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                                         轉(zhuǎn)基因植物Bt基因PCR檢測試劑盒操作流程 

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以下原則：
1、引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)并具有特異性。
2、 產(chǎn)物不能形成二級結(jié)構(gòu)。
3、引物長度一般在15~30堿基之間。
4、G+C含量在40%~60%之間。
5、堿基要隨機(jī)分布。
6、引物自身不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ)。
7、引物之間不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ)。
8、引物5′端可以修飾。
9、引物3′端不可修飾。
10、引物3′端要避開密碼子的第3位。

PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul