目錄:上海牧榮生物科技有限公司>>實(shí)驗(yàn)試劑>>試劑盒>> 鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶（OAT）測試盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
|---|
鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶（OAT）測試盒
微量法100T/96S
注意：正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義
脯氨酸是植物體內(nèi)適應(yīng)逆境脅迫的一種重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。高等植物中脯氨酸代謝因其初始底物不同，分為谷氨酸( Glu) 和鳥氨酸( Orn) 兩條合成途徑。鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶( δ-OAT) 是 是以鳥氨酸為前體合成脯氨酸途徑的關(guān)鍵酶，對植物適應(yīng)逆境脅迫起關(guān)鍵作用。
測定原理
鳥氨酸和α-酮戊二酸在鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶和NADH作用下發(fā)生氨基轉(zhuǎn)移反應(yīng)生成吡咯啉-5-羧酸（P5C），同時(shí)產(chǎn)生NAD，通過檢測340nm處的吸光度的變化可反映出鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性的高低。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、研缽、酶標(biāo)儀、96孔板。
試劑組成和配制
提取液：液體110mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體30 mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加8mL試劑一充分溶解；用不完的試劑4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加8mL試劑一充分溶解；用不完的試劑4℃保存。
試劑四：粉劑×2瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加4mL試劑一充分溶解；現(xiàn)配現(xiàn)用。
酶液提取
組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清置冰上待測。
細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后4℃，10000g離心10min，取上清置冰上待測。
液體：直接檢測。
測定操作
酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長至340nm。
將配好的試劑二、三、四37℃預(yù)熱5min。（注意：粉劑試劑需要自行配制）
取96孔板，依次加入60μL試劑二，60μL試劑三，60μL試劑四，20μL粗酶液，充分混勻，記錄340nm處初始吸光值和37℃反應(yīng)10min的吸光值A(chǔ)2，△A=A1-A2。
計(jì)算公式
用96孔板測定的計(jì)算公式如下
（1）按照樣本蛋白濃度計(jì)算
酶活單位定義：每毫克組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。
δ-OAT（nmol/min /mg prot）=ΔA÷（ε×d）×V反總÷(V樣×Cpr) ÷T
=321.54×ΔA÷Cpr
（2）按照樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活單位定義：每克組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。
δ-OAT（nmol/min /g 鮮重）=ΔA÷（ε×d）×V反總÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T
=321.54×ΔA÷W
（3）按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
酶活單位定義：每104個(gè)細(xì)胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。
δ-OAT（nmol/min /104 cell）= ΔA÷（ε×d）×V反總÷(V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總) ÷T
=321.54×ΔA÷細(xì)胞數(shù)量
（4）按照液體體積計(jì)算
酶活單位定義：每毫升液體每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。
δ-OAT（nmol/min /mL）＝ΔA÷（ε×d）×V反總÷V樣÷T
=321.54×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，0.2mL；ε：NADH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：96孔板光徑，0.5cm；V樣：加入樣本體積，0.02mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間，10 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g
上海牧榮生物科技有限公司
國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。
國外試劑的訂購?？商峁W美實(shí)驗(yàn)室品牌的采購方案。
提供加急物流處理，進(jìn)口貨物，最快交期1-2周。
進(jìn)出口貨物代理服務(wù)。
公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。
質(zhì)量保證，所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅(jiān)持“一站式"服務(wù)模式，為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國際與國內(nèi)資源，加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)建設(shè)，提高公司內(nèi)部運(yùn)作效率，為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。
公司突出創(chuàng)新思維，提高工作效能，減低運(yùn)作成本，為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。
鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶（OAT）測試盒
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
5
化工儀器網(wǎng)