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多重免疫組化，主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù)，TSA即酪酰胺信號放大(Tyramide signal amplification)是一類利用辣根過氧化酶（HRP）對靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測方法。該技術(shù)可與高性能染料Alexa Fluor®、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的過氧化物酶反應(yīng)(酪胺鹽在HRP催化H202下形成共價鍵結(jié)合位點)，產(chǎn)生大量的酶促產(chǎn)物，該產(chǎn)物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結(jié)合，這樣在抗原-抗體結(jié)合部位就有大量的生物素沉積，與隨后加入的Streptavidin—HRP/熒光基團(tuán)結(jié)合，經(jīng)幾次這樣的循環(huán)放大，可以結(jié)合大量的酶分子or熒光基團(tuán)，結(jié)果使其檢測信號得到幾何級放大。

簡單來說，用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP（而不是直接偶聯(lián)熒光素），來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián)，使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。
然后微波處理，前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉，共價結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育，周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束，熒光素都結(jié)合好后，最后去檢測結(jié)果。

講座主題：大咖來襲！多靶點組織多色與空間表型微環(huán)境解析

講座時間：12月5日（周二）15:00-16:00

講座內(nèi)容：

1.多靶點組織多色與原位分析的技術(shù)原理與進(jìn)展

2.多維度解析組織實驗設(shè)計與分析技巧

3.組織空間大數(shù)據(jù)信息分析方法與案例分享

特邀嘉賓：

李光超 博士  TissueGnostics (TG) 公司

中國科學(xué)院動物研究所畢業(yè)，具有多年顯微成像及病理學(xué)分析領(lǐng)域工作經(jīng)驗，發(fā)表多篇SCI科研論文。著手打造專業(yè)的全景組織流式定量分析平

臺，在腫瘤免疫微環(huán)境、精準(zhǔn)醫(yī)療和個體化治療等領(lǐng)域具有豐富經(jīng)驗。