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蛋白快速染色液(免脫色)用戶指南

時(shí)間:2025-4-10閱讀:181

蛋白快速染色液(免脫色)用戶指南

產(chǎn)品概述

蛋白快速染色液(免脫色)是一款專為科研工作者設(shè)計(jì)的高效蛋白質(zhì)染色試劑。該產(chǎn)品顯著縮短了傳統(tǒng)蛋白染色流程所需的時(shí)間,同時(shí)省略了繁瑣的脫色步驟,在保證高靈敏度和分辨率的前提下,極大地提高了實(shí)驗(yàn)效率,適用于 SDS - PAGE(十二烷基硫酸鈉 - 聚丙烯酰胺凝膠電泳)等多種蛋白分離凝膠的染色分析。

技術(shù)原理

本染色其中的染色成分能夠特異性地與蛋白質(zhì)分子結(jié)合。在染色過(guò)程中,染色劑通過(guò)靜電作用、疏水作用以及范德華力等多種分子間作用力,迅速且牢固地附著于蛋白質(zhì)條帶之上。與傳統(tǒng)染色方法不同的是,該染色液中的添加劑能夠抑制背景染色,使得蛋白質(zhì)條帶在凝膠背景中清晰呈現(xiàn),無(wú)需額外的脫色步驟來(lái)去除背景雜色,從而實(shí)現(xiàn)快速、高對(duì)比度的染色效果。

產(chǎn)品特點(diǎn)

00001. 快速染色:相較于傳統(tǒng)染色方法數(shù)小時(shí)甚至過(guò)夜的染色時(shí)間,本染色液可大大節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間。

00001. 免脫色:創(chuàng)新配方使染色過(guò)程中背景染色得到有效控制,無(wú)需后續(xù)脫色操作,避免了因脫色過(guò)度或不足對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成的影響,同時(shí)減少了實(shí)驗(yàn)操作步驟和試劑消耗。

00001. 高靈敏度:能夠檢測(cè)到的蛋白質(zhì)含量,可清晰分辨出不同分子量的蛋白質(zhì)條帶,滿足科研對(duì)微量蛋白檢測(cè)的需求。

00001. 兼容性強(qiáng):適用于各種常見(jiàn)的聚丙烯酰胺凝膠濃度,包括不同比例的分離膠和濃縮膠,且與多種蛋白樣品制備方法兼容。

使用方法

染色前準(zhǔn)備

00001. 完成 SDS - PAGE 電泳后,小心取出凝膠,放入合適的染色容器中。建議使用塑料或玻璃容器,避免使用金屬容器以防染色液發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。

00001. 準(zhǔn)備適量的蛋白快速染色液。根據(jù)凝膠的大小和數(shù)量,按照每平方厘米凝膠面積使用比例進(jìn)行準(zhǔn)備。

染色步驟

00001. 將準(zhǔn)備好的蛋白快速染色液緩慢倒入裝有凝膠的容器中,確保凝膠浸沒(méi)在染色液中。染色液應(yīng)覆蓋凝膠表面以保證染色均勻。

00001. 將容器置于水平搖床上,設(shè)置轉(zhuǎn)速,在室溫下染色。染色過(guò)程中,染色液中的成分會(huì)逐漸與蛋白質(zhì)結(jié)合,蛋白質(zhì)條帶將開(kāi)始顯現(xiàn)。

結(jié)果觀察與記錄

00001. 染色完成后,直接將凝膠從染色液中取出,置于凝膠成像系統(tǒng)或透射式紫外分析儀下觀察。此時(shí),蛋白質(zhì)條帶應(yīng)清晰可見(jiàn),背景干凈。

00001. 使用凝膠成像軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行拍照記錄。調(diào)整合適的曝光時(shí)間、對(duì)比度和亮度等參數(shù),以獲取清晰、準(zhǔn)確反映蛋白質(zhì)條帶信息的圖像。建議保存原始圖像文件,以便后續(xù)分析。

注意事項(xiàng)

00001. 染色液具有一定的腐蝕性,使用時(shí)需佩戴手套、護(hù)目鏡等防護(hù)裝備,避免皮膚和眼睛直接接觸。如不慎接觸,應(yīng)立即用大量清水沖洗,并及時(shí)就醫(yī)。

00001. 染色液應(yīng)避光保存于 4℃冰箱中,使用前需恢復(fù)至室溫。避免反復(fù)凍融,以免影響染色效果。

00001. 不同品牌和批次的凝膠可能對(duì)染色效果有輕微影響。若使用新的凝膠產(chǎn)品,建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)以優(yōu)化染色條件。

00001. 染色后的凝膠和剩余染色液應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室化學(xué)廢棄物處理規(guī)定進(jìn)行妥善處理,避免對(duì)環(huán)境造成污染。

常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法

00001. 染色條帶不清晰:可能原因是染色時(shí)間不足或染色液濃度過(guò)低??蛇m當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間,或按照說(shuō)明書比例增加染色液濃度后重新染色。

00001. 未檢測(cè)到目標(biāo)蛋白條帶:檢查蛋白上樣量是否過(guò)低,可適當(dāng)增加上樣量并重做實(shí)驗(yàn)。同時(shí)確認(rèn)目標(biāo)蛋白是否表達(dá)異常,可通過(guò)其他方法如 Western blot 進(jìn)行驗(yàn)證。

通過(guò)正確使用本蛋白快速染色液(免脫色),科研人員能夠高效、準(zhǔn)確地對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行染色分析,為科研工作提供有力支持。



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