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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的雞前脂肪采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的雞前脂肪經(jīng)油紅O染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 雞前脂肪原代細胞 | 組織來源 | 脂肪組織 |
英文名稱 | Chicken Preadipocyte Cells | 貨號 | YS-01X7022 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
雞前脂肪細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細胞：一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細胞；另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細胞。前脂肪細胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪細胞呈圓形，已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細胞是一類具有增殖和向脂肪細胞分化能力的特異化前體細胞，與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細胞是一種類成纖維細胞，在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì)，終成為成熟的脂肪細胞。前脂肪細胞對外界機械損傷的抵抗力較強，可望成為軟組織缺損的有益填充物。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
VERO C1008細胞，非洲綠猴腎細胞 人胰腺腺泡上皮癌,HPAC細胞 CM-M087小鼠軟骨細胞培養(yǎng)基100mL | beta-Actin (Loading Control)： β-肌動蛋白/β-Actin 抗體(內(nèi)參抗體) 0.1ml |
Anti-HDAC8 組蛋白去乙酰化酶8抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ACADM/MCAD 酰脫氫酶中鏈抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Caspase-3 p17 subunit/FITC 熒光素標(biāo)記Caspase-3 p17 subunit蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFNGR2 干擾素-gamma受體2抗體 規(guī)格 0.2ml |
Ang I/AT1(Angiotensin I) 血管緊張素I抗原 0.5mg | HDDC3： 四0酸鳥苷水解酶抗體 0.2ml |
IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM50A FAM50A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
大鼠胰腺外分泌腺細胞;AR42J | 人腎動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL |
F9細胞，小鼠畸胎瘤細胞 A549 [A-549](肺癌細胞) 人癌細胞;MDA-MB-453 | CXCL16 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
HSC 人胃癌細胞 | VEGFA Protein Human 重組人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白 |
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A | 綿羊皮膚細胞;OAR-S1 |
J82人膀胱移行細胞癌 J82 human bladder ansitional cell carcinoma MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | 雞前脂肪原代細胞Rhesus antibody Rh IFNGR2 干擾素-gamma受體2抗體 規(guī)格 0.2ml |
HUVEC, 人臍靜脈內(nèi)皮細胞 Human | 小鼠中腦縫細胞(腦脊)(MN-r)(1×106) |
CHO/dhFr-細胞，中國倉鼠二氫還原酶缺陷細胞 人肝癌細胞,HuH-7細胞 CL-0144LoVo(人大腸癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 原代腎實質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;Mao | Rhesus antibody Rh IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格 0.1ml |
VEGFR-1/Flt1(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1 96T | 小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(EGFP標(biāo)記) |
BSA(標(biāo)準(zhǔn)) 血清白蛋白(標(biāo)準(zhǔn))Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg | Ang- I (Human angiotension I ) ELISA Kit 人血管緊張素ⅠMulti-class antibodies規(guī)格： 48T |
MIER2： 中胚層誘導(dǎo)早期反應(yīng)蛋白2抗體 0.2ml | 大鼠胰腺外分泌腺細胞;AR42J |
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