化工儀器網
詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人滑膜成纖維采用混合酶消化結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人滑膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 人滑膜成纖維原代細胞 | 組織來源 | 滑膜組織 |
英文名稱 | Human Synovial Fibroblast Cells | 貨號 | YS-01X7698 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人滑膜成纖維細胞分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關節(jié)腔內面的內襯結構，各種關節(jié)內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構，同時在各種關節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關節(jié)炎（OA）以關節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?，其病理改變累及關節(jié)的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關節(jié)的退變?；ぜ毎菢嫵苫拥拇蠹毎后w，是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構，它包埋在顆粒狀無定性的基質中，基質內有分散的纖維分布?；び?span>A型（巨噬樣滑膜細胞）、B型（成纖維樣滑膜細胞）以及C型（樹突細胞樣滑膜細胞）細胞組成。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次；
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
原代平滑肌細胞特制基礎培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml | NMDAR2A： 谷酸受體2A抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh MeCP2 甲基化CpG結合蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-TRAF3/CD40bp /FITC 熒光素標記CD40結合蛋白/CD40受體相關因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TNF-alpha 壞死因子-α抗原 0.5mg | Anti-NuMA 核有絲分裂器NuMA蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-FPRL1 /FITC 熒光素標記脂氧素受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh Slit2/Slil3 遷移蛋白Slit2/3抗體 規(guī)格 0.1ml |
anti-PDI/FITC 熒光素標記蛋白質二硫鍵異構酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-AQP7/FITC 熒光素標記水通道蛋白-7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
PDGFRB Others Human 人 PDGFRB / CD140b 人細胞裂解液 (陽性對照) | PVRL3 Others Human 人 PVRL3 / CD113 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人內根殼細胞裂解物HHIRSCL | CHODL Others Rat 大鼠 CHODL / CHOndrolectin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
IFNGR1 Others Human 人 IFNγR1 / CD119 人細胞裂解液 (陽性對照) | IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照) |
ERAP2 Others Human 人 LRAP / ERAP2 人細胞裂解液 (陽性對照) | CSAG1 Others Human 人 CSAGE / CSAG1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
豹貓肌肉成纖維樣細胞;LCM4 | 人滑膜成纖維原代細胞Anti-NuMA 核有絲分裂器NuMA蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人細胞裂解液 (陽性對照) | CSC, 小鼠心肌細胞 |
尿道上皮細胞培養(yǎng)基UCM | 人人(HEK-a) ( 5×105 ) 小鼠成纖維細胞(EGFP標記) Mouse |
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL2 中國倉鼠肺細胞，V79-4細胞 3T6-Swiss albino細胞，小鼠胚胎成纖維細胞 | GST tag： GST標簽蛋白抗體 0.1ml |
Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit 人血漿α顆粒膜蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | PGLYRP1 Others Mouse 小鼠 PGLYRP / TNFSF3L 人細胞裂解液 (陽性對照) |
轉移抑制基因抗體 Anti-Kiss-1 0.1ml | sLR ELISA Kit 大鼠可溶性瘦素受體 96T |
AIP1： 激活素受體相互作用蛋白1抗體 0.2ml | PDGFRB Others Human 人 PDGFRB / CD140b 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
化工儀器網