血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。
胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時，將胎牛取出并進(jìn)行心臟穿刺取血。穿刺取血可很大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比，胎牛血清顯然產(chǎn)量低，成本高。
應(yīng)如何為你的細(xì)胞選購FBS呢？選購FBS應(yīng)考慮哪些標(biāo)準(zhǔn)？
1、血源可追溯性
選擇來源安全、可追溯的FBS對于細(xì)胞培養(yǎng)來說至關(guān)重要。目前市面上存在較多以假亂真的FBS產(chǎn)品，科研工作者對血清的真實(shí)產(chǎn)地、來源難以鑒別。對此，國際血清行業(yè)協(xié)會(ISIA)實(shí)施了供應(yīng)鏈可追溯性的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，以確保FBS的質(zhì)量和安全性。例如，F(xiàn)BS供應(yīng)商是否保留原產(chǎn)地的可追溯記錄？是否持有血清生產(chǎn)各階段處理、運(yùn)輸和商業(yè)交易的文件？這些都是判斷FBS可追溯性需要考慮的因素。
2、產(chǎn)品檢測
每款FBS在生產(chǎn)上市之前，必須經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢測。
質(zhì)控環(huán)節(jié)不可少，以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格，而血清產(chǎn)品分析證書(COA)就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。在COA中，常規(guī)的檢測指標(biāo)包括內(nèi)毒素、總蛋白、細(xì)菌、病毒等，例如我國藥典規(guī)定，F(xiàn)BS中內(nèi)毒素含量應(yīng)≤10EU/mL，另外總蛋白為30-50mg/mL、血紅蛋白檢測不高于30mg/dL。
3、質(zhì)量驗證
我們使用FBS目的是為了讓細(xì)胞更真實(shí)、健康地生長。在確保了FBS的來源真實(shí)性、安全可靠性后，下一步就要對FBS的質(zhì)量，即培養(yǎng)細(xì)胞的效果進(jìn)行鑒定了，而這也是決定細(xì)胞能否養(yǎng)好的關(guān)鍵。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程，質(zhì)量粗糙的FBS可能會導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)生長速度緩慢、不貼壁、容易老化等現(xiàn)象，從而導(dǎo)致實(shí)驗受阻。經(jīng)過質(zhì)量驗證的FBS，則可以十分確定這款FBS對哪些細(xì)胞具有良好的培養(yǎng)效果，進(jìn)而判斷其能否把自己的細(xì)胞養(yǎng)好。對于質(zhì)量優(yōu)質(zhì)的FBS，通常采用血清敏感性細(xì)胞(如干細(xì)胞)來進(jìn)行培養(yǎng)驗證，若培養(yǎng)效果良好，則其他常規(guī)細(xì)胞系的培養(yǎng)就更不在話下。
4、穩(wěn)定性
FBS作為其他行業(yè)的副產(chǎn)品，其生產(chǎn)在本質(zhì)上會受到天氣、食物供應(yīng)、經(jīng)濟(jì)條件和牛群規(guī)模及疫情等各種因素的影響，導(dǎo)致血清的供應(yīng)可能出現(xiàn)貨源、價格及批次間的不穩(wěn)定性，從而造成實(shí)驗的不順甚至實(shí)驗失敗。在過去，國內(nèi)外已有多個實(shí)驗室出現(xiàn)過因血清批間差異大而導(dǎo)致實(shí)驗結(jié)果無法重復(fù)的情況，浪費(fèi)了巨大的時間和金錢成本。
因此，找到穩(wěn)定提供同批次FBS的供應(yīng)商，對于確保自己細(xì)胞實(shí)驗結(jié)果的真實(shí)性和可重復(fù)性具有重要意義，而且花在重復(fù)實(shí)驗或檢驗新批次上的時間將大大減少。
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