化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
人大隱靜脈平滑肌原代細胞
人大隱靜脈平滑肌細胞分離自大隱靜脈；大隱靜脈起于足背靜脈弓內(nèi)側(cè)端，經(jīng)內(nèi)踝前方，沿小腿內(nèi)側(cè)緣伴隱上行，經(jīng)股骨內(nèi)側(cè)髁后方，進入大腿內(nèi)側(cè)部，與股內(nèi)側(cè)皮伴行，逐漸向前上，在恥骨結(jié)節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔，匯入股靜脈，其匯入點稱為隱股點。有5條屬支：旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內(nèi)側(cè)淺靜脈和股外側(cè)淺靜脈，它們匯入大隱靜脈的形式多樣，相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結(jié)扎時，須分別結(jié)扎、切斷各屬支，以防復(fù)發(fā)。大隱靜脈平滑肌細胞主要功能：①血管平滑肌細胞的生長潛力是原發(fā)血管病發(fā)的重要異常因素；②參與血管壁的炎癥反應(yīng)，并與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關(guān)。因此，研究大隱靜脈平滑肌細胞的代謝和信號通路是研究大隱靜脈擴張等疾病的良好實驗材料。大隱靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
英文名稱 | Human Great Saphenous Vein Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 大隱靜脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7300 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人大隱靜脈平滑肌細胞
組織來源：大隱靜脈組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人大隱靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人大隱靜脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6 | Alpha-GST ELISA Kit 大鼠αS轉(zhuǎn)移酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1ORF190： 1號染色體開放閱讀框190抗體 0.2ml | GCNT1： GCNT1葡萄糖轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CG6856/CG6856-PA 果蠅CG6856-PA抗體 規(guī)格 0.5ml | Progestin Receptor Beta： 孕激素受體β(MPRβ)抗體 0.2ml |
Anti-NKR/Neurokin B receptor /FITC 熒光素標記激肽-B受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Glypican 4(Glypican proteoglycan 4) 0脂?；嫉鞍拙厶?span>-4抗原 0.5mg |
IgM/FITC 熒光素標記兔抗羊IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml | MIA2： 黑色素瘤抑制活性蛋白2抗體 0.2ml |
PLAC9 Others Human 人 PLAC9 / Placea-specific 9 人細胞裂解液 (陽性對照) | SHG-44 (人膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人胚肺成纖維細胞;MRC-5 | FANCA Others Human 人 FANCA / FACA 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
KATO III(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 敗毒梭菌Closidium septicum | C1QB Others Human 人 C1QB / C1qB 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
ERBB2 Others Rhesus 恒河猴 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照) | SNU-182細胞，人肝癌細胞 穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞,293E細胞 外周血白細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
腸微血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人大隱靜脈平滑肌原代細胞Progestin Receptor Beta： 孕激素受體β(MPRβ)抗體 0.2ml |
BV-2小鼠小膠質(zhì)細胞 Microglial cells of BV-2 mice 1640+20%FBS | 人虹膜色素上皮細胞cDNAHIPEpiC cDNA |
HSC-T6 大鼠肝星形細胞 | HA Others H4N4 甲型流感 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
IL13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL-13 / Ierleukin-13 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-phospho-IKK alpha (Thr23) /FITC 熒光素標記0酸化核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-Ret (Tyr1062) 0酸化指狀蛋白RET抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | 雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3 小鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞培養(yǎng)基 100mL |
Rhesus antibody Rh Phospho-NFKBIB (Ser23) 0酸化KB抑制蛋白β抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLK1 1抗體 規(guī)格 0.1ml |
G-CSF (Rabbit Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 兔粒細胞集落刺激因子 96T | PLAC9 Others Human 人 PLAC9 / Placea-specific 9 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
化工儀器網(wǎng)