詳細(xì)介紹
大鼠支氣管上皮原代細(xì)胞
大鼠支氣管上皮細(xì)胞分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級(jí)分枝,由氣管分出的一級(jí)支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細(xì)長(zhǎng),走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的第一道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞,還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子,從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。支氣管上皮細(xì)胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發(fā)病機(jī)制中均起著重要的作用。體外培養(yǎng)的原代支氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性,因此,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。
英文名稱 | Rat Bronchial Epithelial Cells | 組織來源 | 支氣管組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7032 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠支氣管上皮細(xì)胞
組織來源:支氣管組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管上皮采用蛋白酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合機(jī)械刮刷并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
大鼠血管生成素樣蛋白1(ANGPTL1)試劑盒 ,英文名: ANGPTL1 ELISA Kit
Mouse prostaglandin F (PGF) ELISA Kit 小鼠前列腺素F(PGF)試劑盒
MouseStemCellFactorReceptor,SCFRELISAkit 小鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanBeta-Thromboglobulin,Beta-TGELISAKit人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白
細(xì)胞DNA損傷彗星熒光試劑盒20次
ELISAKitAZT大鼠
小鼠核因子kb(NF-kb)試劑盒 96T/48T
Rat ovalbumin specific IgE (OVA sIgE) ELISA Kit 大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)試劑盒
humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMABELISAKIT 人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAi-OvaryAibody,AOAb試劑盒人抗卵巢抗體(AOAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物高效液相色譜法定量試劑盒20次
Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit人酪激酶2(Tyk-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒 96T/48T
小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒 96T/48T
小鼠抗受體(A)試劑盒 96T/48T
小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒 96T/48T
ERAP2重組人 LRAP / ERAP2 蛋白 Protein
血紅素氧合酶1(HO1)重組蛋白 Recombinant Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
CD7 Protein Human 重組人 CD7 蛋白
GP120 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC)
GBC-SD(人膽囊癌細(xì)胞) SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3 Hela/DDP細(xì)胞,Hela細(xì)胞耐藥亞株 人急性T淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞,MOLT-4細(xì)胞 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33- 小鼠原代骨髓單核細(xì)胞 人原代口腔黏膜上皮細(xì)胞
大鼠支氣管上皮原代細(xì)胞Bursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽 100mgBursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽
CTNNB1 Protein Human 重組人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
CD36重組小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 Protein
NTRK1 Protein Rat 重組大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CCL15重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標(biāo)簽) Protein