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詳細(xì)介紹
人腸靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞
人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自腸靜脈；腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的，大腸主要濃縮食物殘?jiān)?，形成糞便，再通過直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。
英文名稱 | Human Intestinal Vein Endothelial Cells | 組織來源 | 腸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7141 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源：腸組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腸靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腸靜脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12 | NPTN： 間質(zhì)細(xì)胞衍化因子受體1抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh MEIS1 同源盒蛋白Meis1抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-TPO/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗甲狀腺過氧化物酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TRAF3/CD40bp (CD40 binding protein) 壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗原 0.5mg | Anti-NT-3 營養(yǎng)因子-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Anti-Phospho-FoxO4 (Ser193) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLU7 SLU7蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-PDGF-R-B/FITC 熒光素標(biāo)記血小板源性生長因子受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-APPL1/FITC 熒光素標(biāo)記抗銜接因子蛋白含pH域0酸酪結(jié)合域和亮拉鏈基元1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
MCAM Others Mouse 小鼠 CD146 / MCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 大鼠中腦縫細(xì)胞(腦脊)(RNr)(1×106) WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞 Human |
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5 | IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
HBdSMC-c 人類膀胱平滑肌細(xì)胞(HBdSMC) 500,000cells 原代內(nèi)皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml | CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
DLD-1(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2 | PILRB Others Mouse 小鼠 PILRB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
超氧化物歧化酶分析試劑盒SOD | 人腸靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞Anti-NT-3 營養(yǎng)因子-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
HGF Others Rat 大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | HAVSMC, 人主動脈平滑肌細(xì)胞 Human |
腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基MenCM-prf | 人表皮黑色素細(xì)胞-淺色素(HEM)( 5×105 ) mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞 Mouse |
A375細(xì)胞，人惡性黑色素瘤細(xì)胞 糞腸球菌 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480 [SW 480;SW-480] | GLI1： 腦膠質(zhì)瘤相關(guān)蛋白抗體(鋅指蛋白5) 0.1ml |
Human soluble fibrin monomer complex,SFMC ELISA Kit 人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | CMA1 Others Human 人 CMA1 / Chymase 1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
轉(zhuǎn)移生長因子–α抗體 Anti-TGF-α 0.1ml | TNF- Alpha ELISA KIT 大鼠壞死因子α 96T |
beta-Amyloid 1-42(CT)： β淀粉樣肽/Aβ42抗體 0.1ml | MCAM Others Mouse 小鼠 CD146 / MCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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