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詳細介紹
人呼吸道上皮原代細胞
人呼吸道上皮細胞分離自呼吸道；呼吸道是肺呼吸時氣流所經(jīng)過的通道，有肺脊椎動物的呼吸道分上、下兩部：鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道，合稱為下呼吸道，或稱為氣管樹。氣管樹是隨著動物的進化逐漸復雜化的。整個呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛（鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外），它能溫暖（或冷卻）、濕潤和凈化吸入的空氣，對于呼吸器官和機體有著保護作用。呼吸道以骨或軟骨做支架，其內(nèi)表面覆蓋著黏膜，黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細血管。呼吸道上皮細胞屬于假復層纖毛柱狀上皮，分布于呼吸道的內(nèi)表面，主要由柱狀，杯形，梭形和錐形等不同形狀細胞組成?？瓷先ハ駨蛯由掀ぃ珜嶋H上所有細胞底部均附于基膜上，屬單層上皮，故稱假復層柱狀上皮，上皮表面有纖毛，杯狀細胞可分泌粘液，包裹著大量細菌，借助纖毛不斷擺動將其慢慢移動至出消化道。
英文名稱 | Human Respiratory Epithelial Cells | 組織來源 | 呼吸道 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7069 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人呼吸道上皮細胞
組織來源：呼吸道
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人呼吸道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
CFPAC-1細胞，胰腺癌細胞 鼻咽癌細胞系,SUNE-1亞株-5-8F細胞 CL-0322Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細胞)5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh GIG8/ID2 DNA結(jié)合抑制因子2抗體 規(guī)格 0.1ml |
Bcl-2(Human B-cell leukemia/lymphoma 2) ELISA Kit 人B細胞淋巴瘤因子2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | Gold 膠體金標記的兔抗親和素 2ml |
IL-17： 白介素-17抗體 0.1ml | TPA ELISA Kit 大鼠組織多肽抗原 96T |
Rhesus antibody Rh RING5 環(huán)指蛋白5抗體(E3泛素蛋白連接酶RNF5) 規(guī)格 0.2ml | Anti- Beta-lactoglobulin/FITC 熒光素標記β-乳球蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355) 0酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 規(guī)格 0.1ml | MHC- II /H-2 II (Mouse major histocompatibility complex- II ) ELISA Kit 小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類 96T |
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 | 中國倉鼠卵巢細胞-二氫還原酶缺陷型;CHO/dhFr- |
NCI-H460[H460]細胞，大細胞肺癌細胞 人腦膠質(zhì)瘤細胞,H4細胞 小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32 | 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFP |
腦膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 非洲綠猴腎細胞;BS-C-1 |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0906 | 小鼠腸微血管細胞培養(yǎng)基 100mL |
HEPA1-6細胞，小鼠肝癌細胞 人卵巢癌細胞,OVCaR-3細胞 人膀胱平滑肌細胞裂解物HBdSMCL | 人呼吸道上皮原代細胞TPA ELISA Kit 大鼠組織多肽抗原 96T |
獼猴皮膚細胞;MMS7 | 人胚肺二倍體細胞;HEL-1 人胃粘膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
VSIG8 Others Human 人 VSIG8 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H025人胰腺上皮細胞培養(yǎng)基100mL |
人胚肺成纖維細胞;IMR-90 | Rhesus antibody Rh APOL3 載脂蛋白L3抗體 規(guī)格 0.2ml |
BZW2： BZW2蛋白抗體 0.2ml | HT1080 人成纖維瘤細胞 |
Anti-Raptor /FITC 熒光素標記mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | peripherin： 外周蛋白抗體 0.1ml |
Anti-CD158b2/KIR2DL3/NKAT2a/FITC 熒光素標記NK細胞抑制性受體2DL3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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