細(xì)胞中如果污染細(xì)菌，最常見(jiàn)的有枯草桿菌等革蘭陽(yáng)性菌以及大腸桿菌、假單孢菌等革蘭陰性菌，其中又以白色葡萄球菌較常見(jiàn)。培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后，會(huì)很快出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁，pH 改變。
也有少數(shù)培養(yǎng)液肉眼觀察無(wú)多少改變，只能在鏡下發(fā)現(xiàn)菌體才知污染。所以，每天應(yīng)仔細(xì)觀察。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多、增粗，最后變圓脫落死亡，造成實(shí)驗(yàn)失敗和細(xì)胞株(系)丟失。
細(xì)胞污染的來(lái)源
無(wú)菌觀念薄弱，穿戴不注意
進(jìn)細(xì)胞房不換鞋，不戴口罩，不戴手套，是細(xì)胞房的大忌諱！有更嚴(yán)格的細(xì)胞房連帽子都要戴上。為什么呢？換鞋是為了隔離真菌。戴口罩是為了防止口腔支原體不會(huì)污染細(xì)胞了。不戴手套，根本就清除不掉你手上的細(xì)菌真菌，要不你試試看拿火燎一下你的手，焦了才算滅菌。
紫外線和酒精滅菌，不能亂用
能滅菌，但是紫外和酒精最多只能滅細(xì)菌，對(duì)真菌傷害很小。你不戴手套，僅用噴壺噴手是沒(méi)有什么用的。超凈臺(tái)為什么盡量要用酒精棉球而不是用酒精噴壺呢？因?yàn)橛镁凭耷虻脑?，可以在滅菌的同時(shí)把菌體從手上擦下去。而噴壺只能短暫滅菌而已，所以要多用棉球，少用噴壺。
使用生物安全柜，別超安全線
生物安全柜的玻璃窗是有警戒線的，超過(guò)這個(gè)警戒線，生物安全柜的風(fēng)簾就起不到太大作用，且會(huì)引入室內(nèi)空氣中的真菌，比如你的臭鞋里的酵母啥的。還會(huì)讓你給細(xì)胞送溫暖的呼吸里，自動(dòng)帶上支原體。
拿細(xì)胞培養(yǎng)瓶的時(shí)候不注意操作
用細(xì)胞培養(yǎng)瓶來(lái)培養(yǎng)的時(shí)候，最忌諱的是你拿瓶子的時(shí)候，手拿著有蓋子的那一面。因?yàn)橐话銇?lái)說(shuō)瓶蓋開(kāi)關(guān)是最容易接觸到瓶口的，你手拿著培養(yǎng)瓶，那手的虎口夾縫里所含有的真菌很容易就接觸到瓶蓋上，一旦造成污染，就是很嚴(yán)重的。
實(shí)驗(yàn)用品亂擺放
生物安全柜里操作的時(shí)候，門(mén)前最忌諱堆一堆雜七雜八的東西，槍頭盒、血清、管子，培養(yǎng)皿、移液器、酒精噴壺、酒精燈，堆了一大堆。有的都堵住了安全柜門(mén)前的出風(fēng)口。一來(lái)會(huì)導(dǎo)致操作起來(lái)并不是井井有條，會(huì)導(dǎo)致動(dòng)作幅度過(guò)大，擾亂氣流。二來(lái)這些東西一旦擋住風(fēng)口，也會(huì)擾亂生物安全柜的氣流，氣流變化會(huì)導(dǎo)致外部不潔凈的空氣流入，也同樣會(huì)導(dǎo)致生物安全柜的潔凈作用失效。
不注意清潔水浴鍋
水浴鍋是比較容易忽視的，復(fù)蘇細(xì)胞的時(shí)候，37℃，對(duì)細(xì)菌真菌來(lái)說(shuō)這就是溫床啊。復(fù)蘇完，濕漉漉的凍存管，任你再怎么噴酒精也并沒(méi)有什么意義了。那要怎么辦，水浴鍋一來(lái)是定期清潔，二來(lái)是加一些抑菌劑
水盤(pán)污染
培養(yǎng)箱的水盤(pán)也是坐擁37℃溫床的水環(huán)境。水盤(pán)里若是飄著特別大的一塊塊霉斑。一污染就一箱子全報(bào)廢了，培養(yǎng)箱要定期用0.1%的新潔爾滅或者84清洗(交替使用，防止微生物耐藥)。水盤(pán)也一樣，水盤(pán)中加入飽和的磷酸氫二鈉可以有效預(yù)防細(xì)菌真菌，但是需要定期加入去離子水防止析出。
滅菌滅不好
細(xì)胞房所使用的槍頭，必須要經(jīng)過(guò)濕熱滅菌， 用報(bào)紙包裹好槍頭，是因?yàn)闇缇佉话阍诩?xì)胞房外面，所以要保證內(nèi)部槍頭盒結(jié)晶?？靖墒菫榱朔乐箖?nèi)部有水分，當(dāng)你開(kāi)啟槍頭盒后，有水的地方更容易被霉菌的孢子所接觸附著，也就更容易污染。所以這個(gè)也必須要注意！
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