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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人甲狀腺癌組織源經(jīng)檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人甲狀腺癌組織源原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 甲狀腺癌組織 |
英文名稱 | Human Thyroid Cancer Tissue-Derived Cells | 貨號(hào) | YS-01X7452 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人甲狀腺癌組織源細(xì)胞分離自癌組織；癌（cancer）是指起源于上皮組織的惡性腫瘤，是惡性腫瘤中常見(jiàn)的一類。相對(duì)應(yīng)的，起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名，如腎母細(xì)胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說(shuō)的“癌癥"習(xí)慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細(xì)胞分化和增殖異常、生長(zhǎng)失去控制、浸潤(rùn)性和轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)特征，其發(fā)生是一個(gè)多因子、多步驟的復(fù)雜過(guò)程，分為致癌、促癌、演進(jìn)三個(gè)過(guò)程，與吸煙、感染、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關(guān)。癌細(xì)胞，是一種變異的細(xì)胞，是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細(xì)胞與正常細(xì)胞不同，有無(wú)限增殖、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點(diǎn)，能夠無(wú)限增殖并破壞正常的細(xì)胞組織。癌細(xì)胞除了分裂失控外（能進(jìn)行多極分裂），還會(huì)局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
公司產(chǎn)品：
原代內(nèi)皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml | u-T3 ELISA Kit 大鼠高敏三碘甲狀腺原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf173： 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框173抗體 0.2ml | GRB10： 生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CERK 酰胺激酶CERK抗體 規(guī)格 0.2ml | Prominin 2： 造血干細(xì)胞抗原CD133相關(guān)蛋白抗體 0.1ml |
Anti-Nm23/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)移抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GLI1(GLI-Kruppel family member 1) 下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗原 0.5mg |
Streptavidin/FITC 熒光素標(biāo)記鏈霉親和素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.3ml | MAG： 髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體 0.1ml |
ACE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293 001A 人腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人腦血管周細(xì)胞總RNAHBVC NA | CD34 Others Rat 大鼠 CD34 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人支氣管上皮細(xì)胞(HBEpiC)(5×105 ) 細(xì)胞名稱 種屬 | 12. 骨骼細(xì)胞系統(tǒng) |
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | SNU-398細(xì)胞，人肝癌細(xì)胞 人類胚胎腎臟表皮細(xì)胞,H293T細(xì)胞 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL4 | 人甲狀腺癌組織源原代細(xì)胞Prominin 2： 造血干細(xì)胞抗原CD133相關(guān)蛋白抗體 0.1ml |
HEp-2細(xì)胞，人喉表皮樣癌細(xì)胞 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,HUVE-12/CRL2480細(xì)胞 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21 | 人滑膜細(xì)胞總RNAHS NA |
人腦瘤細(xì)胞;SF17 | HA Others H4N8 甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤) 5×106cells/瓶×2 BALB/3T3(BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞) | Anti-phospho-IKK beta (Tyr188) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化核因子κB激酶beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-RGS2 G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | QGY-7703細(xì)胞，人肝癌細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞,WISH細(xì)胞 大鼠骨肉瘤細(xì)胞;UMR-106 |
Rhesus antibody Rh Phospho-IRF7 (Ser471/472) 0酸化干擾素調(diào)節(jié)因子7抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL26 Kelch樣蛋白26抗體 規(guī)格 0.2ml |
HBcAb(IgM) 乙型肝炎核心抗體 IgM 96T | ACE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
操作步驟：
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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