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科研試驗(yàn)時(shí)的蛋白酶K樣本處理
動(dòng)物內(nèi)臟、肌肉組織、血液以及培養(yǎng)的細(xì)胞和細(xì)菌等樣本在裂解液和蛋白酶K的作用下破碎并可使大部分蛋白質(zhì)變性，釋放出基因組DNA。在其所提供的合適的鹽離子和pH環(huán)境的作用下，與乙醇混合后，基因組DNA特異性地結(jié)合于膜上，大部分蛋白質(zhì)及其他雜質(zhì)在兩次洗滌過(guò)程中被洗下，而DNA與膜結(jié)合牢固，在洗脫液的作用下被洗下。
樣本處理：
（1）全血：
a）如果全血體積大于200μL，請(qǐng)先使用紅細(xì)胞裂解液或淋巴細(xì)胞分離液收集細(xì)胞，然后用200μL PBS緩沖液或生理鹽水充分重懸，進(jìn)行步驟2。
b）如果樣本不足200μL，可以加入適量的PBS緩沖液或者生理鹽水補(bǔ)足200μL，進(jìn)行步驟2。
c）從人血液中提取DNA的方法與從哺乳動(dòng)物血液中提取DNA的方法相同。
d）從鳥(niǎo)類(lèi)血液中提取的DNA需將不多于20μL血液樣本，加PBS緩沖液至200μL，混合后開(kāi)始提取，進(jìn)行步驟2。
（2）組織樣本：
每份組織分別從不同的三個(gè)位置稱取1g，用手術(shù)剪剪碎混勻后取約50mg置于研磨器中，加入0.5mL-1mL生理鹽水研磨，勻漿后轉(zhuǎn)入1.5mL滅菌的離心管，8000rpm離心2分鐘，取上清200μL加入1.5mL離心管，進(jìn)行步驟2。
（3）培養(yǎng)的細(xì)胞：
懸浮細(xì)胞：細(xì)胞培養(yǎng)液3000rpm離心2分鐘，去上清，收集2×106個(gè)細(xì)胞（容積200μL），轉(zhuǎn)移至1.5mL離心管，進(jìn)行步驟2。
貼壁細(xì)胞：去上清，收集2×106個(gè)細(xì)胞（容積200μL），轉(zhuǎn)移至1.5mL離心管，進(jìn)行步驟2。
（4）其他液體樣本：
1000rpm離心2分鐘 ，棄上清，收集沉淀，進(jìn)行步驟2。
（5）菌液：
培養(yǎng)的菌液，5000rpm離心1分鐘，棄上清，收集至少2×106個(gè)細(xì)菌，進(jìn)行步驟2。