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技術(shù)文章

人白介素6 高敏ELISA試劑盒操作概要

閱讀:145          發(fā)布時間:2020-5-14

人白介素6 高敏ELISA試劑盒操作概要:

1.實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;

2.加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)50μL,37℃孵育30分鐘;

3.洗板5次,加酶標(biāo)試劑50ul,37℃孵育半小時;

4.洗板5次;加入顯色液A,B各50ul,37℃孵育顯色15分鐘

5.加終止液50μL,立即450nm讀數(shù)。

6.計(jì)算

結(jié)果判斷:

1.每個標(biāo)準(zhǔn)品的OD值減去空白孔的OD值后作圖,如設(shè)置復(fù)孔,則應(yīng)取其平均值計(jì)算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,乘以稀釋倍數(shù);亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

3.若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測,計(jì)算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

 

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