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大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒實驗使用說明

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  以下是關(guān)于大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南:

  BS-3471 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法:用純化的大鼠sLR抗體包被微孔板形成固相抗體,依次加入樣本、HRP標(biāo)記的抗體,形成復(fù)合物后通過TMB顯色,顏色深度與樣本中sLR濃度正相關(guān)。

  二、試劑盒組成

  預(yù)包被微孔板?:含固相抗體

  標(biāo)準(zhǔn)品?:濃度梯度通常為80、40、20、10、5、2.5 U/L

  檢測抗體?:HRP標(biāo)記的sLR抗體

  顯色底物?:TMB溶液

  終止液?:酸性溶液(如2M H?SO?)

  洗滌緩沖液?:PBS或TBS配方

  三、樣本處理要求

  樣本類型?:血清、血漿(肝素/EDTA抗凝)、組織勻漿液

  采集注意事項?:

  避免溶血,室溫血液凝固10-20分鐘后離心(2000-3000 rpm,20分鐘)

  長期保存需-20°C分裝,避免反復(fù)凍融

  稀釋建議?:通常按1:5~1:20稀釋,高濃度樣本需進(jìn)一步稀釋

  四、實驗步驟

  加樣?:

  每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,設(shè)雙復(fù)孔

  孵育?:37°C溫育1小時,洗滌3次

  酶標(biāo)抗體結(jié)合?:加入HRP標(biāo)記抗體,37°C孵育30分鐘

  顯色?:加入TMB底物避光反應(yīng)15分鐘

  終止與檢測?:加終止液后15分鐘內(nèi)測450nm OD值

  五、注意事項

  質(zhì)量控制?:

  每板需設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)曲線孔和質(zhì)控樣本

  標(biāo)準(zhǔn)曲線R2應(yīng)≥0.99

  操作規(guī)范?:

  避免底物接觸金屬器械,終止液有腐蝕性需防護(hù)

  開封后未用完板條需密封干燥保存

  數(shù)據(jù)計算?:

  以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,用四參數(shù)擬合計算樣本濃度

  六、技術(shù)參數(shù)

  檢測范圍?:通常2.5-80 U/L

  靈敏度?:<1.0 U/L(不同品牌可能有差異)

  批內(nèi)/批間差?:CV<10%

  如需具體品牌(如天津本生、天正信達(dá)生物等)的差異說明,可進(jìn)一步提供補充信息。

  天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。

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