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詳細介紹
人大隱靜脈內(nèi)皮原代細胞
人大隱靜脈內(nèi)皮細胞分離自大隱靜脈；大隱靜脈起于足背靜脈弓內(nèi)側端，經(jīng)內(nèi)踝前方，沿小腿內(nèi)側緣伴隱上行，經(jīng)股骨內(nèi)側髁后方，進入大腿內(nèi)側部，與股內(nèi)側皮伴行，逐漸向前上，在恥骨結節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔，匯入股靜脈，其匯入點稱為隱股點。有5條屬支：旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內(nèi)側淺靜脈和股外側淺靜脈，它們匯入大隱靜脈的形式多樣，相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結扎時，須分別結扎、切斷各屬支，以防復發(fā)。大隱靜脈內(nèi)皮細胞對維持大隱靜脈動態(tài)平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統(tǒng)的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調(diào)節(jié)因子；大隱靜脈內(nèi)皮細胞還釋放控制細胞增殖和調(diào)節(jié)血管壁緊張度的分子。
英文名稱 | Human Great Saphenous Vein Endothelial Cells | 組織來源 | 大隱靜脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7314 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人大隱靜脈內(nèi)皮細胞
組織來源：大隱靜脈組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人大隱靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人大隱靜脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
人結直腸腺癌細胞;HCT-8 [HRT-18] 大鼠卵巢顆粒細胞培養(yǎng)基 100mL | ALS2CR8： 肌側索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體 0.2ml |
Anti-HDAC11 組蛋白去乙?；?span>11抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ABP/SHBG 雄激素結合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-Caspase-6 (NT)/FITC 熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFNAR1 干擾素α受體抗體 規(guī)格 0.1ml |
ASPP1(apoptosis stimulating protein of P53 1) p53凋亡刺激蛋白1抗原 0.5mg | HECTD2： E3連接酶抑制素受體2抗體 0.2ml |
IgG(3D3)/HRP 辣根過氧化物酶標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM40A FAM家族蛋白40A抗體 規(guī)格 0.2ml |
EMT-6 小鼠癌 | 人腎上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
B16F10細胞，小鼠黑色素瘤高轉移細胞 FRhK-4(恒河猴胚腎細胞) SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19 | CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 |
大鼠前脂肪細胞培養(yǎng)基 100mL | IFNA4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽) |
原代元細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml | 綿羊肺細胞;OAR-L1 |
B16-F0小鼠黑色素瘤細胞 B16-F0 mouse melanoma cells DMEM+10% FBS | 人大隱靜脈內(nèi)皮原代細胞Rhesus antibody Rh IFNAR1 干擾素α受體抗體 規(guī)格 0.1ml |
EREG Protein Human 重組人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽) | 小鼠骨髓間充質(zhì)肝細胞(MMSC-bm)(5×105) |
犬腎細胞;MDCK/IgR | 酶-EDTA(含10mL 酶解緩沖液) 1mL |
EB病毒轉化的絨猴淋巴細胞;B95-8 | Rhesus antibody Rh IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗長爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml |
HP-CagA-IgG(Human Helicobacter pylori cytotoxin-associated gene A protein IgG) ELISA Kit 人幽門螺桿菌細胞毒素相關基因蛋白A-IgG 96T | HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞系 Human |
ADRB3/ Beta3-AR ( Beta3-adrenergic receptor) 能受體β3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | Cys-C(Human Cystatin C) ELISA Kit 人半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T |
MSR1： 巨噬細胞清道夫受體1抗體 0.2ml | EMT-6 小鼠癌 |
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