詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠雪旺氏采用-膠原酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠雪旺氏經(jīng)S-100免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠雪旺氏原代細胞 | 組織來源 | 神經(jīng)組織 |
英文名稱 | Rat Schwann Cells | 貨號 | YS-01X7360 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介:
大鼠雪旺氏細胞分離組織;周圍系統(tǒng)中的膠質(zhì)細胞稱施萬(schwann,又名雪旺細胞)細胞,它沿元的突起分布。施萬細胞包裹在纖維上,這種纖維叫有髓纖維。有髓纖維和無髓纖維的施萬細胞的形態(tài)和功能有所差異,施萬細胞的外表面有基膜,能分泌營養(yǎng)因子,促進受損的元的存活及其軸突的再生,參與周圍系統(tǒng)中纖維的構成。施萬細胞的胞核呈長卵圓形,其長軸與軸突平行,核周有少量胞質(zhì)。由于施萬細胞包在軸突的外面,故又稱膜細胞(neurilemmalcell),它的外面包有一層基膜。施萬細胞外面的一層胞膜與基膜一起往往又稱膜(neurilemma),光鏡下可見此膜。在有髓纖維發(fā)生中,伴隨軸突一起生長的施萬細胞表面凹陷成一縱溝,軸突位于縱溝內(nèi),溝緣的胞膜相貼形成軸突系膜(mesaxon)。軸突系膜不斷伸長并反復包卷軸突,把胞質(zhì)擠至細胞的內(nèi)、外邊緣及兩端(即靠近郎氏結處),從而形成許多同心圓的螺旋膜板層,即為髓鞘。故髓鞘乃成自施萬細胞的胞膜,屬施萬細胞的一部分。施萬細胞的胞質(zhì)除見于細胞的外、內(nèi)邊緣和兩端外,還見于髓鞘板層內(nèi)的施-蘭切跡。該切跡構成螺旋形的胞質(zhì)通道,并與細胞外、內(nèi)邊緣的胞質(zhì)相通。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 雙極、多極形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品:
大鼠乙醇脫氫酶1(ADH1)試劑盒 ,英文名: ADH1 ELISA Kit
Mouse terminal compleme complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit 小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒
MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAkit 小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumandecay-acceleratingfactor,DAFELISAKit人降解加速因子
細胞Akt3/PKBγ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
PPAR-γ大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ
小鼠7α-羥化酶(CYP7A1)試劑盒 96T/48T
Human placeal alkaline phosphatase (PLAP) ELISA Kit 人胎盤堿性0酸酶(PLAP)試劑盒
Humanai-thrombieceptor,AELISAKit 人抗受體(A)試劑盒 96T/48T 進口分裝
humanAzidothymidine,AZT試劑盒人(AZT)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物源性飼料處理試劑盒20次
Humahrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit人抗復合物(TAT)試劑盒規(guī)格:96T/48T
脫氧膽酸 10g
DeoxycholicAcid,SodiumSalt 50g
焦碳酸二乙脂 10ml
DEPC 100ml
ACVRL1重組小鼠 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase 0.5mgCNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase) C型尿肽抗原
LSAMP重組人 LSAMP 蛋白 Protein
ANXA5 Protein Human 重組人 ANXA5 / Annexin Ⅴ / Annexin A5 蛋白
IL13RA2 Protein Mouse 重組小鼠 IL13RA2 / CD213A2 蛋白 (His 標簽)
EL4IL-2細胞,淋巴瘤細胞 人急性早幼粒白血病細胞,NB4細胞 人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE) NCI-H345細胞,人小細胞肺癌細胞 小鼠腦瘤細胞,Neuro-2a細胞 CM-H119人腦膜細胞人腦血管平滑肌細胞 小鼠原代角膜基質(zhì)細胞 人原代尾椎腫瘤細胞
大鼠雪旺氏原代細胞PAR-2 (Protease-activated receptors-2 0.5mgPAR-2 (Protease-activated receptors-2) 蛋白酶激活受體-2抗原
CCL20 Protein Human 重組人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白
HA重組甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
AZU1 Protein Human 重組人 AZU1 / Azurocidin 1 / CAP37 蛋白
SUV420H2重組人 SUV420H2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein