劑三:液體2mL×1支,4℃保存。

試劑四:液體6mL×1瓶,4℃保存。

樣本處理

  1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,勻漿后用提取液定至1mL,定至在漩渦混勻儀上震蕩5min,于25℃,5000g離心10min,取上層測定。

  2. 細胞:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min)后在漩渦混勻儀上震蕩5min,于25℃,5000g離心10min,取上層測定。

  3. 血清:取0.1mL,加0.9mL提取液,漩渦儀混勻上震蕩5min,于25℃,5000g離心10min,取上層測定。

測定操作


對照管

測定管

樣品(μL)

100

100

試劑一(μL)

20

20

試劑二(μL)


20

試劑三(μL)

20


充分混勻,25℃反應(yīng)5min

試劑四(μL)

60

60

充分混勻,于微量石英比色皿/96孔板,無水乙醇調(diào)零,測定530nm處吸光值,記為A對照管和A測定管,△A=A測定管-A對照管。

計算公式

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.22x + 0.0065 R2 = 0.9978

1. 按照蛋白含量計算

VE含量(μg/mg prot)=(△A -0.0065)÷ 0.22×V反總÷(V樣×Cpr)

= 9.09×(△A -0.0065)÷ Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計算

VE含量(μg/g)= (△A -0.0065)÷ 0.22×V反總÷(V樣×W÷V樣總)

= 9.09×(△A -0.0065)÷ W

3. 按照細胞數(shù)量計算

VE含量(μg/104 cell)=(△A -0.0065)÷ 0.22×V反總÷(V樣×細胞數(shù)量÷V樣總)

= 9.09×(△A -0.0065)÷ 細胞數(shù)量

4. 按照液體體積計算

VE含量(μg/mL)=(△A -0.0065)÷ 0.22×V反總÷V樣×10

= 90.9×(△A -0.0065)

V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:加入樣本體積,0.1mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g

  1. 用96孔板測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.11x + 0.0065 R2 = 0.9978

1. 按照蛋白含量計算

VE含量(μg/mg prot)=(△A -0.0065)÷ 0.11×V反總÷(V樣×Cpr)

= 18.18×(△A -0.0065)÷ Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計算

VE含量(μg/g)= (△A -0.0065)÷0.11×V反總÷(V樣×W÷V樣總)

= 18.18×(△A -0.0065)÷ W

3. 按照細胞數(shù)量計算

VE含量(μg/104 cell)=(△A -0.0065)÷ 0.11×V反總÷(V樣×細胞數(shù)量÷V樣總)

= 18.18×(△A -0.0065)÷ 細胞數(shù)量

4. 按照液體體積計算

VE含量(μg/mL)=(△A -0.0065)÷0.11×V反總÷V樣×10

= 181.8×(△A -0.0065)

V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:加入樣本體積,0.1mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g

注意事項

若反應(yīng)體系產(chǎn)生沉淀,需要將樣品進行適當(dāng)?shù)南♂?,并在計算公式中乘以稀釋倍?shù)。


上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

  2. 國外試劑的訂購。可提供歐美實驗室品牌的采購方案。

  3. 提供加急物流處理,進口貨物,最快交期1-2周。

  4. 進出口貨物代理服務(wù)。

  5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 質(zhì)量保證,所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務(wù)模式,為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國際與國內(nèi)資源,加強網(wǎng)絡(luò)建設(shè),提高公司內(nèi)部運作效率,為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價格。

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