聯(lián)系電話
上?，|馳儀器有限公司
中級會員·6年
- 聯(lián)系人：
- 蘇小姐
- 電話：
- 400-820-3556
- 手機：
- 18521301252
- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)環(huán)科路999弄浦東國際人才港13號樓2樓
- 網(wǎng)址：
- www.weichilab.com
掃一掃訪問手機商鋪
分子免疫陣列（single molecule array，Simoa）技術，是一種將單分子計數(shù)用于蛋白質生物標記物的檢測方法。該技術檢測限可達飛摩爾（fg/mL）數(shù)量級，是目前代表性的單分子免疫檢測技術。
圖1：Simoa分析儀構造
技術原理
Simoa技術是基于微陣列芯片的單分子免疫檢測，是在毫米級芯片上雕刻（或澆筑）成千上萬個微米級微井，每個微井體積約 40 fl 左右，隨后將免疫復合物磁珠分配于微井中，再借助高分辨率熒光顯微鏡對熒光點進行計數(shù)，依據(jù)泊松分布理論，計算同時含珠子與熒光產(chǎn)物孔的數(shù)量/含珠子孔總數(shù)的比值，以此確定測試樣品中的蛋白質濃度。
圖2：SimoA 原理圖
Simoa工作流程
SiMoA通過磁珠酶聯(lián)免疫反應與微孔陣列芯片的結合，實現(xiàn)單分子蛋白檢測。其操作流程如下：
圖3：SimoA 工作流程圖
（1）利用表面標記有捕獲抗體的磁珠捕獲樣品中的抗原；
（2）使用biotin標記的檢測抗體對被捕獲的抗原進行標記；
（3）加入鏈霉親和素—半乳糖苷酶復合物，與檢測抗體上的biotin結合；
（4）將反應洗凈后的磁珠與底物混合，加載到含有微孔陣列的檢測芯片中，利用磁場使磁珠落入與其尺寸匹配的微孔中（3μm左右），加入油相，使得微孔之間物理隔離；
（5）含有半乳糖苷酶的微孔由于酶分子催化底物產(chǎn)生熒光產(chǎn)物；
（6）對微孔陣列進行熒光成像，通過對發(fā)出熒光信號的微孔個數(shù)對照標準曲線來實現(xiàn)定量檢測。
技術優(yōu)勢
1、靈敏度高
比傳統(tǒng)ELISA靈敏度提高1000倍以上；檢測下限達到fg/mL，實現(xiàn)了超低豐度蛋白的有效檢測和定量。
2、全自動化
試驗過程不依賴操作人員，從而保證結果的重復性和精準性。
3、多重檢測
同時完成多達10種目標分子的檢測。
4、高精準度
實驗結果的批間變異系數(shù)（CVS）低于10%。
5、高線性范圍
檢測動態(tài)范圍>4個數(shù)量級。
6、自主研發(fā)
可根據(jù)試驗目的進行方案開發(fā)和優(yōu)化，適合科研創(chuàng)新研究。
應用領域
1、神經(jīng)性疾病的檢測
借助單分子免疫檢測技術的超高靈敏特性，可充分檢測出血液樣本中的生物標志物水平 ，在神經(jīng)性退行性疾病的診斷中具有重要意義.
2、腫瘤檢測
用于腫瘤早期診斷及治療后的監(jiān)測。利用 SimoA 對前列腺特異性抗原(PSA)進行檢測，2 zmol/L 的檢測靈敏度使得對前列腺癌的早期診斷成為可能，并且對于經(jīng)過放療或者切除前列腺的患者，能夠提前數(shù)月乃至數(shù)年發(fā)現(xiàn)腫瘤的復發(fā)，對于提升患者的生存率具有重要意義。
3、傳染性疾病檢測
目前主要集中在病原體自身標志物及細胞因子。在針對 SARS-Cov-2檢測中，利用 SimoA 將血液中 N 蛋白的檢測靈敏度提高至RT-PCR 的檢測水平(1 zmol/L)，可作為核酸檢測的有效補充手段，對于感染的早期診斷及病情進展監(jiān)測具有重要意義。
參考文獻：
[1] 張杏羨.單分子免疫檢測技術的研究進展[J].醫(yī)學信息,2022,35(18):176-179.
[2] 張雪潔,湯家寶,李廷棟,葛勝祥.單分子免疫檢測技術研究進展[J].中國生物工程雜志, 2021,41(04) : 47-54.DOI: 10.13523 /j.cb.2101006.
[3] 王繼業(yè),姚偉宣,王鵬娟,孟凡偉.數(shù)字化單分子免疫分析技術研究進展及領域應用展望[J].現(xiàn)代信息科技,2019,3(10):16-18.
[4] 樊曉旭,張皓博,劉蒙達,遲慶安,亓菲,劉婷婷,孫淑芳,范偉興.單分子免疫陣列技術在傳染病診斷中的應用[J].中國動物檢疫,2021,38(07):73-78.
